朱光 鄭艷寧 董志彪
食用菌具有較高的營養價值和藥用價值,在市場上受到了人們的廣泛歡迎。要想提高食用菌的附加價值,充分發揮其優勢和作用,就需要加大對其營養功能與成分組成的研究力度,以促進我國食用菌產業的發展。此次研究以食用菌發酵液為對象,對其所含水溶性糖類進行測定分析,對食用菌發酵液的深加工具有理論借鑒意義。
食用菌發酵液研究現狀
在食用菌培育過程中,發酵液發揮著重要作用,為提高食用菌產量和質量,我國學者和專業針對食用菌發酵液中的蛋白質、維生素、氨基酸等非糖類物質展開了一系列研究,并且也取得了一定的成果。但是,現階段關于食用菌發酵液中水溶性糖類測定方面的研究較少,尤其是不同糖類物質在各個發酵階段的變化情況。基于此,此次研究主要針對食用菌發酵液中的水溶性糖類進行分析,確定不同糖類物質的具體含量,以及各個發酵時期糖類成分組成的變化,為食用菌發酵過程的把控提供可靠依據。
食用菌發酵液中水溶性糖類含量的檢測
實驗準備及實驗方法
實驗準備
實驗材料主要為四種食用菌發酵液,分別為銀耳、靈芝、血芝、側耳發酵液。檢測分析過程中需用到多種試劑,包括苯酚、濃硫酸、乙酸鋅、HCl水溶液、NaOH溶液等,試劑純度規格為分析純,所含雜質不會影響檢測結果。此外,還需要用到紫外可見分光光度計、精密性分析天平、電熱恒溫真空干燥箱、恒溫水浴鍋等設備,所選型號分別為UV- 2800、梅特勒-托利多ME 1002T、D2F- 0、瑪瑞特HH-2S。
實驗方法
此次研究所測定的糖類物質主要包括蔗糖、葡萄糖、多糖和總糖四種。首先,在檢測蔗糖含量時,分6次對濃度為0.2g/L的標準液進行采樣,規格為0、0.5、1、1.5、2、2.5,分別與3mL濃鹽酸混合后定容至10mL。混合液經沸水加熱后冷卻至常溫,加熱時長以8min較為合適。以試劑空白作為對比標準,在291nm波長條件下借助1cm比色皿對樣品液吸光度進行測定,根據測定結果繪制標準曲線圖,橫坐標和縱坐標分別表示蔗糖含量與光密度大小,其中蔗糖含單位為mg。重復上述流程,吸取 1mL樣品液對吸光度進行測定,參照標準曲線計算并確定所含蔗糖量。
實驗共分為完成營養生長、營養富集、呼吸代謝基本結束三個階段,其中第一階段時間約為85d,第二和第三階段分別在此基礎上延長17d和24d。
實驗結果與討論
食用菌發酵液中不同水溶性糖類含量
按照上述實驗方法進行操作,可得到食用菌發酵液中的不同類型水溶性糖類的具體含量情況。首先,在檢測蔗糖含量時,根據實驗結果繪制標準曲線,可得回歸方程為:y=0.0164x+0.0096,相關系數R=0.9984。三個實驗階段,銀耳發酵液中的蔗糖含量分別為223.4、285.2、299.6mg/mL,靈芝發酵液中的蔗糖含量分別116.2、158.9、176.2mg/ mL,血芝發酵液中的蔗糖含量分別104.4、109.5、113.6mg/mL,側耳發酵液中的蔗糖含量分別72.6、76.4、88.2mg/mL。由此可知,在整個發酵過程中,四種食用菌發酵液中的蔗糖含量,從高到低依次為銀耳、靈芝、血芝、側耳。
其次,在檢測葡萄糖含量時,所用方法為碘量法。三個實驗階段,銀耳發酵液中的葡萄糖含量分別為227.2、281.9、292.26mg/ mL,靈芝發酵液中的葡萄糖含量分別103.8、187.4、188.7mg/mL,血芝發酵液中的葡萄糖含量分別87.8、99.6、104.5mg/mL,側耳發酵液中的蔗糖含量分別35.5、88.6、90.4mg/ mL。由此可知,在整個發酵過程中,四種食用菌發酵液中的葡萄糖含量,從高到低依次為銀耳、靈芝、血芝、側耳。
另外,檢測食用菌多糖含量時,標準曲線的繪制需借助苯酚-硫酸法完成,可得回歸方程為:y=0.0061x- 0.0383,相關系數R=0.9984。三個實驗階段,銀耳發酵液中的多糖含量分別為61.8、82.5、91.9mg/mL,靈芝發酵液中的多糖含量分別184.1、216.9、257.9mg/mL,血芝發酵液中的多糖含量分別35.7、38.1、42.2mg/mL,側耳發酵液中的多糖含量分別120.1、157.1、171.9mg/mL。由此可知,在整個發酵過程中,四種食用菌發酵液中的多糖含量,從高到低依次為靈芝、側耳、銀耳、血芝。
最后,三個實驗階段,銀耳發酵液中的總糖含量分別為614.4、672.5、695.9mg/mL,靈芝發酵液中的總糖含量分別406.6、479.1、493.5mg/mL,血芝發酵液中的總糖含量分別281.3、304.2、367.2mg/mL,側耳發酵液中的總糖含量分別221.3、323.9、342.5mg/ mL。由此可知,在整個發酵過程中,四種食用菌發酵液中的總糖含量,從高到低依次為銀耳、靈芝、血芝、側耳。
各發酵階段食用菌糖類成分
根據實驗結果可知,在三個實驗階段,銀耳發酵液中的不同可溶性糖類含量均表現為增大趨勢,其中含量最高的糖類為總糖,蔗糖含量次之,多糖含量最少。靈芝發酵液中的不同可溶性糖類含量呈升高變化,其中含量最高的糖類為總糖,多糖含量次之,蔗糖含量最少。血芝發酵液中的不同可溶性糖類含量也是持續上升的,總糖易發生水解反應轉化為多糖,進而再降解為蔗糖和葡萄糖。其中含量最高的糖類為總糖,蔗糖含量次之,多糖含量最少。側耳發酵液中的不同可溶性糖類含量也是不斷增多的,其中以總糖含量最高,多糖次之,蔗糖含量最少。
通過實驗可知,在銀耳、靈芝、血芝、側耳四種食用菌發酵液中,蔗糖、葡萄糖及總糖含量最高的均為銀耳,靈芝多糖含量最高。在不同實驗階段,銀耳、靈芝、血芝、側耳的多種可溶性糖類均表現為升高趨勢,且含量最高的可溶性糖類均為總糖。