血清ASMase水平對非酒精性脂肪性肝病患者肝纖維化程度的預測價值

高峻 郭旭升 韓利杰

近年來非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)成為近年來患病增加最為明顯的疾病之一，其屬于一種獲得性代謝應激肝損傷。而NAFLD是導致肝纖維化的原因之一[1]。目前對于該疾病尚無特異的臨床診斷手段[2-3]。酸性鞘磷脂酶(acid sphingomyelinase，ASMase)是一種水解鞘磷脂產生酰胺的重要溶酶體酶，有研究指出其在NAFLD的表達水平明顯高于正常肝組織[4]，提示其可能成為NAFLD診斷的生物標志物。因此本文通過回顧性分析探討血清中ASMase水平對NAFLD患者肝纖維化程度的預測作用，現報道如下。

資料與方法

一、 一般資料

選取2015年1月至2018年6月間我院收治87例確診的非酒精性脂肪性肝病患者為研究對象，男性48例，女性39例，患者年齡32～65歲，平均(43.98±6.67)歲；其中男性身高162～187 cm，平均(173.39±6.42)cm，體重72～89 kg，平均(76.25±2.44)kg；女性身高155～178 cm，平均(163.25±4.49)cm，體重48～69 kg，平均(53.67±2.54)kg。

二、 納入排除標準

納入標準：(1)入選患者符合《非酒精性脂肪性肝病診療指南》[5]診斷標準；(2)患者熟知該課題研究，簽署知情同意書。排除標準：(1)因酒精、藥物、病毒、免疫等疾病引起的脂肪性肝病(2)甲狀腺急性病、庫欣綜合征患者；(3)存在肝腎功能不全或嚴重感染患者；(4)3個月內使用保護肝臟，或服用副作用能夠引起肝損傷藥物治療者；(5)凝血功能異常，有嚴重心血管疾病患者。

三、 指標分析

(一) 體質指數(BIM)檢測：由專人使用同一設備精確測量患者的身高、體質量，計算公式：BIM=體質量(kg)/身高2(m2)。

(二) 血清指標檢測 入選患者在接受穿刺檢測前3d于清晨空腹狀態抽取患者外周血4 mL于一次性采血管，室溫靜置30 min，3000 r·min-1離心8 min分離血清，-80℃保存，由專門人員管理并檢測患者血清中，采用全自動生化儀檢測血清中丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、 天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、谷氨酰轉肽酶(GGT)、堿性磷酸酶(ALP)水平。采用酶聯免疫吸附法檢測血清中酸性鞘磷脂酶(ASMase)水平，試劑盒購于上海北滬生物科技有限公司。

(三) 病理學檢測 所有入選患者住院后依照檢測要求進行肝臟穿刺超聲定位，簽署知情同意書，肝組織標本長度1.5～2.0 cm，會管區數量不小于6個，標本經10%多聚甲醛固定、石蠟包埋，制備成組織切片用HE、Masson和網織纖維染色，依據《非酒精性脂肪性肝病診療指南》肝組織病理學診斷標準，由兩位病理醫師分別進行，進行肝纖維化結果診斷；如結果不一致由病理科主任醫師進行結果確定。根據肝組織活檢結果將入選患者分為肝臟非顯著纖維組(S0～S2)和肝臟顯著纖維組(S3～S4)。

四、 統計學分析

結 果

一、不同肝纖維化階段患者一般資料分析

顯著肝纖維化患者的年齡、BMI指數明顯高于無顯著肝纖維化組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 不同肝纖維化階段患者一般資料分析(±s)

與非顯著肝纖維化組相比較：①P<0.001

二、 不同肝纖維化階段患者肝功能指標和血清ASMase水平分析

兩組患者血清中AST、GGT、ALP水平差異無統計學意義(P>0.05)，顯著肝纖維化組患者血清中ALT水平明顯高于非顯著肝纖維化，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同肝纖維化階段患者肝功能指標和血清ASMase水平分析(±s)

注：與非顯著肝纖維化組相比較：①P<0.001

三、顯著肝纖維化危險因素Logistic分析

以NAFLD肝纖維化為因變量，以上述單因素分析有統計學意義項年齡、BMI、ASMase、ALT為自變量，進行Logistic回歸分析，結果顯示上述指標均為顯著肝纖維化的危險因素，見表3。

表3 顯著肝纖維化危險因素Logistic分析

四、ROC曲線分析AMSase對NAFLD患者肝纖維化程度的預測研究

繪制NAFLD患者血清中AMSase相對表達水平值數據輸入SPSS.20軟件進行ROC曲線分析，根據輸出結果顯示AMSase最佳相對表達水平臨界值為88.090 nmol/L，靈敏度80.56%，特異性75.86%，AUC為0.820，見圖1。

圖1 ROC曲線分析

肝纖維化主要是肝星狀細胞(HSC)參與肝細胞的損傷修復過程中，大量活化后的細胞會轉化為肌成纖維細胞，導致肝纖維化[6]。ASMase是一種水解鞘磷脂產生酰胺的重要溶酶體酶[7]，能夠促進神經酰胺和磷脂酰膽堿生成，引起肝細胞的凋亡及囊性纖維化；也可以通過調節組蛋白酶B/D蛋白水解過程，促進HSC增殖加劇肝纖維化程度[8]，因此血清中ASMase水平可能成為NAFLD患者肝纖維化程度的診斷標志物。

本文依據NAFLD患者肝組織病理學診斷結果，將其分為肝臟非顯著纖維組和肝臟顯著纖維組。分析顯示，顯著肝纖維化組患者血清中AMSase水平明顯高于無顯著肝纖維化(P<0.05)。這可能與肝臟慢性損傷激活肝星狀細胞的活化及增殖有關，Haines等[9]研究也證實AMSase的高表達，能夠促進成肌纖維細胞的活化。Logistic結果顯示血清中AMSase水平是NAFLD患者肝纖維化的危險因素之一；ROC曲線分析顯示AUC值為0.82，靈敏度80.56%，特異性75.86%，表明NAFLD患者血清中AMSase水平能夠作為預測肝纖維程度指標。

綜上所述，血清中ASMase水平對非酒精性脂肪性肝病患者肝纖維化程度具有一定的預測價值，但對于該指標能否用于其他疾病引起的肝纖維化程度是否具有預測價值，是本文研究不足之處，也是值得后期繼續探討的研究方向。