不同濃度6-BA對白芨叢芽誘導的影響

李云海　黑有蘭　陳麗華

摘要? ? 試驗采用MS培養基為基礎培養基，在添加0.5 mg/L NAA的情況下，分別添加不同濃度梯度的6-BA（0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L），研究不同濃度6-BA對白芨叢芽誘導增殖的影響。結果表明，6-BA濃度變化對白芨叢芽的誘導增殖具有顯著的影響，在試驗濃度范圍內，白芨試管苗叢芽增殖數與6-BA濃度成正相關，而增殖叢芽的平均株高和平均葉寬則與6-BA濃度成負相關;當6-BA濃度為2.0 mg/L時，對白芨試管苗叢芽誘導增殖的效果最好，具體表現為試管苗叢芽的增殖數量多且較健壯。

關鍵詞? ? 白芨;6-BA濃度;組織培養;叢芽誘導

中圖分類號? ? S567.239? ? ? ? 文獻標識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2019）15-0077-01

白芨（Bletilla striata（Thunb）Reichb. f.）是一種多年生蘭科草本植物，又名明白芨、紫蘭根、甘根、白給等[1]。我國白芨資源主要分布在陜西、河南、四川、云南等地，有研究認為，產于云南、四川的白芨質量最好[2]。白芨是一種傳統的中藥，其地下假鱗莖是白芨的主要藥用部位，一般將白芨假鱗莖進行干燥后入藥，主要藥用功效是治療各類外傷、腫瘤等，其含有的黏質多糖具有一定的抗癌作用[3]。另外，白芨假鱗莖具有很好的黏性，在工業上也可用作糊料[4]。

近年來，由于人們對野生白芨的過度采挖，導致野生白芨資源數量急劇下降。為了滿足生產和市場需求，目前多采用組織培養的方法進行白芨種苗的快速繁育。魯光耀等[5]對白芨組織培養快速繁殖體系進行了研究，采用MS液體懸浮培養的方式對白芨種苗進行快速繁殖。葉? 靜等[6]在白芨種子無菌萌發及組織培養試管快繁體系建立研究中認為，MS+1.0 mg/L 6-BA+0.15 mg/L NAA培養基適合白芨叢芽的增殖。李慧敏等[7]則在試驗研究后得出了MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L KT+0.2 mg/L NAA+有機附加物適合白芨假鱗莖誘導的結論。

本試驗在MS+0.5 mg/L NAA培養基的基礎上，探究不同濃度6-BA（0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L）對白芨叢芽誘導增殖效果的影響，以期從中篩選出與該濃度NAA協同配合效果較好的6-BA濃度。

1? ? 材料與方法

1.1? ? 試驗材料

供試材料為實驗室保存的白芨基礎苗。

1.2? ? 試驗設計

試驗在MS+NAA 0.5 mg/L培養基的基礎上，根據添加6-BA濃度的不同設4個處理，分別為添加6-BA 0.5 mg/L（B1）、1.0 mg/L（B2）、1.5 mg/L（B3）和2.0 mg/L（B4）。將實驗室保存的白芨基礎苗均勻切分成每叢5苗的小叢，接種至4個不同濃度6-BA處理的培養基中，每處理接種5瓶（即5次重復），每瓶接入5小叢。把接種好的培養瓶置于溫度21～23 ℃、光照強度1 500～2 000 lx、光照時間12 h/d的培養室中培養。

1.3? ? 調查統計

培養過程中，每周觀察白芨叢芽生長情況。培養至第45天時，統計每個處理5瓶試管苗叢芽的增殖和生長情況（增殖芽數、平均株高、平均葉寬等），并進行生物統計學分析。

2? ? 結果與分析

2.1? ? 不同濃度6-BA對白芨叢芽增殖的影響

由表1可知，隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗叢芽增殖倍數逐漸增大，當6-BA濃度為2.0 mg/L時，白芨試管苗叢芽增殖倍數達到最大，為7.12倍。經方差分析得出，處理B4與處理B1、B2、B3之間芽數差異達到極顯著水平，處理B3與處理B2、B1之間芽數差異也達到極顯著水平，處理B2和處理B1之間芽數差異不顯著。說明在試驗濃度范圍內，白芨試管苗叢芽的增殖數與6-BA濃度成顯著正相關。當6-BA濃度為2.0 mg/L時，白芨試管苗叢芽增殖最多，而且此時的試管苗叢芽仍較健壯。因此，就白芨叢芽增殖這一指標而言，與NAA 0.5 mg/L配合的適宜6-BA濃度為2.0 mg/L。

2.2? ? 不同濃度6-BA對白芨叢芽株高的影響

由表2可知，隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗叢芽的平均株高逐漸降低。經方差分析可知，不同濃度6-BA處理對白芨試管苗叢芽株高的影響差異顯著。進行多重比較發現，處理B1與處理B3、B4之間差異極顯著，與處理B2之間差異顯著;處理B2與處理B4之間差異極顯著，與處理B3之間差異不顯著;處理B3與處理B4之間差異不顯著。說明處理B4（6-BA濃度為2.0 mg/L）白芨試管苗叢芽較矮壯，沒有出現徒長等現象。

2.3? ? 不同濃度6-BA對白芨叢芽葉寬的影響

由表3可知，白芨試管苗叢芽平均葉寬與試驗濃度范圍內6-BA的濃度成負相關，即隨著6-BA濃度的升高，白芨試管苗的平均葉寬逐漸變窄。經過方差分析可得出，各處理間白芨試管苗平均葉寬差異顯著。經多重比較后可得出，處理B1與處理B2、B3、B4之間有極顯著差異;處理B2與（下轉第80頁）

處理B4、處理B3與處理B4之間有極顯著差異;處理B2與處理B3之間差異不顯著。說明當6-BA濃度為2.0 mg/L時，試管苗的葉片會變得較窄，但觀察發現，其葉片仍較嫩綠，未出現弱化或玻璃化等現象。

3? ? 結論與討論

在植物組織培養快速繁殖過程中，細胞分裂素6-BA的作用主要是促進芽的形成和生長，生長素NAA的作用則主要是促進試管苗的生長、壯苗和生根等。本試驗結果表明，在MS培養基添加0.5 mg/L NAA的情況下，6-BA濃度的變化對白芨叢芽的誘導增殖具有顯著影響;而且在試驗濃度范圍內（0.5～2.0 mg/L），白芨試管苗叢芽增殖數與6-BA濃度成正相關，增殖叢芽的平均株高和平均葉寬與6-BA濃度成負相關。當6-BA濃度達到2.0 mg/L時，叢芽的增殖倍數達到最大，為7.12倍，誘導芽增殖的效果最好;而且觀察發現，此時的試管苗叢芽仍較健壯，沒有出現徒長、弱化或玻璃化等現象。因此，可以認為，與0.5 mg/L NAA協同配合使用誘導白芨試管苗叢芽健壯增殖的適宜6-BA濃度為2.0 mg/L，既能保障白芨試管苗叢芽的快速增殖，又能使試管苗叢芽健壯生長而不出現徒長、弱化或玻璃化等情況。

4? ? 參考文獻

[1] 中國科學院《中國植物志》編輯委員會.中國植物志[M].北京：科學出版社，1999.

[2] 陳燦，陳海霞.白芨繁殖研究進展[J].湖南農業科學，2015（4）：135-137.

[3] 陶阿麗，金耀東，劉金旗，等.中藥白芨化學成分、藥理作用及臨床應用研究進展[J].江蘇農業科學，2013，41（11）：8.

[4] 石麗敏，盧華兵，胡賢女.白芨的研究現狀[J].農業科技通訊，2016（5）：6-8.

[5] 魯光耀，楊仙，蔣瑞彬，等.白芨組培快速繁殖體系研究[J].浙江中醫藥大學學報，2015，39（5）：383-389.

[6] 葉靜，鄭曉東，管常東，等.白芨的無菌萌發和組織培養[J].云南大學學報（自然科學版），2010，32（增刊1）：422-425.

[7] 李慧敏，楊冠海，李明靜.白芨瓶內假鱗莖誘導研究[J].南方農業學報，2013，44（10）：1067-1612.