梅毒螺旋體抗體血清學檢測方法

謝廣澍

廈門市集美區婦幼保健院 (福建廈門 361022)

梅毒是因梅毒螺旋體誘發的一種慢性感染性病癥，而梅毒螺旋體是經由性接觸與胎盤等方式傳播的，血清學檢測為梅毒診斷的依據之一[1]。因此，選擇靈敏度、特異度高的實驗室檢測方法對梅毒的診斷、治療有重要意義。本研究選擇幾種臨床常用的檢測方法，對其應用價值進行分析，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年1月至2017年12月568例門診患者作為研究對象，其中男319例，女249例。

1.2 試劑和儀器

酶聯免疫吸附試驗(ELISA)試劑盒、梅毒螺旋體抗體膠體金試劑、快速血漿反應素試驗(RPR)試劑盒、梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗(TPPA)試劑盒，以及愛康全自動酶免疫分析儀。

1.3 試驗方法

采用ELISA、金標法、RPR與TPPA對568例患者的568份血清樣本做梅毒螺旋體抗體檢測，患者均于清晨采集空腹靜脈血3 ml，3 000 r/min離心10 min，分離出血清，并按照試劑盒說明書在24 h內完成檢測。

1.4 臨床評價

(1)以TPPA作為檢測金標準，比較ELISA、金標法、RPR 3種方法的檢測靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值。(2)比較不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性標本復檢結果：依照ELISA的S/CO值大小 ，評價金標法 、RPR在不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性血清標本中的陽性率 。

2 結果

2.1 各檢測方法的檢測結果分析

與金標法、RPR比較，ELISA檢測梅毒螺旋體抗體的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均相對較高。見表1，表2。

表1 568例患者梅毒螺旋體抗體實驗室檢測結果分析(例)

表2 3種檢測方法的靈敏度、特異度、陽性預測值與陰性預測值比較(%)

2.2 不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性標本復檢結果

依照ELISA(41例陽性)的S/CO值大小 ，評價金標法 、RPR在不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性血清標本中的陽性率 ，結果顯示，金標法與RPR的弱陽性標本(即S/CO值為1～5)的陽性率低于S/CO值為6～10、>10的標本。見表3。

表3 不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性標本復檢結果[例(%)]

3 討論

梅毒是因感染梅毒螺旋體所致的一種性傳播疾病。人體在感染梅毒螺旋體4～10周時，血清中便會產生抗類脂抗原的非特異性抗體及抗梅毒螺旋體抗原的特異性抗體[2]。臨床將梅毒血清試驗大致分為非梅毒螺旋體抗原血清學試驗和梅毒螺旋體抗原血清學試驗兩種，前者是常規試驗方法，后者是確認試驗方法[3]。

在檢測抗類脂抗體的各種方法中，目前臨床多采用RPR與甲苯胺紅不加熱血清學試驗方法，對抗梅毒螺旋體抗體的主要檢測方法有梅毒螺旋體血球凝集試驗與TPPA方法，常被用于陽性標本的確診中。

ELISA是基于多年來梅毒螺旋體基因工程研制的一種血清學檢測方法，具體來說，是將基因重組表達的梅毒螺旋體抗原包被于微孔板上，繼而采取雙抗原夾心方法測定梅毒螺旋體特異性抗體，基因工程方法制備的重組抗原來代替傳統野生型梅毒螺旋體抗原，有較易純化的特點，因此能在很大程度上提高試驗結果的靈敏度、特異度[4]。

金標法檢測原理是基于免疫層分析的應用，實現對血漿、血清有無梅毒抗體的快速檢測，用該方法來檢測梅毒螺旋體抗體操作簡單且快速，無須使用特殊的設備，比較適合基層醫院開展[5]。因其特異度與靈敏度皆比ELISA低，所以應用存在一定的限制性。

RPR易發生生物學假陽性，目前一般作為篩選和定量試驗，觀察療效、復發及再感染。

TPPA雖作為梅毒螺旋體抗體檢測金標準，但其操作起來較為復雜，且試劑昂貴，結果判定較難實現自動化，這些因素都是限制其在大規模標本篩查中應用的關鍵[6]。ELISA并無以上缺點，不僅操作簡便，而且能實現自動化操作，在大批量樣本中也能應用檢測，并由儀器閱讀所得結果，保證結果的準確性、客觀性。

本研究結果顯示，與金標法、RPR比較，ELISA檢測梅毒螺旋體抗體的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值均相對較高；依照ELISA的S/CO值大小 ，評價金標法 、RPR在不同濃度梅毒螺旋體抗體陽性血清標本中的陽性率 ，結果顯示，金標法與RPR的弱陽性標本(即S/CO值為1～5)的陽性率低于S/CO值為6～10、>10的標本。所以不能將金標法與RPR作為確診試驗，僅能作為輔助試驗。

梅毒螺旋體血清學檢測需要考慮成本、適用性、易用性與樣本量等因素，為進一步提高臨床陽性檢出的準確度，建議采用兩種以上的方法進行檢測，為提高臨床可信度，陽性患者需再經TPPA復檢，并充分結合患者臨床癥狀做出最終的診斷[7]。

綜上所述，ELISA檢測梅毒螺旋體抗體的特異度、靈敏度均較高，臨床可通過多種方法的聯合使用，降低假陽性率。