福建省部分規(guī)模豬場豬圓環(huán)病毒病疫苗免疫效果評價與分析

馬華魁

福建南星動物保健品有限公司 福建南平 353000

豬圓環(huán)病毒病是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種新的、比較難控制的傳染性疾病，主要侵害的是免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致被感染豬產(chǎn)生免疫抑制，多與其他病原微生物一起產(chǎn)生共同感染，導(dǎo)致病死率明顯上升[1-4]。PCV-2會嚴重損害豬的免疫系統(tǒng)，在支氣管、鼻黏膜、扁桃體、肺臟、腎臟、小腸和脾臟，病毒一般留在單核細胞、巨噬細胞、胸腺巨噬細胞和組織細胞，干擾細胞增殖，使相應(yīng)組織發(fā)生功能障礙，導(dǎo)致免疫 抑制。

通過血清學(xué)調(diào)查大數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，在世界大部分生豬養(yǎng)殖國家都出現(xiàn)過豬圓環(huán)病毒病陽性。例如，德國的某豬場也增加到77%，病死率為10%～30%[5-7]。我國第一次證實該病發(fā)生在21世紀初，通過對幾百份血清進行流行病學(xué)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)抗體陽性率近43%，有的省份甚至高達77%[8-10]。根據(jù)調(diào)查結(jié)果，結(jié)合當?shù)厍闆r總結(jié)，不同豬群不同日齡的抗體水平都不同，并且斷乳仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征抗體陽性率的出現(xiàn)是隨著日齡的增長而漸漸升高。在種豬上老母豬的抗體陽性率大于新母豬，甚至達到近86%[11-14]。

由于PCV-2感染在各生產(chǎn)階段都有可能發(fā)生，飼養(yǎng)周期至少6～8個月，周期太長、不可控因素偏多，所以，僅僅通過評估生產(chǎn)指標和臨床癥狀來評估疫苗效果是不嚴謹?shù)模瑹o疑加大了規(guī)模場選擇疫苗的困難。本試驗通過調(diào)查福建省部分規(guī)模豬場豬圓環(huán)病毒病疫苗實際免疫情況，了解免疫不同疫苗的抗體水平，為養(yǎng)殖戶選擇適合本場的疫苗提供數(shù)據(jù)依據(jù)；通過比較未感染免疫場和感染免疫場的抗體情況，檢驗所選試劑盒是否能真實反映人工免疫和自然感染的抗體規(guī)律。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 主要試劑與儀器 豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒（揚州，金宇優(yōu)邦）；BioTek酶標儀（美國，BioTek）；超凈工作臺（蘇州凈化）；不同規(guī)格移液器（德國，eppendorf）等。

1.1.2 試驗動物、豬場免疫情況和疫苗產(chǎn)品 試驗對象選擇為福建省5個地市的8個規(guī)模豬場，編號分別為C至K，豬場免疫情況和疫苗產(chǎn)品見表1。

表1 各試驗豬場疫苗免疫情況

1.1.3 樣品采集及制備 樣品采自8個規(guī)模豬場，共采集有效血清730份。樣本由各場按不同階段隨機從豬前腔靜脈采集并分離出血清，用以檢測豬圓環(huán)病毒2型抗體。

1.2 試驗方法

1.2.1 血清檢測PCV-2抗體 試驗按照金宇優(yōu)邦豬圓環(huán)病毒2型ELISA抗體檢測試劑盒說明書進行。

1.2.2 結(jié)果判定 S/P值≥0.30為陽性，S/P值＜0.30為陰性。S/P值=（待檢樣本OD450均值-陰性對照OD450均值）/（陽性對照 OD450均值-陰性對照 OD450均值）。

1.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析 試驗完成后收集數(shù)據(jù)，利用相關(guān)軟件進行計算，并繪制有關(guān)圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 免疫場與未免疫場種豬群抗體分析 免疫場與未免疫場公豬、后備母豬和經(jīng)產(chǎn)母豬的豬圓環(huán)病毒病抗體陽性率基本為100%，用SPSS軟件T.TEST檢驗分析，公豬、母豬、后備豬組間均差異不顯著（見表2）；但各階段種豬群的S/P均值，免疫場較未免疫場更高，符合免疫學(xué)規(guī)律；未免疫場的變異系數(shù)皆比免疫場的變異系數(shù)更高，分析認為未免疫場種豬的抗體水平更活躍（見表3-表4）。

表2 免疫場與未免疫場種豬抗體比較

表3 未免疫場種豬抗體情況

表4 免疫場種豬抗體情況

2.2 PCV-2全病毒滅活苗與亞單位疫苗免疫效果分析 選取種豬未免疫豬圓環(huán)病毒病疫苗、仔豬分別免疫全病毒滅活苗a苗、b苗的D場、K場，種豬未免疫豬圓環(huán)病毒病疫苗、仔豬免疫亞單位疫苗的F場，從圖1-圖3比對分析可看出，三個不同免疫模型場抗體趨勢皆出現(xiàn)先下降后上升的趨勢。但免疫全病毒滅活苗商品豬的感染時間點較免疫亞單位疫苗商品豬的感染時間更早，D場、K場在50日齡，而F場在105～150日齡。14日齡免疫亞單位C疫苗后抗體水平較高且維持時間較長，而免疫全病毒滅活苗后抗體水平持續(xù)短暫時間后即下降，分析認為免疫效果較差。

圖1 D場各階段PCV-2抗體檢測結(jié)果

圖2 F場各階段PCV-2抗體檢測結(jié)果

圖3 K場各階段PCV-2抗體檢測結(jié)果

2.3 不同廠家豬圓環(huán)病毒亞單位疫苗免疫效果分析 選取種豬未免疫豬圓環(huán)病毒病疫苗、仔豬14日齡免疫國產(chǎn)c苗的F場，種豬未免疫豬圓環(huán)病毒病疫苗、仔豬免疫進口d苗的H場，從圖4-圖5可看出，免疫后45 d內(nèi)F場圓環(huán)病毒病抗體陽性率及S/P均值較H場更高，c苗的免疫效果更佳；從感染趨勢看，H場的感染時間點在90日齡前后，而F場的感染時間點在105～150日齡。

圖4 F各階段PCV-2抗體檢測結(jié)果

3 討 論

圖5 H場各階段PCV-2抗體檢測結(jié)果

從免疫場和未免疫場對比可知，兩者的種豬抗體陽性率皆較高。所以，不能簡單通過檢測種豬的圓環(huán)病毒病抗體陽性率高低來判斷種豬的健康程度；但是免疫場的變異系數(shù)較不免疫場穩(wěn)定，因此，種豬免疫豬圓環(huán)病毒病疫苗可以降低種豬群的波動風險。

試驗結(jié)果表明，商品豬免疫豬圓環(huán)病毒亞單位疫苗45 d內(nèi)的抗體陽性率及S/P均值都比免疫豬圓環(huán)病毒全病毒滅活苗更高，且免疫豬圓環(huán)病毒亞單位疫苗的商品豬野毒感染時間更遲，商品豬耐受性更強，臨床損失更小。c苗在幾個圓環(huán)病毒亞單位產(chǎn)品中免疫效果更好。

通過對種豬群未免疫的F場檢測發(fā)現(xiàn)，該場抗體陽性率達100%，說明該場為野毒感染場，其S/P均值高于2.0以上；而種豬群免疫的G場，雖然抗體陽性率100%，但S/P均值均處于1.5以下，能直觀反映免疫的抗體規(guī)律；通過調(diào)查發(fā)現(xiàn)，用其他豬圓環(huán)病毒病抗體試劑盒檢測，無法直觀反映人工免疫和野毒感染的規(guī)律。

豬圓環(huán)病毒一直在我國廣泛傳播流行和變化，從2a亞型到2b亞型再到現(xiàn)在出現(xiàn)的2d亞型、PCV-3。PCV-2型疫苗是防控該病的主要手段，影響疫苗效果的因素除了抗原含量、蛋白含量、佐劑外，還與免疫次數(shù)、免疫時間、合理的免疫劑量及豬群健康度息息相關(guān)。疫苗效果的評估除了血清抗體和抗原檢測外，還要結(jié)合臨床豬群表現(xiàn)、生產(chǎn)指標數(shù)據(jù)等進行綜合判斷。養(yǎng)殖戶應(yīng)根據(jù)自身豬場情況，選擇適合本場的豬圓環(huán)病毒病疫苗，嚴格執(zhí)行全進全出制度，優(yōu)化飼養(yǎng)管理，并嚴格加強生物安全措施。