NDV/FMW對(duì)耐維羅非尼的惡性黑色素瘤細(xì)胞免疫原性死亡相關(guān)分子表達(dá)的影響

邵曉雁， 王雪珂， 陳健華， 朱忠政， 孟松樹， 許 青

(1. 同濟(jì)大學(xué)附屬第十人民醫(yī)院腫瘤科，上海 200072; 2. 上海市皮膚病醫(yī)院腫瘤科，上海 200443; 3. 大連醫(yī)科大學(xué)腫瘤干細(xì)胞研究院，大連 116044)

惡性黑色素瘤是一種高度侵襲性的腫瘤，預(yù)后差、嚴(yán)重威脅人類健康[1]。據(jù)報(bào)道，中國(guó)的晚期黑色素瘤患者約25.5%存在鼠類肉瘤病毒癌基因同源B1(v-Raf murine sarcoma viral oncogene homolog B1, BRAF)基因突變[2]。2011年8月，維羅非尼(vemurafenib)被批準(zhǔn)用于BRAF突變的轉(zhuǎn)移性晚期黑色素瘤患者[3]。維羅非尼可提高患者的無進(jìn)展生存期(progression-free survival, PFS)，但大多數(shù)患者6～7個(gè)月出現(xiàn)耐藥[4]。維羅非尼耐藥以后，治療手段有限且療效不佳，因此需要探討維羅非尼耐藥后惡性黑色素瘤新的治療手段。

溶瘤病毒(oncolytic virus, OVs)在腫瘤治療方面取得重要突破，但是OVs在惡性黑色素瘤vemurafenib耐藥治療中的價(jià)值尚不清楚。既往文獻(xiàn)[5-6]顯示，OVs除對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生直接的溶解作用外，還可誘導(dǎo)表達(dá)或釋放鈣網(wǎng)蛋白(calreticulin, CRT)、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)、高遷移率族蛋白1(high mobility group protein 1, HMGB1)、熱休克蛋白90(heat shock protein 90, HSP90)等激起細(xì)胞免疫原性的損傷相關(guān)分子模式(damage associated molecular patterns, DAMPs)，進(jìn)而誘發(fā)非耐藥腫瘤細(xì)胞免疫原性死亡(immunogenic cell death, ICD)[8-9]。

腫瘤的發(fā)生發(fā)展與免疫機(jī)制關(guān)聯(lián)密切[9-10]，本研究旨在細(xì)胞水平上驗(yàn)證新城疫病毒毒株FMW(Newcastle disease virus, NDV/FMW)對(duì)惡性黑色素瘤WM3248/vemurafenib細(xì)胞株的殺傷效應(yīng)，進(jìn)一步探討NDV/FMW對(duì)耐藥細(xì)胞殺傷效應(yīng)的可能免疫機(jī)制，為惡性黑色素瘤維羅非尼耐藥的臨床治療提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器

人BRAF突變的黑色素瘤WM3248細(xì)胞株和WM3248/vemurafenib細(xì)胞株由Joon Kim實(shí)驗(yàn)室提供[11]；雞胚成纖維細(xì)胞株DF1購自美國(guó)ATCC公司；NDV/FMW由大連醫(yī)科大學(xué)孟松樹實(shí)驗(yàn)室提供；……