液相串聯質譜法測定水質中的草甘膦和氨甲基膦酸

羅羚豐 羅杰鴻

草甘膦屬于除草劑的一種，是日常檢測項目之一。液相串聯質譜法直接測定草甘膦，因為草甘膦的分子量小，極性大，需要使用親水性的柱子，而且草甘膦的保留時間不穩定，需要高鹽流動相。氣相色譜或者氣相質譜法測定草甘膦時，需要衍生，增加實驗的難度。現在標準采用的Fmoc-Cl 衍生是比較有效的方法。本文采用該方法，利用液相串聯質譜法測定水質中的草甘膦和它的水解產物氨基甲磷酸。

實驗

儀器、試劑與材料。ACQUITY UPLC I-Class超高效液相色譜儀、Xevo TQ-S micro電噴霧串聯四級桿質譜儀（美國waters公司），高速渦旋機（HMS-350），草甘膦和氨甲基膦酸標準溶液，FMOC-Cl 丙酮溶液（ 1. 0 g /L） ：稱取100 mg FMOC-Cl， 用丙酮溶解并定容至100ml，臨用現配; 5% 硼酸鈉溶液： 稱取5 g硼酸鈉，用水溶解并定容至 100 ml，于4oC下保存。

樣品前處理。取去余氯后的水樣 1 ml于5 ml具塞試管中，加入200 μl硼酸鈉溶液，混勻，加入200 μl FMOC-Cl衍生液，混勻， 60oC烘箱放置2 h。過濾后液相串聯質譜測定。

液相色譜條件。Waters ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱，50 mm x 2.1 mm， 1.7μm;柱溫40℃;進樣量1.0μL;流速為0.3mL/min;流動相A為水溶液，流動相B為甲醇，梯度洗脫：0-1min，85%A;1-2min，85%A -15 %A;2-3min，15 %A;3-4min，15 %A -85 %A;4-5 min，85 %A。

質譜條件。電噴霧離子源;負離子掃描;毛細管電壓2.0 kV;離子源溫度150oC;去溶劑氣500oC;去溶劑氣流量（氮氣）800 L/h;氣簾氣流量50 L/h;多反應監測（MRM）模式檢測;草甘膦離子對為390>168、390>150，氨甲基膦酸離子對為332>110、332>136。

結果與討論

正負模式的選擇。草甘膦和氨甲基膦酸檢測的MRM監測模式可以選擇正負模式，但因為FMOC-Cl水解后生成的FMOC-OH也是采用正模式下監測，其對正模式監測產生干擾，而且草甘膦的氨基在衍生后生成酰胺鍵，削弱了結合質子的能力，導致其正模式檢出限高。因此，采用負模式監測效果更好。草甘膦的TIC圖如下所示。

線性范圍、檢出限、回收率、精密度。用草甘膦和氨甲基膦酸標準混合液配制成10ug/L、20ug/L、50ug/L、100ug/L、200ug/L的標準曲線液，按照上述方法衍生后液相串聯質譜儀測定。結果表明，草甘膦和氨甲基膦酸在質量濃度濃度范圍10ug/L～200ug/L內與其峰面積呈現良好的線性關系，其相關系數r均大于0.9995。檢出限一般以方法檢出限作為其檢出限，按照10倍信噪比作為其方法檢出限，計算其檢出限均小于1ug/L。選用經過測定不含有草甘膦和氨甲基膦酸的水質樣品，分成三組。三組樣品分別添加20ug/L、50ug/L、100ug/L低、中、高三個濃度，按照本方法進行添加回收率實驗，計算其回收率為86%～97%。平行測定以上三個濃度6次，計算其相對標準偏差RSD為1.5%～6.3%。

本方法采用FMOC-Cl衍生測定草甘膦和氨甲基膦酸，通過方法的優化，獲得良好的線性。