Rho激酶抑制劑Ripasudil治療青光眼的Meta分析

馬 瀾，錢若蘭，伍桂軍

0引言

青光眼是不可逆性視力喪失的主要原因之一，可導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞退行性變和視神經(jīng)乳頭病變[1]。青光眼可根據(jù)前房角是否關(guān)閉分為開角型青光眼與閉角型青光眼，根據(jù)病因可分為原發(fā)性青光眼與繼發(fā)性青光眼(SG)，而原發(fā)性開角型青光眼(POAG)是最常見的青光眼類型。眼內(nèi)壓(IOP)的升高是青光眼最主要的高危因素，目前可以降低IOP的治療有：激光治療[2]、手術(shù)[3]和前列腺素類似物、β受體阻滯劑等，但這些藥物對部分患者作用不顯著，且會導(dǎo)致白內(nèi)障、虹膜和睫狀體囊腫、視網(wǎng)膜脫離等并發(fā)癥[4-5]，β受體阻滯劑還有支氣管哮喘、房室傳導(dǎo)阻滯等禁忌證[6]。因此毒副作用小的新型藥物急需被開發(fā)。

Rho家族是一組可以調(diào)節(jié)細(xì)胞進(jìn)程的小分子G蛋白，通過與鳥苷三磷酸(GTP)結(jié)合發(fā)揮作用。Rho激酶是這些GTP酶的效應(yīng)物，是AGC激酶家族的一員[7]，它們在平滑肌收縮、細(xì)胞遷移、神經(jīng)軸突延長和神經(jīng)元結(jié)構(gòu)的搭建過程中起重要作用[8]。近年來，臨床試驗(yàn)已證明小分子的Rho激酶抑制劑可用于治療中風(fēng)、腦血管痙攣、高血壓、動脈硬化等疾病。2014-09，作為Rho激酶抑制劑的Ripasudil(K-115)在日本被批準(zhǔn)上市，已有臨床試驗(yàn)證明其在24h內(nèi)對POAG和高眼壓(OHT)的治療作用。但有些試驗(yàn)受限于樣本量或試驗(yàn)時(shí)長，也有試驗(yàn)提出在某些類型青光眼中，試驗(yàn)組與對照組治療效果并無明顯差異。因此，本研究采用Meta分析系統(tǒng)性評價(jià)Ripasudil對青光眼的療效。

表1 納入文獻(xiàn)特征分析

1資料和方法

1.1資料

1.1.1文獻(xiàn)檢索和篩選研究對象為確診為青光眼的患者。于2019-05檢索三個(gè)數(shù)據(jù)庫(Pubmed、Web of Knowledge、CNKI)，英文檢索詞為“Ripasudil”、“glaucoma”、“Rho kinase inhibitor”，中文檢索詞為“青光眼”、“Rho激酶”、“Rho激酶抑制劑”。檢索發(fā)表日期為2015-01/2019-04，兩位研究者各自檢索并嚴(yán)格依據(jù)入選與排除標(biāo)準(zhǔn)篩選研究。

1.1.2入選和排除標(biāo)準(zhǔn)入選標(biāo)準(zhǔn)：(1)公開發(fā)表的關(guān)于Ripasudil治療青光眼的臨床研究；(2)隊(duì)列研究或病例對照研究；(3)研究對象為高眼壓的青光眼患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)摘要、綜述；(2)非臨床實(shí)驗(yàn)；(3)不相關(guān)研究；(4)無效數(shù)據(jù)；(5)無法提取或估計(jì)數(shù)據(jù)。

1.2方法

1.2.1質(zhì)量評價(jià)采用改良版Jadad量表[9]評價(jià)隨機(jī)對照研究(RCTs)，1～3分為低質(zhì)量，4～7分為高質(zhì)量。用Methodological Index for Nonrandomized studies(MINORS)評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)評價(jià)非隨機(jī)對照研究[10]，該質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)一共有12項(xiàng)條目，每項(xiàng)分值均為0～2分，總分24分，前8項(xiàng)用于非對照性研究，總分16分。

1.2.2數(shù)據(jù)提取本研究提取了第一作者姓名、出版年份、國家、試驗(yàn)組與對照組的研究例數(shù)與IOP值、SD值、試驗(yàn)研究的青光眼類型以及副作用等內(nèi)容。由于有研究記錄了不同使用時(shí)常的數(shù)據(jù)，為減少偏倚，選用使用該藥3mo后的試驗(yàn)數(shù)據(jù)，如無則選用最長試驗(yàn)時(shí)間的數(shù)據(jù)，數(shù)據(jù)由兩位研究者分別提取并使用Excel 2016記錄。如有數(shù)據(jù)缺失，我們聯(lián)系了原文的通訊作者；如原始數(shù)據(jù)以最小值、中位數(shù)和最大值表示，且無法聯(lián)系到原文作者，我們采用了Mean-Variance Estimation[11](http://www.comp.hkbu.edu.hk/～xwan/Median_Range.html)工具估計(jì)WMD與SD；如數(shù)據(jù)以圖表形式表現(xiàn)，且無法聯(lián)系到作者時(shí)，我們用電腦軟件Universal Desktop Ruler進(jìn)行測量。

圖1 文獻(xiàn)檢索過程。

統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：本Meta分析采用Stata 14.0處理數(shù)據(jù)。提取試驗(yàn)組和對照組的IOP值和變化量，以加權(quán)均數(shù)差(weighted mean difference，WMD)和95%置信區(qū)間(95%CI)作為統(tǒng)計(jì)量評價(jià)結(jié)果。采用Cochrane Q和I2進(jìn)行異質(zhì)性檢驗(yàn)：I2<25%代表低度異質(zhì)性，25%～50%代表中度異質(zhì)性，>50%～100%代表高度異質(zhì)性。采用Egger檢驗(yàn)評價(jià)發(fā)表偏倚。根據(jù)青光眼的類型進(jìn)行亞組分析，采用去除單項(xiàng)法進(jìn)行敏感性分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1檢索結(jié)果本研究的檢索過程見圖1。初步檢索獲得文獻(xiàn)117篇，重復(fù)16篇，閱讀題目與摘要后排除86篇，閱讀全文并依據(jù)入選與排除標(biāo)準(zhǔn)篩選排除22篇，最終納入9篇文獻(xiàn)[12-20]。

2.2納入文獻(xiàn)特征分析納入的9篇文獻(xiàn)共涉及3 446個(gè)病例，其中1篇為RCT研究，Jadad量表評分為5分，8篇為自身前后對照研究，屬于nRCT研究，MINORS評分為19～24。其中5篇研究對象為多種類型青光眼，2篇研究對象為葡萄膜炎性青光眼，為SG的一種，還有1篇只研究了POAG。納入文獻(xiàn)的特征總結(jié)見表1。

2.3 Ripasudil對青光眼的治療作用

2.3.1有效率分析選用隨機(jī)效應(yīng)模型分析，異質(zhì)性檢驗(yàn)I2=52.9%，存在高度異質(zhì)性，試驗(yàn)組與對照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(WMD=-2.67，95%CI-3.26～-2.08，P<0.001)。采用敏感性分析和亞組分析進(jìn)行異質(zhì)性來源分析，森林圖見圖2。

圖2 納入研究森林圖。

圖3 Egger法分析結(jié)果。

圖4 敏感性分析森林圖。

2.3.2發(fā)表偏倚采用Egger檢驗(yàn)評價(jià)發(fā)表偏倚，結(jié)果見圖3。提示本研究存在發(fā)表偏倚的可能性較低。

2.3.3敏感性分析敏感性分析提示第5篇文獻(xiàn)(Takashi Komizo，2018)為異質(zhì)性的來源之一，去除這篇文獻(xiàn)的三組數(shù)據(jù)后I2=36.8%，代表存在中度異質(zhì)性(圖4)。試驗(yàn)組與對照組的IOP差值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(WMD=-2.96，95%CI-3.48～-2.45，P<0.001)。

圖5 亞組分析森林圖。

2.3.4亞組分析排除產(chǎn)生異質(zhì)性的文獻(xiàn)后，仍存在中度異質(zhì)性，為了分析異質(zhì)性來源，我們根據(jù)青光眼的類型進(jìn)行亞組分析。由于類固醇性青光眼、去角質(zhì)性青光眼與葡萄膜炎性青光眼均屬于SG，它們被歸為一個(gè)亞組。POAG與多種類型被歸為其余兩個(gè)亞組。亞組分析結(jié)果見圖5。在POAG亞組與SG亞組中I2=0%，多種類型亞組中I2=2%，組內(nèi)異質(zhì)性低。組間差異中I2=77%，表明異質(zhì)性的來源很有可能為青光眼類型。POAG亞組WMD為-3.09(95%CI-3.45～-2.73，P<0.001)。SG亞組WMD為-3.73(95%CI-4.52～-2.93，P<0.001)。多種類型亞組WMD為-2.26(95%CI-2.91～-1.61，P<0.001)。

2.4安全性納入的9篇文獻(xiàn)中有4篇提及副作用，合計(jì)3 539個(gè)病例，最主要的副作用為結(jié)膜充血，發(fā)生率為11.8%(421例患者)，其次為過敏性結(jié)膜炎(5.4%，190例)和瞼炎(2.9%，104例)。

3討論

青光眼可導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞退行性變和視神經(jīng)乳頭病變，IOP升高是青光眼的危險(xiǎn)因素，而房水外流途徑受阻是導(dǎo)致IOP升高的重要原因。小梁網(wǎng)和Schlemm管內(nèi)皮細(xì)胞中的Rho-ROCK信號通路被激活時(shí)，房水流出受阻可導(dǎo)致高眼壓，而Ripasudil可以抑制該信號通路，達(dá)到降眼壓的效果[21]。在動物實(shí)驗(yàn)中，Ripasudil被證明可以改善視網(wǎng)膜血流灌注[22]，這可能也是其對青光眼有治療作用的原因，但其對人類視網(wǎng)膜血運(yùn)的改善暫無研究證明。

本研究系統(tǒng)性評價(jià)了9篇Ripasudil的臨床試驗(yàn)報(bào)告，通過敏感性分析排除1篇后，發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)組與對照組相比，IOP值明顯下降(WMD=-2.96，95%CI-3.48～-2.45，P<0.001)，即可以認(rèn)為Ripasudil對青光眼有較好的治療作用。

敏感性分析中，有1篇文獻(xiàn)的數(shù)據(jù)產(chǎn)生了明顯異質(zhì)性。可能原因?yàn)椋禾幚頂?shù)據(jù)過程中，Takashi等選擇了雙眼中眼壓較高的一只眼記錄結(jié)果[16]。此外，患者年齡與性別、藥物使用方式、濃度和時(shí)間也可能是造成異質(zhì)性的原因。亞組分析的結(jié)果表明：盡管Ripasudil對多種類型青光眼都有顯著療效，但對不同類型療效可能有差異。其中對SG療效高于POAG。可能的原因是同1篇入選文獻(xiàn)中POAG組的原始IOP值普遍低于SG組。Hidenobu等在2019年的研究中也指出IOP的降低程度可能與基線IOP值的高低呈正相關(guān)，即越高的基線IOP值在使用Ripasudil后下降的幅度越大[14]。此外也有動物實(shí)驗(yàn)證明Ripasudil有抗炎作用，對急性葡萄膜炎有明顯的治療作用，可能因此加強(qiáng)其對繼發(fā)性青光眼的療效[23]。

部分文獻(xiàn)提及副作用，例如結(jié)膜充血、過敏性結(jié)膜炎、瞼炎等，但Hiroshi等發(fā)現(xiàn)，使用3mo Ripasudil后停藥，這些副作用也隨之消失[18]。Shino等研究也得出了同樣的結(jié)果[17]。Etsuko等研究了51例患者后發(fā)現(xiàn)：使用Ripasudil會迅速產(chǎn)生中度結(jié)膜充血，但這種癥狀消退也很快[24]。Hitomi等建議，有青光眼藥物過敏史的患者若要使用Ripasudil，應(yīng)注意過敏性結(jié)膜炎和瞼炎等并發(fā)癥[25]。

本Meta分析進(jìn)行了發(fā)表偏倚分析、敏感性分析以及亞組分析確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，但仍受一定限制。由于Ripasudil于2014年被批準(zhǔn)，已有的臨床試驗(yàn)數(shù)量仍然很少，僅有1個(gè)RCT被納入，其余均為nRCT，盡管我們進(jìn)行了嚴(yán)格的質(zhì)量評價(jià)，仍有試驗(yàn)偏倚存在的可能性。因此，為了進(jìn)一步減少偏倚，本結(jié)論有待被更多的RCT證明。此外由于已發(fā)表的關(guān)于Ripasudil治療青光眼的臨床研究僅在日本開展，本Meta分析可能存在選擇偏倚，有待加入更多其他人種的試驗(yàn)數(shù)據(jù)以減少偏倚。