龍眼葉乙酸乙酯部位ABTS自由基清除活性研究

李培源 鄢宏俊 霍麗妮 賈智若

摘要 [目的]探討龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除活性。[方法]采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，測定其ABTS自由基清除能力，并研究龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除能力與濃度之間的關系。[結果]在較低藥液濃度下龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出一定的ABTS自由基清除率，隨濃度增加，ABTS自由基清除率迅速增加。研究龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除能力與時間之間的關系，結果表明隨反應時間增加，ABTS自由基清除率迅速增加。[結論]龍眼葉乙酸乙酯部位具有較好的ABTS自由基清除活性。

關鍵詞 龍眼葉;乙酸乙酯部位;ABTS;清除活性

中圖分類號 R285.5文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2019）17-0159-02

Abstract [Objective] The research aimed to study ABTS free radical scavenging activity of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan. [Method]The ABTS radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan was studied. The relationship between ABTS free radical scavenging ability and concentraion was investigated. [Result]At a low concentration， ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan exhibits some ABTS free radical scavenging ability. With increasing concentration， ABTS free radical scavenging ability of ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan quickly increased. The relationship between the ability of ethyl acetate in longan leaves to scavenge ABTS free radicals and time was studied. The results showed that the ABTS free radical scavenging rate increased rapidly with the increase of reaction time.[Conclusion] Ethyl acetate extract of leaf of Dimocarpus longan has good ABTS free radical scavenging activity.

Key words Leaf of Dimocarpus longan;Ethyl acetate extract;ABTS;Scavenging activity

科學研究證明，中風、關節炎等多種慢性疾病與體內自由基超量相關，當體內的抗氧化物質不足以抗衡自由基時身體產生疾病，需要額外補充抗氧化劑[1-3]。目前應用較為廣泛的抗氧化劑如2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚等具有較多副作用，因此，從植物中開發新的天然抗氧化劑成為新的研究熱點[4-8]。該試驗采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，并采用ABTS體系來評估其自由基清除能力，尋找新的天然抗氧化劑。

1 材料與方法

1.1 試材 紫外可見分光光度計，UV1901型，北京普析電子科技有限公司[8-10]。蘆丁標準品，百靈威試劑公司（北京）。

1.2 方法

1.2.1 龍眼葉乙酸乙酯部位制備。

將龍眼葉曬干磨粉后，將20 g龍眼葉粉末放入圓底燒瓶中，加入200 mL乙酸乙酯（95%），采用冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位。

1.2.2 ABTS· +自由基清除能力測定[6-10]。

在錐形瓶中加入50 mL濃度為2 mmol/L的2，2-聯氨-雙（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二胺鹽（ABTS）水溶液和200 mL濃度為70 mmol/L的K2S2O8水溶液，混合均勻，蓋上塞子避光放置12～16 h，再加入磷酸鹽緩沖液至溶液在波長734 nm處吸光度為0.70±0.02得到ABTS· +溶液。取一定量不同濃度提取物藥液，加入一定量的ABTS· +溶液混勻，在不同時間測其吸光度，并以吸光度變化計算其對ABTS· +自由基的清除率。

2 結果與分析

2.1 龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除能力與濃度的關系

從圖1可看出，藥液濃度為0.2 mg/mL時，龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出6.29%的ABTS自由基清除率;當藥液濃度從0.2 mg/mL增至0.8 mg/mL，提取物對ABTS自由基的清除率增大至1.4倍;藥液濃度為1.2和1.5 mg/mL時，龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除率分別為0.2 mg/mL藥液濃度時的2.2和2.4倍;在最大濃度2.0 mg/mL時，

2.2 龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除能力與時間的關系 從圖2可看出，對于藥液濃度為1.5 mg/mL的提取物，反應時間為1 min時對ABTS自由基的清除率為6.78%;隨著反應時間增加，龍眼葉乙酸乙酯部位展現出增強的ABTS自由基清除能力;反應時間為3 min時，ABTS自由基清除率為1 min時的1.6倍;反應時間為5 min時，ABTS自由基清除率為1 min時的1.9倍;反應時間延長至10 min時，ABTS自由基清除率為1 min時的2.0倍。對于藥液濃度為2.0 mg/mL的提取物，反應時間為1 min時對ABTS自由基的清除率為 13.35%，是藥液濃度為1.5 mg/mL提取物的2倍;反應時間增加至10 min時，ABTS自由基的清除率增加至反應時間為1 min時數值的1.4倍。

3 結論

該試驗采用乙酸乙酯為提取溶劑，通過冷浸法得到龍眼葉乙酸乙酯部位，并測定其對ABTS自由基的清除能力，結果發現，藥液濃度為0.2 mg/mL時龍眼葉乙酸乙酯部位顯示出一定的ABTS自由基清除率;隨濃度增加，ABTS自由基清除率迅速增加，在最大濃度2.0 mg/mL時，提取物對ABTS自由基表現出增加的清除率，為0.2 mg/mL藥液濃度時的3.0倍。此外，研究了龍眼葉乙酸乙酯部位對ABTS自由基的清除能力與時間之間的關系，結果表明隨反應時間增加，ABTS自由基清除率迅速增加。

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