不同品種高原夏菜中酶抑制法農藥殘留快速檢測試劑篩選

許愛霞，劉子斌，宋小龍，田 強，牟 龍

1.甘肅省干旱生境作物學重點實驗室，甘肅農業大學 農學院，甘肅 蘭州 730070；

2.定西市農產品質量安全監督管理站，甘肅 定西 743000

蔬菜中農藥殘留問題關系著我國農產品的質量安全，已成為影響我國人們群眾“舌尖上的安全”和市場秩序的重要因素之一[1]。常用定量檢測技術如氣相色譜、液相色譜等方法在實踐中存在檢測周期長、成本高、人員技術要求高等問題[2]，不適用于市場體系的監管。酶抑制法是一種基于有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶催化水解功能的抑制作用與農藥濃度成正相關的原理而研發的農藥殘留快速檢測方法[3]，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥[4]。因其成本低、簡便、快速、靈敏、經濟等特點，在目前我國農藥殘留快速檢測技術中應用最為廣泛，已成為國內外農藥殘留快速檢測的主流技術[5]，主要用于農貿集市、農產品批發市場、蔬菜生產基地、各大超市以及基層農產品質量安全監管機構等的農藥殘留檢測工作，是目前保證蔬菜產品安全性的有效措施之一[6]。盡管如此，此方法也存在一定的局限性，比如檢測試劑不同或因不同蔬菜品種基質效應的干擾等原因，在檢測時常有假陽性和假陰性現象出現[7]。因此，本試驗通過選用不同廠家農藥殘留快速檢測試劑進行對比試驗，用定量檢測進行結果驗證，篩選出適合不同品種高原夏菜農藥殘留快速檢測的試劑，提高農藥殘留快速檢測結果的準確性。

一、材料與方法

（一）試驗材料

以定西市高原夏菜主栽品種甘藍和菜花為供試材料，選用定西市例行抽檢過程中經常檢出或超出國家最高限量值的農藥（敵敵畏、三唑磷、丙溴磷和克百威），按各農藥推薦劑量在甘肅省定西市安定區內官鎮錦屏村、萬崖村和清溪村進行大田農藥定量噴灑試驗。

（二）田間試驗設計與方法

試驗設4個處理，重復3次，共12個小區，小區面積為60m2。處理1為甘藍空白對照、處理2為甘藍施藥處理、處理3為菜花空白對照、處理4為菜花施藥處理。

（三）施藥時間及樣品采集

待高原夏菜收獲前15d用噴霧器噴藥1次，分別距施藥1h、1d、3d、5d、7d、14d、21d進行采樣。

二、分析方法

（一）試劑選擇

選用石家莊諾亞威、海葒興、福州格林三種不同廠家的快速檢測試劑進行對比試驗。

（二）農殘快速檢測方法

1.樣品準備。用干布擦去蔬菜樣品表面泥土，剔除雜物后取樣。稱取切碎或剪碎至1cm2左右的樣本2.0g于三角瓶中，加入10ml振蕩1min或靜置3min，過濾或靜取上清液。

2.測試。空白對照：在小試管中先加入100l酶，再加入2.5mlpH8.0的緩沖液、100l顯色劑和100l底物，搖勻，迅速倒入比色杯中，用農殘速測儀進行測定。

樣本測試：在小試管中先加入100l酶，再加入2.5ml樣本提取液、100l顯色劑，混勻，10min后立即加入底物100l，搖勻，迅速倒入比色杯中，用農殘速測儀進行測定。

三、研究結果

（一）甘藍

1.空白對照處理（處理1）農藥殘留檢測結果。甘藍在沒有施用農藥的情況下，石家莊諾亞威、海葒興、福州格林三種不同廠家的快速檢測試劑快速檢測結果與定量檢測結果保持一致，均未超標。

2.施用農藥處理（處理2）的農藥殘留檢測結果。甘藍在施用不同農藥的情況下，只有福州格林的酶抑制率與定量檢測結果一致，石家莊諾亞威在5d的酶抑制率檢測結果與定量檢測結果不一致，海葒興2d、3d、5d的酶抑制率檢測結果與定量檢測結果不一致。因此，選用福州格林農殘快速檢測試劑檢測甘藍農藥殘留超標率時，受基質影響較小，相對準確，其次是石家莊諾亞威農殘快速檢測試劑，海葒興農殘快速檢測試劑假陰性現象嚴重（結果見表1）。

表1 甘藍施用推薦劑量農藥快速檢測結果

（二）菜花

1.空白對照處理（處理3）農藥殘留檢測結果。菜花在沒有施用農藥的情況下，石家莊諾亞威、海葒興、福州格林三種不同廠家的快速檢測試劑快速檢測結果與定量檢測結果保持一致，均未超標。

2.施用農藥處理（處理4）農藥殘留檢測結果。菜花在施用不同農藥的情況下，石家莊諾亞威的酶抑制率與定量檢測結果在21d的酶抑制率檢測結果與定量檢測結果不一致，其他天數均一致；福州格林和葒興試劑的酶抑制率與定量檢測一致性較差。因此，選用石家莊諾亞威農殘快速檢測試劑檢測菜花農藥殘留率相對準確，福州格林和海葒興農殘快速檢測試劑與定量檢測結果相比出現嚴重的假陰性現象，不推薦使用（結果見表2）。

表2 菜花施用農藥推薦劑量快速檢測

四、結論與討論

選用石家莊諾亞威、海葒興、福州格林三種不同廠家的農藥殘留快速檢測試劑進行高原夏菜甘藍和菜花中農藥殘留檢測比對試驗，結果表明：高原夏菜對不同農藥殘留快速檢測試劑的敏感程度不同，選用福州格林農殘快速檢測試劑檢測甘藍農藥殘留時，相對準確；選用石家莊諾亞威農殘快速檢測試劑檢測菜花農藥殘留時，結果較準確。而海葒興農藥殘留快速檢測試劑在這兩種蔬菜的農殘檢測過程中假陰性現象嚴重，可能是因為蔬菜中次生物質對酶抑制劑產生了干擾，或者是試劑本身固有的選擇性[6]，導致檢測結果專一性、準確性等出現問題，有待以后做進一步研究。為更好地對蔬菜中農藥殘留進行監測，在用酶抑制法進行農藥殘留檢測之前先進行適用性試驗，有選擇、有針對性的選擇不同的農藥殘留快速檢測試劑，爭取做到檢測結果的科學性、準確性和權威性。