水果蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法探討

李瓊 徐俊

農(nóng)藥殘留是指在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中施用農(nóng)藥直接或間接殘存于谷物、蔬菜、果品、畜產(chǎn)品、水產(chǎn)品以及土壤和水體中的現(xiàn)象。有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥中存在著部分高毒和劇毒品種，如果被施用于生長(zhǎng)期較短、連續(xù)采收的蔬菜，則很難避免因殘留量而導(dǎo)致人畜中毒。由于農(nóng)藥殘留對(duì)人和生物危害很大，各國(guó)對(duì)農(nóng)藥的施用都進(jìn)行嚴(yán)格管理，并對(duì)食品中農(nóng)藥殘留容許量作了規(guī)定，本文對(duì)農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法進(jìn)行分析探討。

一、檢測(cè)環(huán)境的要求

農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)要求在干凈、安靜、通風(fēng)、通水電和可以人工控制溫濕度的空間進(jìn)行操作。

二、檢測(cè)原理

有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性具有抑制作用，通過測(cè)定該酶的活性被抑制的程度即可知樣品中含有農(nóng)藥的殘留情況。

三、檢測(cè)樣品、器具和試劑

1.檢測(cè)樣品

農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)樣品來源于蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)市場(chǎng)、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、超市，抽樣根據(jù)GB/T5009.199-2003標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。

田間蔬菜采樣。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜆悠凡蓸訉?shí)際情況，按照隨機(jī)法、對(duì)角線法或五點(diǎn)法在每個(gè)采樣單元內(nèi)進(jìn)行多點(diǎn)采樣。

2.樣品預(yù)處理及采樣量

（1）葉類蔬菜采集樣品量至少為4-12個(gè)個(gè)體，不少于3kg。

（2）塊根類和塊莖類蔬菜采集塊根或塊莖，用毛刷和干布去除泥土及其他黏附物。樣品采 集量至少為6-12個(gè)個(gè)體，且不少于3kg.

（3）鱗莖類蔬菜樣品采集量至少為12-24個(gè)個(gè)體，且不少于3kg。

（4）豆菜類蔬菜取豆莢或籽粒。采樣量鮮豆（莢）不少于2對(duì)，干樣不少于1對(duì)。

（5）果菜類（果皮可食）除去果梗后的整個(gè)果實(shí)。采樣量為6-12個(gè)個(gè)體，不少于3kg。

（6）果菜類（果皮不可食用） 除去果梗后的整個(gè)果實(shí)，測(cè)定時(shí)果皮與果肉分別測(cè)定。采樣樣品量為4-6個(gè)個(gè)體。

3.檢測(cè)儀器

符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)及配套器具，即純水儀、電子天平、振動(dòng)器、500ml的燒杯、菜刀、移液器、菜板等。

4.檢測(cè)試劑

（1）試劑準(zhǔn)備

①緩沖液（將緩沖液試劑溶入500ml蒸餾水中，溶解、和渾勻待用）;②酶試劑;③顯色劑;④底物（需加入13ml的蒸餾水待用）。

（2）注意事項(xiàng)

①移液器使用時(shí)，必須遵循器具專用原則：吸取酶、顯色劑、底物的移液器貼上專用標(biāo)簽，移取試劑時(shí)一一對(duì)應(yīng)使用，避免混用試劑。②試劑使用時(shí)，必須遵循只進(jìn)不出的原則：從酶、顯色劑、底物試劑瓶中移取出的試劑，不得返回原試劑瓶中，以免污染原試劑。

四、檢測(cè)方法和步驟

1.樣品前處理

（1）蔬菜類樣品處理

①植株：秤取2g樣品（葉菜類剪成寬度為1厘米的菜樣，塊根菜取1厘米左右的表皮樣品）放入三角瓶中，加入10ml緩沖液后，振蕩提取2分鐘;②茶葉：秤取0.5g樣品，加入5ml丙酮，振蕩提取5分鐘;取0.2ml的丙酮溶液，40～50度水浴蒸干;加入2.5ml 緩沖液振蕩2分鐘;③特殊蔬菜樣品處理，蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、茭白、蘑菇及番茄汁中含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類樣品時(shí)，可采取整株（體）浸提，避免次生物物質(zhì)干擾。

（2）水果類樣品處理，大多數(shù)水果是取汁和果肉，除一些特殊水果要特殊處理

①西瓜：取汁或果肉;②柑橘類：取汁和果肉，但是盡量防止此類果皮中的精油;③香蕉：取皮;④表皮較硬的水果：除取汁和果肉外，亦可用1g脫脂棉蘸酒精擦拭表皮，直接將擦拭過表皮的脫脂棉放入試管內(nèi)代替樣品。

（3）樣品處理注意事項(xiàng)

樣品不宜太碎，這樣能使切面較少;辛辣物質(zhì)可用辛辣物質(zhì)處理劑消除干擾;高淀粉果蔬，可將樣品和提取液按1：5的比例浸泡3min，用其浸泡液作為樣品液;切面有滲液的果蔬，在取皮時(shí)盡量使皮膚取得薄些。

2.檢測(cè)樣品的制備

（1）空白對(duì)照檢測(cè)：取酶100ul，緩沖液2.5ml，加入試管中，混勻，再加入顯色劑100ul，底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中進(jìn)行對(duì)照檢測(cè)。

（2）樣品測(cè)試檢測(cè)：取酶100ul，緩沖液2.5ml，加入試管中，混勻靜止抑制10分鐘，再加入顯色劑100ul，底物20ul。搖勻后立即轉(zhuǎn)移到比色皿中，及時(shí)放入儀器中測(cè)量。

五、檢測(cè)結(jié)果分析

根據(jù)GB/T5009.199-2003標(biāo)準(zhǔn)要求，抑制率>50%，表示樣品農(nóng)藥超標(biāo)，結(jié)果疑為陽(yáng)性，這種樣品需要再做2次以上重復(fù)檢測(cè)，多次檢測(cè)仍然呈陽(yáng)性就要用氣相色譜儀進(jìn)一步確認(rèn)。抑制率<50%，結(jié)果為陰性，表示樣品農(nóng)藥殘留不超標(biāo)。