免疫奶牛群布魯氏菌病的實驗室診斷經驗分析

阿米娜·買買提

摘 要 現階段市場對于牛奶制品的需求量非常大，所以我國很多地方的奶牛養殖戶投入了大量的資金和技術進行奶牛養殖，以期牛奶制品進入市場后獲得高額的經濟收益，但是受到多種因素影響，當前奶牛養殖期間奶牛有著較高發生布魯氏菌病的風險，該疾病具有較高的傳染性、死亡率等特點，一旦出現，給養殖戶造成的經濟損失較多，所以需要養殖戶對于免疫奶牛群布魯氏菌病的實驗室檢查診斷工作加強關注并予以積極配合，以此降低牛群患病風險。基于此本文對養殖場免疫奶牛群布魯氏菌病實驗室診斷工作基本情況進行了分析，探究了提升診斷結果準確性的有效診斷方法。

關鍵詞 免疫；奶牛群；布魯氏菌病；實驗室；診斷

布魯氏菌病屬于奶牛養殖期間的常見疾病，病原體為革蘭氏陰性菌，好發于春季、冬季，屬于人畜共患傳染疾病，臨床癥狀主要為潛伏時間非常長、母牛流產、精神狀態不佳、關節炎、體重下降、乳房炎、睪丸炎、奶品質差等，發病之后的治療、根治難度非常大，所以奶牛養殖場的奶牛患有該疾病后，養殖戶面臨的經濟風險非常高。

1 材料與方法

1.1 材料

選擇本地區多處奶牛養殖場、散戶的奶牛為研究對象，采集其中300頭奶牛（月齡在13月以上、不超過16個月，均經過布魯氏菌病免疫疫苗接種）的血液，應用離心機作以血液血清樣本制作。結合本次實驗室診斷的需要，進行實驗試劑的準備，包括布氏桿菌抗體競爭監測試劑、虎紅平板凝集試劑、聚合酶鏈反應試劑。

1.2 實驗室診斷方法

本次研究中選擇三種方法來診斷奶牛疾病免疫后的轉陽率，即酶聯免疫吸附測定法、虎紅平板凝集試驗法、聚合酶鏈反應法。

2 結果

（1）酶聯免疫吸附測定：取出100份布魯氏菌病免疫奶牛血液血清進行試驗，研究奶牛該疾病抗體轉陽率，其中陽性奶牛例數為12頭（12.00%）；（2）虎紅平板凝集試驗：100份免疫奶牛血液血清經過該法檢測轉陽例數后，共檢出15例轉陽奶牛（15.00%）；（3）聚合酶鏈反應：100份免疫奶牛血清的轉陽率通過該法檢測后，檢出陽性奶牛頭數為8頭（8.00%）；因此綜合分析上述免疫奶牛布魯氏菌病轉陽情況，發現虎紅平板凝集試驗用于該指標檢測時，結果準確率高，與實際轉陽奶牛頭數保持一致，其中檢測對象的免疫期在半年或超過該時間的條件下，可以得到準確的檢測結果，酶聯免疫吸附測定法、聚合酶鏈反應法作用于布魯氏菌病免疫奶牛轉陽檢測診斷中，也有著較好的檢查結果，其中酶聯免疫吸附測定法應用后檢查出來的陽性免疫奶牛中有 7頭屬于流產奶牛，之后再次利用聚合酶聯反應法對這7頭流產奶牛進行疾病轉陽的檢測，結果驗證了這一點，說明這兩種方法同樣在免疫奶牛群疾病陽性檢測中有著一定的檢查診斷作用。

3 結論

現階段進行免疫奶牛群布魯氏菌病實驗室診斷時使用的方法較多，不同方法的應用條件與效果存在較大差異，所以需要實驗室工作人員結合受檢奶牛群的身體基本情況，選擇最佳的診斷手段進行應用，以期奶牛群罹患布魯氏菌病的奶牛可以被及時檢查出與處理，避免病原體在養殖場所內大規模傳染所致的嚴重后果發生。

首先虎紅平板凝集試驗，利用該實驗室診斷方法對于布魯氏菌病免疫奶牛進行陽性率轉變檢查時，適用于免疫期（豬型2號布病疫苗）在6個月或以上的奶牛群體，究其原因是奶牛犢牛在娩出后至生長到8個月時進行布魯氏菌疾病疫苗接種，之后在半個月左右時奶牛身體內會出現抗體，在總抗體比例中的占比約為40%，待免疫期到3個月時，抗體比例會達到最高峰，然后免疫期到4個月-9個月時抗體會逐漸下降直至消失，因此可以選擇在免疫期處于6個月時對免疫奶牛進行布魯氏菌病轉陽情況的檢查，可準確檢出免疫奶牛群中轉陽的奶牛只數，使得養殖戶可及時對這部分奶牛進行疾病發生檢查確診與治療、無害化處理，防止布魯氏菌病在養殖場內繼續擴散發展[1]。其次，酶聯免疫吸附測定法，應用該方法檢測疾病免疫奶牛轉陽情況時，與虎紅平板凝集試驗法檢測條件一致，即對疾病免疫時間超過半年的豬型布病疫苗免疫奶牛進行檢測，可得到較為理想的檢測結果，或者奶牛接種了19菌株疫苗，待免疫期在半年時檢測轉陽情況，此時奶牛身體內疫苗抗體殘留量較少，最終檢查出的結果可以準確反映出免疫奶牛是否轉陽的結果。最后聚合酶聯反應法，該檢測方法在布魯氏菌病免疫奶牛轉陽率實驗室診斷期間，存在敏感性差的問題，所以檢測得出的結果顯示陰性率較高，如果檢測對象應用此法檢測分析了轉陽情況，那么基本上要在檢測結果出來后等待一個月，再次對檢測對象進行轉陽率檢測，以此綜合兩次結果才可以得出最終的陽性率檢出結果，最后該結果仍不能將檢測對象中屬于疾病轉陽的奶牛完全檢出，因此提示在對奶牛場的布病奶牛接種疫苗之后進行轉陽診斷時，盡量不要用聚合酶聯反應法進行陽性檢測，如果應用了該檢測法，那么僅對免疫奶牛發生早期感染之后的乳品樣本進行病原學的檢測即可，不可進行血清樣本的布病轉陽檢測[2]。

4 結束語

綜上所述，布魯氏菌病對于奶牛場養殖奶牛的身體健康、生命安全造成的威脅較大， 需要養殖戶對于奶牛該疾病涉及的相關內容進行深入的研究學習，準確把握奶牛發病后的臨床癥狀表現，每年在適當的時候聯系防疫人員來為全部適齡奶牛接種布病疫苗，以此降低該牛病發生風險，與此同時養殖戶需要對免疫期奶牛的疾病轉陽情況加以關注，委托防疫中心工作人員在適當的免疫期限內，來對全部奶牛作以疾病轉陽率的實驗室診斷檢查，以便了解與準確把握該養殖場免疫奶牛布病發生情況，盡快制定有效措施進行疾病防控，減輕奶牛該傳染病發生后所致的嚴重危害，其中虎紅平板凝集試驗法及酶聯免疫吸附測定法要多進行應用，依托這兩種檢測方法可以對接種了疫苗的奶牛發病情況做出準確的判斷，為奶牛場該牛病的良好防控提供數據依據，所以這兩種實驗室檢查診斷方法需要在后續的免疫奶牛布魯氏菌病的臨床檢測中多進行應用與推廣，助推本地區奶牛養殖產業可以長遠穩健發展。

參考文獻：

[1]武燕. 靖邊縣奶牛結核病和布魯氏菌病檢測與分析[D].西北農林科技大學，2015.

[2]高明春，王君偉.布魯氏菌病實驗室診斷技術及其適用性評析[J].中國奶牛，2012（04）：35-38.