ⅢB/Ⅳ期肺癌患者放療前后中醫(yī)辨證分型與RAD51的關(guān)系

黃倩 解方為

[摘要] 目的 探討ⅢB/Ⅳ期非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者放射治療前后中醫(yī)辨證分型與RAD51之間的關(guān)系。方法 選擇2015年5月～2018年5月解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第四七六醫(yī)院腫瘤科收治的ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者85例，在放療前后給予中醫(yī)辨證分型，并通過(guò)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試驗(yàn)檢測(cè)患者血清RAD51水平。比較NSCLC患者放療后中醫(yī)證型變化情況、臨床療效、放射性肺炎發(fā)生情況、RAD51表達(dá)變化情況及放療療效與RAD51的關(guān)系。 結(jié)果 NSCLC患者放療后肺郁痰瘀、陰虛痰熱、脾虛痰濕證型比例與放療前比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。不同證型患者臨床療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），放射性肺炎分級(jí)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。放療后肺郁痰瘀、陰虛痰熱、脾虛痰濕證型患者RAD51表達(dá)水平明顯低于放療前，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01），氣陰兩虛證患者放療前后RAD51表達(dá)水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。 結(jié)論 放療前后中醫(yī)辨證分型和RAD51表達(dá)情況對(duì)預(yù)測(cè)NSCLC放療療效具有重要意義。放療后RAD51表達(dá)情況可以作為中醫(yī)辨證分型的依據(jù)。RAD51與中醫(yī)證型可以相輔相成，共同指導(dǎo)個(gè)體化放療。

[關(guān)鍵詞] 非小細(xì)胞肺癌;放療;辨證;RAD51

[中圖分類(lèi)號(hào)] R735.2? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A? ? ? ? ? [文章編號(hào)] 1673-7210（2019）08（b）-0102-04

[Abstract] Objective To investigate the relationship between traditional Chinese medicine syndrome differentiation and serum levels of RAD51 in patients with stage ⅢB/Ⅳ non-small cell lung cancer （NSCLC） before and after radiotherapy. Methods From May 2015 to May 2018， 85 patients with stage ⅢB/Ⅳ NSCLC admitted to the Department of Oncology of No.476 Hospital of the Joint Logistics Team of PLA were selected. The syndrome differentiation of traditional Chinese medicine was carried out in these NSCLC patients before and after radiotherapy， and serum levels of RAD51 were measured by the enzyme-linked immunosorbent assay method. The changes of traditional Chinese medicine syndromes， clinical efficacy， occurrence of radioactive pneumonia， expression changes of RAD51 and the relationship between radiotherapy efficacy and RAD51 in NSLCL patients were compared. Results After radiotherapy， the percentage of NSLCL patients with syndrome of lung stagnation and phlegm and blood stasis， yin deficiency phlegm heat， spleen deficiency with damp phlegm had statistically significant differences compared with those before radiotherapy （P < 0.05 or P < 0.01）. The differences of clinical efficacy in different syndrome types were statistically significant （P < 0.05）. There was no statistically significant difference in the classification of radiation pneumonitis （P > 0.05）. After radiotherapy， the expression of RAD51 in patients with the syndrome of lung stagnation phlegm and blood stasis， yin deficiency phlegm heat， spleen deficiency with damp phlegm were significantly lower than those before radiotherapy， the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. There was no significant difference in the expression of RAD51 in the patients with syndrome of deficiency of both qi and yin before and after radiotherapy （P > 0.05）. Conclusion Traditional Chinese medicine syndrome differentiation and RAD51 expression before and after radiotherapy are important for predicting the efficacy of NSCLC radiotherapy. The expression of RAD51 after radiotherapy can be used as the basis of traditional Chinese medicine syndrome differentiation. RAD51 and traditional Chinese medicine syndromes can complement each other to guide individualized radiotherapy. The expression of RAD51 after radiotherapy can be used as the evidence of traditional Chinese medicine syndrome differentiation. RAD51 and traditional Chinese medicine syndromes complement each other and serve as an effective way to guide individualized radiotherapy.

[Key words] Non-small cell lung cancer; Radiotherapy; Syndrome differentiation; RAD51

肺癌是世界病死率最高的腫瘤，發(fā)病率和死亡率呈逐年上升趨勢(shì)[1-2]。放化療是肺癌的主要治療手段。放療方面，肺癌屬于放射中度敏感腫瘤[3-4]。放射技術(shù)的進(jìn)步在很大程度上減少了癌細(xì)胞周?chē)＝M織的放射性損傷，但放療療效仍受制于腫瘤細(xì)胞本身對(duì)放射線的抵抗[5]。要提高放療療效，克服放療抵抗，就要解決惡性腫瘤患者個(gè)體差異的問(wèn)題。RAD51是參與同源重組的一種關(guān)鍵基因，其編碼的蛋白具有細(xì)胞周期依賴性、S期和G2/M期高表達(dá)等特點(diǎn)。研究指出，RAD51與放療敏感性密切相關(guān)[6-11]。中醫(yī)學(xué)是一個(gè)偉大的寶庫(kù)，尤其是中醫(yī)辨證施治理論與個(gè)體化治療理念不謀而合。現(xiàn)代研究已經(jīng)證實(shí)，中醫(yī)藥在放療增效減毒方面發(fā)揮重要的作用[12]。因此本研究收集非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）患者，在放療前后檢測(cè)中醫(yī)證型變化，并結(jié)合RAD51表達(dá)變化和放療療效、副作用判定，探討NSCLC患者放療前后中醫(yī)證型變化與RAD51的關(guān)系，以期為NSCLC放療個(gè)體化治療提供依據(jù)，并為臨床的辨證治療提供一定的幫助。

1 資料與方法

1.1 診斷標(biāo)準(zhǔn)

NSCLC的診斷參照《現(xiàn)代腫瘤學(xué)》[13]中的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，并經(jīng)組織病理確診。

1.2 一般資料

本研究納入2015年5月～2018年5月解放軍聯(lián)勤保障部隊(duì)第四七六醫(yī)院腫瘤科病房收治的ⅢB/Ⅳ期NSCLC患者85例，給予放射劑量50～70 Gy/5～7周。其中男57例，女28例，年齡32～70歲，平均（55.4±10.2）歲。所有患者均完成放療，且不具有影響病癥觀察的其他并發(fā)癥。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者均已簽署知情同意書(shū)。

1.3 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 納入標(biāo)準(zhǔn)? ①年齡18～75歲;②符合上述診斷標(biāo)準(zhǔn)且臨床分期為ⅢB/Ⅳ期;③卡氏功能狀態(tài)評(píng)分（KPS）≥60分，預(yù)計(jì)生存期>3個(gè)月。

1.3.2 排除標(biāo)準(zhǔn)? ①合并感染性肺炎、肺結(jié)核等其他肺基礎(chǔ)疾病;②合并精神病，糖尿病，消化道出血，心、肝、腎、甲狀腺疾病及血液系統(tǒng)病史。

1.3.3 脫落標(biāo)準(zhǔn)? ①中途放棄治療;②失訪或數(shù)據(jù)不完整。

1.4 方法

由1名中醫(yī)醫(yī)師記錄放療之前1周內(nèi)及放療結(jié)束時(shí)NSCLC患者中醫(yī)證候信息，并記錄3次中醫(yī)辨證的“四診資料”。根據(jù)周岱翰主編《中醫(yī)腫瘤學(xué)》[14]中的原發(fā)性肺癌章節(jié)，將肺癌中醫(yī)證型分為肺郁痰瘀證、陰虛痰熱證、脾虛痰濕證、氣陰兩虛證。

1.5 觀察指標(biāo)及療效判定標(biāo)準(zhǔn)

觀察NSCLC患者放療前后的中醫(yī)辨證分型變化規(guī)律和生活質(zhì)量，比較NSCLC患者不同證型的臨床療效和放射性肺炎發(fā)生情況，測(cè)定NSCLC患者放療前后不同證型的RAD51表達(dá)情況。

1.5.1 生活質(zhì)量評(píng)估? 生活質(zhì)量的評(píng)價(jià)以KPS評(píng)分為指標(biāo)。治療后較治療前評(píng)分增加≥20分為顯著改善，增加≥10分為改善，無(wú)增加為穩(wěn)定，減少≤10分為降低[15]。

1.5.2 放療療效評(píng)估? 根據(jù)實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)1.1評(píng)估放療療效[16]。完全緩解（CR）：病灶全部消失，持續(xù)時(shí)間≥4周;部分緩解（PR）：病灶縮小≥30%，持續(xù)時(shí)間≥4周;病情穩(wěn)定（SD）：介于PR和PD之間;病情進(jìn)展（PD）：病灶增加>20%，或出現(xiàn)新病灶。

1.5.3 急性放射性肺炎分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)? 采用美國(guó)腫瘤放射治療協(xié)作組織（RTOG）分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)評(píng)價(jià)急性放射性肺炎分級(jí)[17]。0級(jí)：無(wú)變化;1級(jí)：輕微干咳或用力時(shí)呼吸困難;2級(jí)：持續(xù)性咳嗽，需要麻醉性鎮(zhèn)咳藥，輕微用力時(shí)呼吸困難，X線無(wú)變化或有輕微棉絮狀或片狀影;3級(jí)：嚴(yán)重咳嗽，麻醉性鎮(zhèn)咳藥無(wú)效，安靜時(shí)呼吸困難，X線呈致密影，需間斷性吸氧或激素治療;4級(jí)：呼吸功能不全，需持續(xù)性吸氧或輔助機(jī)械通氣;5級(jí)：致命性呼吸困難。

1.5.4 RAD51表達(dá)? 所有NSCLC患者于放療前1 d及放療結(jié)束后4周內(nèi)抽取空腹外周靜脈血5 mL，室溫放置30～60 min后，5000 r/min離心（離心半徑5 cm）10 min分離血清，將血清分別放入2 mL Eppendorf管中，采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）法檢測(cè)血清游離狀態(tài)的RAD51表達(dá)量。各項(xiàng)操作嚴(yán)格按照血清RAD51的ELISA檢測(cè)試劑盒（湖北武漢優(yōu)爾生商貿(mào)公司，貨號(hào)：SEP750H）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。用BIO-RAD 550型酶標(biāo)儀于490 nm處分別測(cè)的OD值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得出濃度。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料比較采用秩和檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組內(nèi)比較采用t檢驗(yàn)，組間比較采用方差分析。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 放療前后中醫(yī)證型變化情況

2.2 NSCLC患者放療前后的KPS評(píng)分比較

放療前NSCLC患者KPS評(píng)分為（73.00±4.83）分，放療后為（81.00±7.38）分，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。

2.3 不同證型患者臨床療效及放射性肺炎分級(jí)

不同證型放療療效差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。放療后4種證型患者的放射性肺炎分級(jí)情況比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。見(jiàn)表2。

2.4 不同證型患者RAD51表達(dá)水平比較

放療前4種證型患者RAD51表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。與放療前比較，除氣陰兩虛證型外，其他3種證型患者放療后RAD51水平均明顯下降，差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。4種證型患者放療后RAD51表達(dá)差異有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。見(jiàn)表3。

3 討論

研究指出，RAD51在肺癌、乳腺癌、腸癌、卵巢癌等多種腫瘤中存在高表達(dá)，且與預(yù)后密切相關(guān)[18-20]。另外，RAD51也與放療敏感性存在相關(guān)性，降低RAD51表達(dá)可能提高放療敏感性[6-11]。本研究對(duì)NSCLC患者放療前后血清RAD51表達(dá)情況進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)，放療后RAD51水平明顯低于放療前，且RAD51水平與放療療效的關(guān)系進(jìn)一步證實(shí)上述觀點(diǎn)。

放療也是一種熱毒之邪，放療期間會(huì)加重?zé)岫灸郏M(jìn)一步灼傷津液，傷及正氣。本研究顯示，放療前NSCLC患者各中醫(yī)證型的分布規(guī)律為肺郁痰瘀證>陰虛痰熱證>脾虛痰濕證>氣陰兩虛證。隨著放療進(jìn)行，津液漸虧，各證型向陰虛痰熱證轉(zhuǎn)化的例數(shù)增多。

本研究對(duì)RAD51在NSCLC放療前后中醫(yī)證型中的表達(dá)進(jìn)行了研究。結(jié)果顯示，肺郁痰瘀證、陰虛痰熱證和脾虛痰濕證患者RAD51表達(dá)水平在放療前后存在顯著差異，但對(duì)于氣陰兩虛證患者來(lái)說(shuō)，RAD51水平降低并不明顯（P > 0.05），提示放療后RAD51的表達(dá)情況可以作為中醫(yī)辨證分型的依據(jù)。RAD51與中醫(yī)證型可以相輔相成，共同作為預(yù)測(cè)和判別放療效果的有效方式，指導(dǎo)個(gè)體化放療。

綜上所述，NSCLC患者在放射治療前后中醫(yī)辨證分型的分布和RAD51水平的變化提示放射線作為熱毒之邪入侵人體后，內(nèi)在DNA修復(fù)相關(guān)因子發(fā)生變化，以中醫(yī)證型顯示出來(lái)。放療后肺郁痰瘀證、陰虛痰熱證和脾虛痰濕證的NSCLC患者在宏觀上和微觀上的差異性較為顯著。因此，中醫(yī)辨證分型對(duì)指導(dǎo)NSCLC個(gè)體化放療具有重要意義，RAD51水平對(duì)驗(yàn)證中醫(yī)辨證分型和預(yù)測(cè)放療效果具有重要作用，甚至可以作為中醫(yī)規(guī)范化辨證的量化指標(biāo)。

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（收稿日期：2019-12-03? 本文編輯：張瑜杰）