不同干燥方法對鐵皮石斛多糖和甘露糖含量的影響

鄭顯義

摘要：通過真空冷凍、紅外線、微波及烘干四種方法干燥鐵皮石斛，利用高效液相色譜法對甘露糖含量進行檢測;利用比色法對多糖含量進行檢測，對比不同干燥方法對鐵皮石斛甘露糖及多糖含量的影響。結果真空冷凍干燥樣品中保留了最高的甘露糖及多糖含量，而且較其他三種干燥方法更優（P<0.05）。是干燥鐵皮石斛最理想方法。

關鍵詞：甘露糖;多糖;鐵皮石斛;干燥方法

鐵皮石斛干燥莖或者新鮮莖又被稱為“鐵皮蘭”，具有生津益胃、潤肺止咳的作用。鐵皮石斛活性成分以多糖為主，包括抗炎、免疫功能增強等。鐵皮石斛鮮藥保存難度較大，加熱烘干處理期間，其品質及藥物作用效果通常受到不同程度的影響。針對不同干燥方法對鐵皮石斛甘露糖及多糖的影響進行探析。

研究資料與方法

研究資料

試材：選取本區新鮮鐵皮石斛、無水葡萄糖、D-甘露糖標準品、1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮和氨基葡萄糖鹽酸鹽。

儀器：ALPHA1-2LD真空冷凍干燥機、WS70-1型紅外線快速干燥器、NN-K5440MF微波爐、DHG-9053A型電熱恒溫鼓風干燥箱、LD4-8型低速臺式離心機、UV-2550紫外線可見光光度計。

方法

鐵皮石斛不同干燥方法。選取新鮮石斛莖30g，將其切成若干小段每段0.5cm。

烘干干燥：平攤至溫度為65℃的鼓風干燥箱中干燥72h，在其含水量是1.945%后將其制成粉末。紅外線干燥：平攤于紅外線快速干燥機中干燥7h，在含水量是1.747%后制成粉末。微波干燥：平攤置于微波爐中干燥10min，在含水量檢測為1.856%后制定粉末。真空冷凍干燥：置于-20℃冰箱中預凍2h，然后平攤置于真空冷凍干燥劑干燥72h，含水量檢測為1.999%后制成粉末。

檢測石斛多糖含量。苯酚-硫酸法獲取標準曲線：精密稱取9mg無水葡萄糖，定容到100mL，精密量取1.0、0.8、0.6、0.4、0.2mL，每個補水到1.0mL，在波長為480mm條件下，通過紫外線分光光度計對吸光度值進行檢測。橫坐標（x）為質量濃度，縱坐標（y）為吸光度值，對無水葡萄糖標準曲線進行繪制，獲取現行方程：y=9.226x+0.0418（r=0.9997）。

制備樣品溶液：采取精密儀器稱取0.3g樣品粉末，添加去離子水200mL，加熱回流2h，定容到250mL后，抽取2mL濾液，添加無水乙醇10mL，以每分鐘4000r的速度離心20min，將上清液去除，待沉淀后采用80%乙醇清洗2次，8mL/次，沉淀后通過熱水溶解，定容到25mL，獲取樣品多糖水溶液。

通過苯酚硫酸法對多糖含量進行檢測：采取精密儀器稱取1.0mL樣品溶液，精密添加1mL的5%苯酚溶液，均勻搖晃，然后添加5mL硫酸，在沸水浴中積熱20min，放置于冰浴中冷卻5min，然后對樣品溶液中吸光度值進行檢測，并對鐵皮石斛多糖含量進行計算。

檢測甘露糖含量。色譜條件：XDB-C18柱;流動相為乙腈-0.02mol/L的乙酸銨溶液;波長及流速分別是250mm和1.0mL/L;柱溫及進樣量分別是30℃和5μL。

制備標準品溶液：將氨基葡萄糖鹽酸鹽0.6g加水定容到50mL視為內標液。選取10mgD-甘露糖放入至100mL容量瓶中，并談價內標液1mL，均勻搖晃，定容到刻度線，選取100μL聯合400mL的0.5mol/L PMP甲醇溶液及400mL的0.3mol/L NaOH混合液，將其置于70℃水浴中保溫100min。然后添加500μL的0.3mol/L HCl，均勻搖晃，采用2mL三氯甲烷進行清洗3次，過水膜，選取5μL樣品液，將其置于液相色譜儀中，將色譜圖記錄下來，對D-甘露糖及內標峰面積進行檢測。

制備樣品溶液：選取0.12g樣品粉末，分別添加200mL的80%乙醇，在索氏提取器中加熱回流4h，在燒杯中添加100mL水及2mL內標液，煎煮1h，冷卻后定容到100mL，均勻混合，離心，獲取樣品提取液，抽取1mL上清液，并將其放置在空瓶中，添加3.0mol/L HCl 0.5ml，縫合，混合搖勻，置于110℃水腫水解1h，冷卻后，通過3.0mol/L NaOH對PH進行調整直至中性，獲取樣品水解液。抽取樣品400μL水解液，添加0.5mol/L PMP甲醇溶液，然后抽取5μL樣品溶液將其置于液相色譜儀中，將內標峰面積和甘露糖記錄下來，并對甘露糖含量進行計算。

觀察指標

比較不同干燥方法對鐵皮石斛多糖及甘露糖含量的影響。

統計學方法

應用統計學軟件SPSS19.0處理本次研究中的計量資料（? ? ±s）和計數資料（%），分別采用t和x2進行檢驗，組間對比檢驗值為P，若P<0.05則代表差異呈統計學意義。

結果

3重復測定，均P<0.05。真空冷凍干燥法甘露糖382.1±35.1mg/g，總多糖430.2±20.4mg/g，最高;紅外線干燥法甘露糖265.7±8.8mg/g，總多糖262.5±24.2mg/g，最低;微波干燥法甘露糖348.7±20.4mg/g，總多糖394.5±7.1mg/g;烘干干燥法甘露糖303.7±15.4mg/g，總多糖364.8±17.4mg/g。

討論

鐵皮石斛加工期間，相對重要的一個階段是干燥，經過本次試驗結果可知，不同干燥方法獲取的鐵皮石斛中甘露糖及總多糖含量存在明顯差異。其中，真空冷凍干燥方法未顯著影響鐵皮石斛中甘露糖含量、多糖含量，然后是微波干燥及烘干干燥，其中影響最大的是紅外干燥方法。

多糖是鐵皮石斛中有效的活性成分，其同樣是研究鐵皮石斛中最多的一種其主要功效包括降血壓、免疫調節和抗腫瘤等，鐵皮石斛的藥理作用與多糖含量有關。鐵皮石斛的主要成分是甘露糖，甘露糖屬于已糖結構，不會吸收紫外線。本次研究鐵皮石斛多糖酸水解形成甘露醇，通過與PMP發生衍生化形成苯基衍生物，利用高效液相色譜法對其含量進行檢測可知，多糖含量與其含量呈正相關。

真空冷凍干燥技術具有低溫脫水的的特點，基本不會改變物料自身生物狀態、化學狀態及物理狀態，從而保留大部分有效營養物質。紅外干燥技術、烘干干燥技術及微波干燥技術利用高溫加熱實現紅棗，盡管具有較快的干燥速度和較高的效率，但是干燥期間，很容易破壞熱敏性物質，而且很容易導致物料恢復。

總而言之，4種干燥方法中，對鐵皮石斛中甘露糖及多糖含量影響較小的是真空冷凍干燥方法，其同樣是干燥鐵皮石斛最理想方法。

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