藥用茶葉提取物的制備工藝研究

付長華

（花園藥業股份有限公司 浙江金華 322121）

茶葉提取物經過精制達到藥用級要求就是藥用茶葉提取物。茶葉提取物中的主要成份為茶多酚，茶多酚是茶葉中兒茶素類、黃酮類、酚酸類和花色素類化合物的總稱，約占茶葉干重的15%～25%，兒茶素類化合物主要包括表兒茶素類（EC）、表沒食子兒茶素（EGC）、表兒茶素沒食子酸酯（ECG）和表沒食子兒茶素沒食子酸酯（EGCG）[1]。據有關報道，茶多酚在降血脂、抑制血栓的形成、降血壓、擴張血管、抑制脂質過氧化、抗動脈粥樣硬化等領域均有著不容忽視的重要作用。茶多酚在醫藥、日化、化妝品、食品、油脂、保健等諸多方面具有廣闊的應用前景，然而茶葉中含有的咖啡堿易引起中樞神經興奮，有提神、醒腦的功效。1989 年，Lima DR 的研究報道稱，對咖啡堿敏感的人群一次性攝取10 mg 咖啡堿便會引起某些不適癥狀，如焦慮、惡心、頭痛和失眠等。因此，藥用茶葉提取物工藝研究就是要獲得高含量的兒茶素及低含量的咖啡因（Caf），在醫藥領域有諸多含藥用茶葉提取物的藥品被應用于臨床，如心腦健片、心腦健膠囊、茶色素膠囊等，這些產品作為心血管治療藥物已投入生產和臨床使用。茶葉提取物的制備工藝研究最早興起于上世紀60 年代，而工業化生產開始于上世紀90 年代。參照國內公開的茶葉提取物的制備工藝報道，大致有以下幾種：（1）溶劑提取-金屬離子沉淀富集-酸溶解-有機溶劑萃取-回收溶劑-干燥[2]；（2）溶劑提取-回收濃縮-氯仿萃取脫除咖啡因-乙酸乙酯萃取[3]；（3）浸漬滲漏冷提取-二級萃取-二級柱分離[4]。藥用級茶葉提取物的制備工藝主要包括：茶葉選擇→提取→過濾→堿沉→酸溶→萃取→濃縮→干燥→粉碎→包裝。本研究主要對藥用茶葉提取物的生產制備關鍵工藝進行了研究。現報道如下：

1 儀器與材料

1.1 儀器 提取罐、堿沉罐、酸溶罐、減壓濃縮器（均由浙江金安制藥機械有限公司提供）；離心萃取機（鄭州天一萃取科技有限公司）；真空干燥箱（常州潤邦干燥設備有限公司）；高效液相色譜儀（Aligent公司）。

1.2 材料 茶葉（浙江省東陽市東白山茶場、蘇州古雨春茶業有限公司）；氫氧化鈣（上海江滬鈦白化工制品有限公司）；乙酸乙酯（安徽華誼化工有限公司）。

2 工藝研究與結果

2.1 茶葉選擇 對不同產地、不同采用季節、不同加工方式、不同批次茶葉的主要成分含量進行了測定，并對結果進行比較，最后選用在春夏兩季采收的浙江東白山高山茶葉，用設備進行全自動加工，收集茶片。要求為細度過60 目的細茶片≤20%，茶葉中含有的EC 和EGCG 總量≥6%。見表1。

表1 不同產地茶葉樣品中主要成分含量（%）

2.2 提取 將原料投入提取罐中，溫度控制在80℃，提取30 min，將提取液過濾至堿沉淀罐，再將茶葉渣排出。茶多酚熱敏性高，提取溫度不宜過高，溫度控制在70～90℃，提取時間不宜過長，控制在15～30 min/次，8～10 倍量水提取2 次，收集前2 次提取液，有效成分的提取率可達80%以上。

2.3 過濾 由于碎茶原料中細末多、含有一定的泥沙和雜質，容易造成出料堵塞，過濾時間長，會限制生產的進度，我們通過在多功能提取罐底部增加篩網很好地解決了這一難題。

2.4 堿沉

2.4.1 堿的種類選擇 根據金屬離子沉淀法原理，取Ca（OH）2、NaOH、KOH 和Na2CO3等4 種堿，均配制成濃度為5%的稀溶液，分別取4 份提取液，向提取液中滴加對應堿液，觀察現象，由實驗現象判斷Ca（OH）2可作為沉淀劑。見表2。

表2 堿的種類選擇

2.4.2 堿沉形式實驗 取Ca（OH）2固體粉末分別配成飽和石灰水、石灰乳，另取不經處理的固體粉末，取3 份提取液，進行堿沉實驗。用飽和石灰水堿沉時，沉淀沉降較慢；用石灰乳時，沉淀沉降較快；加固體粉末時，沉淀沉降速度與加石灰乳相當，但需快速攪拌。通過向提取物中加入堿，使提取液中的茶多酚沉淀下來，起到富集茶多酚并使其與其他限制性成分分離的效果。但查閱相關文獻可知，茶多酚在堿性環境極易被氧化破壞，因此，堿沉時應盡量避免茶多酚被破壞。Caf 是弱酸性生物堿，具有親和性，可與茶多酚發生共沉淀現象，導致堿沉過程Caf 也隨茶多酚一起沉淀，使后續脫除壓力加大，直接導致提取物中Caf 含量偏高，所以堿沉速度要快。見表3。

表3 堿沉形式實驗結果

2.5 酸溶 酸轉溶是關鍵控制點，若溶解不完全，會造成有效成分損失量很大，小試選擇用鹽酸溶液作為轉溶液，系統呈糊狀，無法操作，因此，最終選擇了檸檬酸。

2.6 萃取 將茶葉提取液和乙酸乙酯按1:1 的比例加入離心萃取機中進行萃取。我們比較以下3 種萃取方式：（1）攪拌萃取：乙酸乙酯消耗大，操作過程易出現乳化現象，實驗室離心（4 000 r/min，5 min）或靜置過夜仍無法消除，會造成EGCG 約5%的損失。（2）模擬逆流萃取柱萃取：中試中模擬逆流萃取原理，自制逆流萃取柱進行萃取，與攪拌萃取相比，萃取過程不會出現乳化現象，但萃取效率不高。（3）離心萃取：乙酸乙酯消耗較攪拌萃取可減少約30%，且不會出現乳化現象，主要成分萃取率高達95%以上，不會造成有效成分的損失。通過3 種萃取方式的比較，最終采用離心萃取的方式，萃取比例為1:1。不同單體在水相和有機相中分配行為不同，利用離心萃取機的離心作用力能使水相和有機相實現快速混合及分離，有機相中可獲得純度高的有效成分，經過2 級離心萃取，可提高茶葉提取物中有效成分的純度和產率，使用的有機溶劑可回收利用，大大降低了成本，減少了污染。

2.7 濃縮、干燥、粉碎、包裝 萃取液用減壓濃縮器濃縮至白利度為30%～40%，在D 級GMP 車間收膏，采用減壓真空干燥；低溫粉碎，過100 目篩，包裝即得藥用級茶葉提取物。

2.8 樣品含量測定 取3 批藥用級茶葉提取物，按照2015 版《中國藥典》一部[5]，對茶葉提取物含量進行檢測，產品均符合藥用級的要求。見表4。

表4 樣品含量測定結果（%）

3 討論

茶葉提取物生產工藝技術研究隨著新產品的應用及開發不斷深入，應用范圍也在不斷擴大。現在，國家對藥品安全越來越重視，監管力度不斷加大，相關領域的技術、制藥裝備也在不斷發展，新技術、新工藝使茶葉提取物的生產更加規范，產能和收率都有較大的提升。隨著國家環保監管趨嚴，企業圍繞節能減排進行了研究和開發，通過技術創新實現了綠色合成和環境友好生產。茶葉中含有咖啡因、氨基酸、花黃素等大量的天然植物提取物，我們應深度發掘并研究出新產品，以擴展茶葉提取物終端消費的產品研發及產業化，進而打造茶葉提取物的科研成果產業鏈。