三顆針水提物體的鎮痛與抗炎作用

2019-10-20 04:29:33宋繼華吳靜蔓

新生代·下半月 2019年4期

宋繼華吳靜蔓

【摘要】：目的：探討三顆針水提取物的抗炎和鎮痛效果。方法：采用小鼠腹腔毛細血管通透性法和二甲苯致小鼠耳腫脹法探討其抗炎效果；采用醋酸扭體法和熱板法探討其鎮痛效果。結果：抗炎實驗結果顯示，三顆針水提物的中、高劑量組對于二甲苯致小鼠腫脹有明顯的抑制作用，與空白組對比差異具有極顯著性（P<0.01）；三顆針水提物的大、中、小劑量組對于小鼠毛細血管通透性的增加有抑制作用（P<0.01）。鎮痛實驗結果顯示，三顆針水提物小、中、大劑量組對于醋酸致小鼠的扭體有抑制作用（P<0.05）；在給藥后，三顆針水提物小、中、大劑量組能提高小鼠的痛閾值（P<0.05）。結論：三顆針水提物有鎮痛抗炎作用。

【關鍵詞】：鎮痛抗炎三顆針水提物

三顆針是一種很常見的中藥材，而且藥理作用顯著，尤其是在抗菌消炎，清熱解毒，降壓，利膽等方面，因三棵針有毒，應病愈即止，且不宜長期服用。主治：肝炎。配方：三顆針（三錢）、地星宿（一兩）、木通（一兩），煎水內服，每天三次、每次100ml。主治：肝炎復水。配方：三顆針（三錢），鐵筷子（五錢）、狗地菜草根（五錢）、甘草（二錢）、木通（一兩），煎水內服，每天三次、每次100ml。本人導師名吳必發，以上配方是他為病人治療時所用的配方，以期為探索其抗炎鎮痛作用提供依據。

實驗部分

1材料與方法

1.1實驗動物

昆明小鼠，體質量（20±1）g，清潔級，由貴陽醫學院研究中心提供。實驗前將動物在室內適應性飼養3d，室溫（20～28℃），相對濕度60%～80%。

1.2藥品與試劑

硫酸羅通定注射液（浙江誠意藥業股份有限公司、規格：60mg/2ml、批號：134018）；醋酸地塞米松片（天津藥業新鄭制藥有限公司、規格：每片75mg、批號140643）；二甲苯（青島正華化工有限公司、批號：130418）；甲醇（東光鑫源化工有限公司、批號：21300737）；冰醋酸（國藥集團化學試劑有限公司、批號：T20090625）；氯化鈉注射液（貴州天地藥業有限責任公司、批號：A12092120）。

1.3儀器與設備

TGL-16B離心機（上海安亭科學儀器廠）；YLS-6B型智能熱板儀（淮北正華生物儀器設備有限公司）；752型紫外分光光度計（南京麒麟分析儀器有限公司）；電子分析天平（奧斯國際貿易（上海）有限公司）；L-204電子天平（梅特勒-托利多中國分公司）。

1.4實驗方法

1.4.1對醋酸致小鼠扭體反應次數的影響[12-14] 取小鼠50只，雌雄各半，隨機分為5組，空白對照組，羅通定組（60mg/kg），三顆針水提物大（21.3mg/kg）、中（10.2mg/kg）、小（5.1mg/kg）劑量組。均灌胃給藥20ml/kg .qd，連續4d 。空白對照組給予同體積純凈水。末次藥后1h、小鼠腹腔注射0.7%醋酸溶液10ml/kg，記錄注射醋酸后15min內小鼠扭體反應次數。

1.4.2 對熱板儀致小鼠疼痛的影響 [14-15] 取雌性小鼠，放入（55±4） ℃熱板測痛儀，各小鼠自放入到出現舔后足所需時間即為痛閾值，5min后重復1次。痛閾<5s或>30s者，以及喜跳者，棄去不用。小鼠分組及給藥同“1.4.1”項，分別在末次給藥后30、60、90、120min測定小鼠的痛閾。小鼠在熱板測痛閾儀內60s仍無痛覺反應則取出，按60s計。

1.4.3對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響[15-16] 取雄性小鼠50只，隨機分為5組，即空白對照組，地塞米松組（5.0mg/kg），三顆針水提物小（5.1mg/kg）、中（10.2mg/kg）、大（21.3mg/kg）劑量組。均灌胃給藥，20ml/kg.qd，連續7d，空白對照組給予同體積純凈水。于末次1h，各組小鼠于右耳廓滴二甲苯20微升致炎（正、反面各滴10微升），15min后脫勁椎處死，直徑6mm打孔器打下左右耳朵，稱定質量，以兩耳質量差值作為腫脹度，并計算抑制率（%）=（空白對照組平均兩耳質量差—給藥組平均兩耳質量差）/空白對照組平均兩耳質量差×100%。

1.4.4對小鼠腹腔通透性的影響 [17-18] 分組及給藥方法同“1.4.3”項，于末次給藥后1h，經小鼠尾靜脈注射0.25%伊文思藍，10ml/kg，小鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液10ml/kg，15min后將小鼠處死，腹腔注射0.9%氯化鈉溶液6ml沖洗，腹腔洗出液2000r/min 離心10min（r=8cm），取上清液體用紫外-分光光度計于590nm波長處測定吸光度（A）值。

1.5統計學方法應用SPSS17.0版軟件進行統計學分析，計量數據以均數±標準差（ ±s）表示，采用t檢驗，以P<0.05表示差異有統計學意義。

2.結果

2.1對醋酸小鼠扭體反應的影響見表1。三顆針水提物大、中劑量組扭體反應次數明顯少于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.01或P<0.05）。提示三顆針水提物對醋酸致小鼠扭體反應有抑制作用。

2.2對熱板儀致小鼠疼痛的影響見表2。三顆針水提物大劑量組小鼠30、60、90、120min痛閾值均明顯低于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.01，P<0.05）；中劑量組小鼠60min 痛閾值明顯低于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.05）；小劑量組小鼠120min痛閾值明顯低于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。提示三顆針水提物可提高熱板致小鼠疼痛的痛閾。

2.3對二甲苯致小鼠耳腫脹的影響見表3。三顆針水提物大、中劑量組耳腫脹明顯低于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.01，P<0.05）。提示三顆針水提物對二甲苯致小鼠耳廓腫脹有抑制作用。

2.4 對小鼠腹腔通透性的影響見表4。三顆針水提物小、中劑量組腹腔通透性A值明顯低于空白對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。提示三顆針水提物對0.6%醋酸致小鼠腹腔通透性增加有抑制作用。

3討論

主治：肝炎。配方：三顆針（三錢），地星宿（一兩），木通（一兩），煎水內服，每天三次、每次100ml，本土苗醫用此配方治好無數個肝炎患者。由此可做猜想其中應有一味或一味以上的藥材有抗炎鎮痛作用。在本次實驗中已經得到論證，所以在探尋某未知物是否有抗炎鎮痛作用時可以運用此實驗方法。小鼠熱板法屬于反射性疼痛模型，對僅有外周鎮痛作用的非甾體抗炎藥不敏感，是區分麻醉性鎮痛藥和非甾體抗炎藥有效模型【19】。

實驗結果表明，三顆針水提物大、中劑量對醋酸致小鼠扭體反應次數有抑制作用；大劑量三顆針水提物在30、60、90、120min 可高提熱板致小鼠疼痛的痛閾；三顆針水提物中劑量組在60min可提高熱板致小鼠疼痛的痛閾；三顆針水提物小劑量組小鼠在120min痛閾值高于空白對照組。

炎癥是機體對組織損傷或致炎因子侵入所產生的防御為主的反應。炎癥的主要表現為紅、腫、熱、痛。實驗結果表明，三顆針水提物大、中劑量可抑制二甲苯致小鼠耳廓腫脹度產生；三顆針水提物大、小劑量可抑制0.6%醋酸所致小鼠腹腔通透性增加。

4 結論

三顆針水提物具有顯著的鎮痛效果，三顆針水提物大劑量組的鎮痛效果最好，其鎮痛機制目前仍不清楚，需要進一步實驗論證。

【參考文獻】：

【1】劉曄瑋，王勤，馬志剛，等.甘肅產三顆針植物中生物堿的測定及分布狀態的研究[J].分析測試學報，2004 23（3）：54—57.

【2】王朝碧，魏俊蓮，張鳳蘭，等.貴州三顆針的分布與運用[J].貴陽中醫學院學報，2002 （3）：59—61

【1】王志東，宋寶安，楊松，等.貴州中草藥三顆針化學成分研究[ J] .貴州大學學報， 2009， 26（3）：11.

【2】楊志學，陳百雙，黃愛華，等.正交試驗優選三顆針中鹽酸小檗堿的提取工藝[ J] .中國民族醫藥雜志， 2004， S1：184.

【3】邸多隆，王勤，馬志剛，等.三顆針植物中生物堿分布狀態的研究[ J] .中藥材， 2004， 27（2）：83.

【4】楊偉麗，馬志剛，祁梅，等.甘肅不同產地三顆針不同部位生物堿的含量測定[ J].甘肅醫藥，2009：5

【5】王柳卜，胡成剛，孫濟平，等.三顆針中鹽酸鹽酸小檗堿、鹽酸藥根堿及鹽酸巴馬汀的含量測定[J].時珍國醫國藥，2011，1（9）：4