內源性干細胞對小鼠出血性腦損傷的修復作用

黃子珂， 宋越強， 張 熙， 童偉芳， 李思光

(1. 同濟大學醫學院再生醫學系，上海 200092; 2. 同濟大學附屬同濟醫院神經內科，上海 200065)

腦出血(intracerebral hemorrhage, ICH)是由于腦血管破裂導致血液溢出至腦實質或蛛網膜下而造成的神經損傷，我國腦出血發病率占腦卒中的17.1%～55.4%，遠高于歐美發達國家的6.5%～19.6%[1-3]；且腦出血易復發、預后差、死亡率高，患者即使存活，生活質量也大大降低[4-5]。目前較有前景的治療手段為干細胞治療法，其中內源性干細胞由于不存在細胞來源、排斥以及成瘤等問題[6]，因此具有很強的治療潛力。大腦中存在多種類型的干性細胞，如神經干細胞和血管干細胞等。而當大腦受到損傷后，周細胞以及星形膠質細胞等終末分化細胞在損傷因子的刺激下能發生重編程而獲得干性，共同參與修復。CD133(prominin-1)在神經干細胞、外周血干細胞及血管祖細胞等多種干/祖細胞中均有表達[7]，小鼠室管膜下區存在可被激活的CD133+神經干細胞，激活后能進一步分化成為神經元和膠質細胞[8-9]。本研究將CD133-Cre-ERT2轉基因C57BL/6小鼠以及含Rosa26-CAG-LSL-ZsGreen報告基因C57BL/6小鼠雜交，得到可示蹤CD133+干細胞的CD133-CreER；CAG-ZsGreen示蹤小鼠，利用該小鼠制備紋狀體出血性腦卒中動物模型，探究CD133+干細胞遷移、增殖與分化情況，分析評價CD133+干細胞對出血性卒中損傷的修復作用；同時觀察損傷區域或附近的周細胞、星形膠質細胞等終末分化細胞受損傷因子刺激而參與損傷修復情況，為臨床腦出血研究提供生物學基礎。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

他莫昔芬(tamoxifen，T5648)、三溴乙醇(T48402)、封片劑(O8015)、蔗糖(V900116)、玉米油(C8267)購自美國Sigma公司；……