哮喘患兒血清維生素D水平及補充三種劑量維生素D對患兒T淋巴細胞的影響

羅國飛 龍興江

柳州市人民醫院兒科545000

支氣管哮喘(哮喘)是一種兒童常見并且由多種細胞參與的氣道慢性炎癥性疾病，能夠導致患兒出現胸悶、咳嗽以及喘息等癥狀，其病因復雜，目前臨床尚未明確，但國內外許多研究表明，維生素D是導致兒童出現哮喘的重要影響因素[1-2]。同時有研究發現，哮喘發病與患兒體內T淋巴細胞的變化顯著相關[3]。因此，調節T淋巴細胞的平衡是臨床上治療哮喘的重要步驟。而維生素D是一種固醇類衍生物，能夠調節人體免疫、骨代謝[4]。研究發現，患兒攝入適當的維生素D能夠平衡機體T淋巴細胞水平。但由于臨床中維生素D劑量的攝入不同對機體有著不同臨床效果[5]。因此，本次研究主要是探討哮喘兒童血清維生素D水平及補充3種劑量維生素D對患者T淋巴細胞的影響。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選擇2017年1月至2018年1月在柳州市人民醫院收治的96例哮喘患兒作為研究組，同時選擇同期健康體檢兒童80例作為對照組。并按照隨機數字表法將哮喘患兒分為常規組和維生素D 400 U、600 U、800 U治療組3組(每組24例)。其中研究組患兒男50例，女46例，年齡(8.69±1.25)歲，年齡范圍為6～13歲；對照組兒童男49例，女47例，年齡(9.47±1.68)歲，年齡范圍為5～14歲，2組患兒年齡、性別等一般資料比較差異無統計學意義(P＞0.05)。納入標準：(1)符合兒童哮喘的診斷標準[6]；(2)哮喘患兒處于發作期、緩解期；(3)獲得家屬的知情同意，并簽署知情同意書。排除標準：(1)呼吸衰竭、心力衰竭等重度哮喘患兒；(2)并伴有心功能不全、代謝患兒者；(3)近3個月服用維生素D患兒；(4)藥物過敏史者。本次研究已獲得醫學倫理委員會批準。且符合《赫爾辛基宣言》的原則。

1.2 方法

1.2.1 實驗室檢查 入院次日抽取研究對象空腹靜脈血5 ml，并經3 000 r/min離心10 min，離心半徑15 cm，并經過血清分離后置于-70℃冰箱保存。采用酶聯免疫吸附法(試劑盒由美國CLOUD-CLONE公司生產)檢查研究對象血清中維生素D水平。并且將維生素D水平分為缺乏(維生素D≤15μg/L)、不足(15μg/L＜維生素D≤20μg/L)、適宜(維生素D＞20μg/L)。T淋巴細胞采用流式細胞數檢測，并于哮喘患兒治療前、治療后3、6、12個月檢測患兒血清T淋巴細胞。所有操作均嚴格按照說明書進行。

1.2.2 治療方法 將哮喘患兒分為常規組和維生素D 400 U、600 U、800 U治療組3組(每組24例)，共治療12個療程，其中常規組治療主要是按照哮喘嚴重程度分別給予患者布地奈德霧化吸入，輕度的劑量每天250μg/次，中度持續給予250μg/次，2次/d，中度給予500μg/次，2次/d，每天睡前口服孟魯司特鈉4 mg，療程為6個月[7]。且在治療后的3、6、12個月時對患者進行評估，再根據結果調整治療。維生素D治療組在常規組基礎上口服維生素D，并根據劑量分為3組，主要是400 U、600 U以及800 U。所有哮喘患兒在治療前均進行過敏檢查，并對患兒家屬進行相關知識講解。

1.3 臨床療效[8]根據哮喘的診斷與防治指南分為控制(喘息、咳嗽以及肺啰音消失)、部分控制(喘息、咳嗽減輕，肺啰音減少)以及未控制(無改善)，其中有效率=(控制+部分控制)/總例數×100%。

1.4 統計學分析 運用SPSS 19.0進行統計學數據處理，血清維生素D等計量資料以±s表示；臨床療效等計數資料比較使用例數、百分比描述，采用χ2檢驗或秩和檢驗，檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1 2 組血清維生素D水平的比較 研究組患兒血清維生素D水平明顯低于對照組(P＜0.05)，且研究組維生素D水平缺乏明顯高于對照組(P＜0.05)見表1。

2.2 治療前研究組與對照組T淋巴細胞的比較治療前2組CD3水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)，但研究組CD4、CD8以及CD4/CD8水平均明顯高于對照組(P＜0.05)，見表2。

2.3 治療前后不同組別哮喘患兒T淋巴細胞變化的比較 治療前、治療3個月時各組CD4、CD8以及CD4/CD8水平差異無統計學意義(P＞0.05)；治療6個月、12個月時，600 U組以及800 U組的CD4、CD4/CD8均明顯降低(P＜0.05)，但各組CD8水平差異無統計學意義(P＞0.05)，見表3。

2.4 治療后臨床療效的比較 各組治療后臨床控制效果差異有統計學意義(P＜0.05)，常規組有效控制率為50.00%，400 U組為58.33%，2組比較差異無統計學意義(P＞0.05)，但600 U組為87.50%、800 U組為83.33%其有效率均明顯高于常規組(P＜0.05)，且600 U組有效率更明顯，見表4。

3 討論

哮喘是一種可逆性的氣道堵塞性肺部疾病，并且對多種刺激的氣道反應性增加，而發病原因多與遺傳、變應原、環境等因素密切相關[9]。臨床上其典型癥狀表現為發作性呼氣性呼吸困難、胸悶、咳嗽，而對于發生哮喘的患兒一般多采用藥物治療，因此選擇合適的藥物治療是非常必要的[10]。維生素D同時也是一種脂溶性維生素，能夠調節細胞的生長，主要是調節細胞分化、增殖以及免疫細胞的平衡、免疫抗體的濃度，同時能夠抑制T細胞的增殖與分化，并對于氣管氣道的重塑有著重要的臨床效果[11-12]。同時研究發現，血清維生素D水平與哮喘患兒的發病有著重要關系[13]。而本次研究結果顯示，研究組患兒血清維生素D水平明顯低于對照組(P＜0.05)，且研究組維生素D水平缺乏明顯高于對照組(P＜0.05)，表示血清維生素D水平在哮喘患兒中降低，能夠反應患兒疾病的發生與嚴重程度，同時也證明維生素D缺乏可作為患兒哮喘的發病原因。而我國兒童普遍出現維生素D缺乏，特別一些地區缺乏陽光照射，其發病率較高。因此對于維生素D缺乏患兒應盡早補充維生素D[14]。

T淋巴細胞主要是來源于骨髓中的多能干細胞，其細胞亞群主要有CD 3、CD 4、CD 8、CD 4/CD8，具有多種生物學功能，能夠抑制B細胞產生抗體、加強免疫應答以及保持免疫記憶等效果[15-16]。并由T淋巴細胞參與哮喘的病理過程，因此平衡T淋巴細胞是治療哮喘的關鍵。有研究發現，通過攝入維生素D能夠平衡人體內T淋巴細胞失衡[17]。本次研究結果顯示，治療前2組CD3水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)，但研究組CD4、CD8以及CD4/CD8水平明顯高于對照組(P＜0.05)，表示哮喘患兒存在T淋巴細胞失衡。維生素D雖能夠降低患者氣道炎癥反應，但不同劑量對于患者的治療效果均有明顯差異[18]。本次研究結果顯示，治療前、治療3個月時各組CD4、CD8以及CD4/CD8水平差異無統計學意義(P＞0.05)；治療6個月、12個月時，600 U組以及800 U組的CD4、CD4/CD8均明顯降低(P＜0.05)，但各組CD8水平差異無統計學意義(P＞0.05)，表示維生素D能夠有效的平衡患者T淋巴細胞，但同時治療效果較慢需長期進行。各組治療后臨床控制效果差異有統計學意義(P＜0.05)，常規組有效控制率為50.00%，400 U組為58.33%，2組比較差異無統計學意義(P＞0.05)，但600 U組為87.50%、800 U組為83.33%其有效率均明顯高于常規組(P＜0.05)，且600 U組有效率更明顯，表示維生素D能夠有效治療哮喘患兒，但同時由于600 U組以及800 U組的治療效果無明顯差異，因此維生素D劑量為600 U時最佳。

表1 2組血清維生素D水平的比較

表2 治療前研究組與對照組T淋巴細胞的比較(±s)

表2 治療前研究組與對照組T淋巴細胞的比較(±s)

組別 例數 CD3(%) CD4(%) CD8(%) CD4/CD8研究組 96 65.41±6.47 45.74±6.25 22.15±3.11 2.06±0.36對照組 80 64.32±6.42 36.41±6.10 26.32±3.05 1.38±0.32 t值 1.117 9.969 8.935 13.118 P值 0.266 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

表3 不同組別哮喘患兒治療前后T淋巴細胞的比較(±s)

表3 不同組別哮喘患兒治療前后T淋巴細胞的比較(±s)

注：與常規組以及400 U組比較，a P＜0.05

組別 例數CD4(%)治療前 治療3個月 治療6個月 治療12個月常規組 24 47.36±6.21 43.41±7.89 44.36±8.40 43.55±8.10 400 U組 24 47.44±6.20 43.35±7.85 44.40±8.39 43.50±7.98 600 U組 24 46.67±6.52 42.85±7.69 39.41±7.20a 38.85±6.69a 800 U組 24 47.52±6.31 42.87±7.71 39.58±6.88a 39.03±7.01a F值 0.101 0.093 6.582 3.141 P值 0.962 0.963 ＜0.001 0.029組別 例數 CD8（%）治療前 治療3個月 治療6個月 治療12個月常規組 24 24.33±2.33 22.36±2.01 24.41±2.28 25.45±2.74 400 U組 24 23.89±2.58 23.62±2.15 24.52±2.30 25.51±2.77 600 U組 24 24.36±2.36 23.66±2.16 24.66±2.39 26.10±2.61 800 U組 24 24.41±2.41 23.70±2.14 24.78±2.41 26.08±2.64 F值 0.252 2.374 0.124 0.433 P值 0.864 0.076 0.949 0.732組別 例數 CD4/CD8治療前 治療3個月 治療6個月 治療12個月常規組 24 2.10±0.28 1.67±0.30 1.78±0.31 1.67±0.32 400 U組 24 2.12±0.30 1.64±0.32 1.80±0.28 1.67±0.28 600 U組 24 1.94±0.32 1.58±0.29 1.58±0.26a 1.41±0.30a 800 U組 24 2.08±0.34 1.64±0.27 1.60±0.27a 1.45±0.26a F值 1.001 0.411 4.285 5.752 P值 0.396 0.748 0.007 0.001

表4 治療后臨床療效的比較

綜上所述，哮喘患兒血清維生素D缺乏，且對患兒補充不同劑量維生素D均有明顯效果，能夠有效的調節支氣管喘息患兒T淋巴細胞水平，并且對于改善患兒哮喘有著重要的臨床意義，其中維生素D補充劑量為600 U時效果最佳。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突