陳德根
安溪縣畜禽屠宰監(jiān)督管理站 福建安溪 362400
近年來,關(guān)于豬瘟防疫的研究受到越來越多的關(guān)注。隨著社會生產(chǎn)力的不斷提高,對動物的免疫技術(shù)要求也相對提高,對于豬瘟的防疫要求更是嚴(yán)謹(jǐn),最好是一經(jīng)免疫就能準(zhǔn)確有效地杜絕該病。所以,有些豬場就只能對整個(gè)豬場的仔豬進(jìn)行多次免疫,只是這樣一來就加大了養(yǎng)殖場的豬瘟疫苗成本。為更好地預(yù)防該病,豬場應(yīng)制定好相應(yīng)的免疫程序,而監(jiān)測皮下注射疫苗后的豬瘟抗體水平變化,能夠更好、更準(zhǔn)確地控制該病的暴發(fā)流行。
監(jiān)測抗體水平可以彌補(bǔ)疫苗免疫程序的不足,更適合對豬瘟進(jìn)行防控。對某豬場同一天出生的21日齡仔豬以不同頭份豬瘟疫苗進(jìn)行皮下注射與肌肉注射,每7 d采血1次,檢測血清豬瘟抗體,記錄數(shù)據(jù)制成表格或折線圖,進(jìn)行分析。通過對豬瘟疫苗皮下注射與肌肉注射后抗體水平變化的比較,為豬場豬瘟免疫程序設(shè)計(jì)的合理性和實(shí)用性提供參考。
1.1 試驗(yàn)仔豬 40頭21日齡杜長大健康仔豬,由某規(guī)模豬場提供。
1.2 供試疫苗 CSFV弱毒疫苗,廣東永順生物制藥股份有限公司生產(chǎn),批號:(2017)190591084。
1.3 主要儀器和試劑 (盒) GO全波長酶標(biāo)儀,Thermo Multiskan公司;豬瘟IgG抗體檢測試劑盒,購自韓國安捷動物診斷試劑有限公司,Lot:4413PO001。
1.4 動物分組 試驗(yàn)開始前1 d對40頭仔豬采血,分別在每頭仔豬打上耳牌。在分組前先用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒對40頭仔豬檢測血清中豬瘟IgG抗體,根據(jù)測得的試驗(yàn)豬的抗體水平,將所有40頭仔豬分為8組(A~H組),每組5頭,每組仔豬平均抗體水平相近。
1.5 疫苗免疫注射和采血 在試驗(yàn)開始后按設(shè)計(jì)方案分別進(jìn)行豬瘟疫苗免疫注射,方案見表1。分別在第 0 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d 對 40 頭試驗(yàn)豬進(jìn)行采血。將豬保定,首先用酒精棉球?qū)σM(jìn)行采血的部位進(jìn)行消毒,用一次性注射器前腔靜脈采血5 mL,進(jìn)行按壓止血;采血完畢 后將血液放入低速離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心,得到分離的血清。將分離的血清置于2~8℃環(huán)境下并送實(shí)驗(yàn)室檢測。

表1 豬瘟弱毒疫苗免疫接種方案
1.6 樣品血清抗體檢測 每次直接用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測40份血清豬瘟IgG抗體。
對6次采血分離所得的480份血清用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測,計(jì)算每組5頭仔豬的抗體PI值平均數(shù)(見表 2、圖 1)。試驗(yàn)期 0~14 d,8組仔豬的平均抗體水平均有不同程度的下降;但在試驗(yàn)期14~35 d,除皮下注射對照組(D組)和肌肉注射對照組(H組)的平均抗體水平仍然下降外,其余6個(gè)試驗(yàn)組(A、B、C 組和 E、F、G 組)均不同程度上升,其中3個(gè)肌肉注射試驗(yàn)組(E、F、G組)的抗體水平均明顯低于3個(gè)皮下注射試驗(yàn)組 (A、B、C組)。皮下注射0.5頭份豬瘟疫苗試驗(yàn)組的抗體水平比肌肉注射2頭份豬瘟疫苗試驗(yàn)組的抗體水平高。
試驗(yàn)的時(shí)間跨度是從仔豬21日齡(傳統(tǒng)一免時(shí)間)至56日齡(傳統(tǒng)二免時(shí)間),檢測結(jié)果表明,免疫后0~14 d,8個(gè)組的抗體水平下降,與仔豬母源抗體水平的增長和下降一致。免疫后14~35 d,皮下注射組和肌肉對照組的抗體開始增長,除兩組持續(xù)降低外,皮下注射的仔豬血清抗體水平均優(yōu)于肌肉注射組。即使皮下注射0.5頭份豬瘟疫苗,抗體水平也高于2.0頭份肌肉注射組。從試驗(yàn)結(jié)果來看,有些意外的是肌肉注射的三個(gè)試驗(yàn)組(D、F、F組)中,肌肉注射2.0頭份豬瘟疫苗的抗體水平一直最低,而肌肉注射0.5頭份豬瘟疫苗的抗體水平最高,引起這一現(xiàn)象的原因可能是在試驗(yàn)期間人為操作導(dǎo)致的試驗(yàn)誤差,需要進(jìn)一步探討和研究。

表2 豬瘟IgG抗體檢測結(jié)果

圖1 不同時(shí)間各組豬瘟IgG抗體比較圖
從總體上看,豬瘟免疫抗體水平維持在較高水平,PI平均值均在70以上,呈逐漸上升的趨勢。
皮下注射方式的豬瘟疫苗接種量,僅需肌肉注射方式的1/4(或更少)即可達(dá)到同樣的免疫效果。