一個規模豬場偽狂犬病血清學檢測與免疫程序評價

陳文志

（福建省漳州市詔安縣動物疫病預防控制中心，福建 漳州 363500）

豬偽狂犬病是由皰疹病毒引起的一種病毒性傳染病，是當前困擾、危害豬場的主要疾病之一，不僅可以進行水平傳播，也可通過胎盤、精液進行垂直傳播，也是引起呼吸道病綜合征的重要原發性病原之一[1]。豬只一旦感染可以長期帶毒，且有排毒散毒的風險[2]，防控難度大。該病目前尚無特效的治療方法，疫苗免疫是預防和控制豬偽狂犬病最為有效的措施之一。豬群進行血清流行病學調查檢測，是評價疫苗免疫效果及優化免疫程序的重要手段和掌握豬場是否有野毒存在情況，保證豬場豬群安全。

1 材料與方法

1.1 血清樣品來源

采集福建省詔安縣某規模豬場血清樣品325份送詔安縣動物疫病預防控制中心實驗室檢測，其中采集待售后備公豬83頭、種公豬22頭、后備母豬20頭、1～3胎及以上生產母豬80頭、30～35日齡仔豬20頭、40～45日齡仔豬20頭、50～55日齡仔豬20頭、60～70日齡小豬 20頭、90～100日齡肉豬 20頭、110～120日齡肉豬20頭。血樣采集后，靜置2 h，離心分離血清，-20℃凍存備用。該豬場使用豬偽狂犬病活疫苗（K-61株）免疫：種豬采用“一刀切”方式分別在每年3月份、6月份、9月份、12月份各免疫1次，每次2頭份/頭；商品豬出生當天滴鼻免疫1頭份/頭，小豬68日齡肌注免疫1頭份/頭，肥育豬105日齡肌注免疫1.5頭份/頭。

1.2 檢測試劑

豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測試劑盒都是美國IDEXX公司生產的。

1.3 檢測方法

采用ELISA方法檢測豬偽狂犬病gB、gE抗體，按照試劑盒說明書操作步驟進行試驗。結果判定：S/N值≤0.60判斷為陽性，S/N值＞0.60但≤0.70判斷為可疑，S/N值＞0.70判斷為陰性，可疑樣品重測。

2 檢測結果

不同階段豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測結果見表1。

表1 不同階段豬偽狂犬病gB、gE抗體檢測結果

2.1 豬偽狂犬病gB抗體檢測情況

后備公豬83份樣品gB抗體陽性率為92.77%；公豬、后備母豬、1胎、2胎、3胎及3胎以上母豬122份樣品，gB抗體陽性率均為100%。商品豬30～35、40～45日齡各20份樣品gB抗體陽性率均為95%，50～55日齡20份樣品gB抗體陽性率為85%，60～70日齡20份樣品gB抗體陽性率為65%，90～100日齡20份樣品gB抗體陽性率為90%，110～120日齡20份樣品gB抗體陽性率為75%。商品豬gB抗體陽性率隨日齡增長呈下降趨勢，如圖1。

圖1 商品豬gB抗體陽性率曲線

2.2 豬偽狂犬病gE抗體檢測情況

后備公豬83份樣品，gE抗體陽性率為3.61%；公豬22份樣品，gE抗體陽性率為4.55%；后備母豬、生產母豬1胎、2胎、3胎及3胎以上樣品各20份，gE抗體陽性率分別為10%、15%、45%、55%、65%。母豬gE抗體陽性率隨生產周期增長而逐步提高，如圖2。商品豬 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100、110～120日齡gE抗體陽性率分別為95%、65%、40%、35%、5%、20%，商品豬gE抗體陽性率隨日齡增長而呈逐漸下降趨勢，達到100日齡后稍有回升，如圖3。

圖2 母豬gE抗體陽性率曲線

圖3 商品豬gE抗體陽性率曲線

3 討論

（1）豬偽狂犬病gB屬于病毒的中和抗體，gB抗體既有疫苗免疫抗體，也可能有野毒感染抗體。對gB、gE抗體檢測結果進行分析，后備公豬、公豬、后備母豬gB抗體陽性率為92.77%以上，且gE抗體陽性率不超過10%，疫苗免疫對于gB抗體的產生起到主導作用；對于不同胎次的母豬雖然gB抗體陽性率均為100%，但母豬1胎、2胎、3胎及3胎以上gE抗體陽性率分別為15%、45%、55%、65%，野毒對gB抗體的產生不容忽視。

（2）趙雪麗等研究指出，要保證豬群不被野毒感染，豬群豬偽狂犬病免疫抗體平均合格率需長期維持高于90%[3]。后備公豬、公豬、后備母豬、生產母豬gB抗體陽性率均為92.77%以上，表明種豬采用“一刀切”方式每季度免疫1次、每次2頭份/頭的免疫程序是可行的。從圖1 gB抗體陽性率曲線圖可以看出，商品豬在 50～55、60～70、90～100、110～120 日齡gB抗體陽性率分別僅為85%、65%、90%、75%，表明該豬場分別在仔豬出生當天滴鼻免疫1.0頭份/頭、68日齡肌注免疫1.0頭份/頭、105日齡肌注免疫1.5頭份/頭的免疫程序不夠理想。建議將68日齡提前到45日齡肌注免疫1.5頭份/頭，105日齡肌注免疫1.5頭份/頭提高劑量至2.0頭份/頭[4]，適當調整免疫時間及免疫劑量，維持各日齡商品豬群免疫抗體較高水平，每年定期開展gB抗體檢測3～4次，發現gB抗體水平低下要及時補免，隨時優化免疫程序，提升免疫保護效力[5]。

（3）從圖2母豬gE抗體陽性率曲線圖可以看出，后備母豬、生產母豬gE抗體陽性率呈上升趨勢，表明種豬隨著生產周期增長，存在被野毒感染機會也在增加。該豬場業主已對gE抗體陽性的3頭后備公豬、1頭公豬、2頭后備母豬淘汰掉。要定期開展gE抗體監測（可與gB抗體檢測同步），有計劃地加速淘汰gE抗體陽性母豬，為今后凈化工作打好基礎。

（4）仔豬出生后哺乳母乳，獲得母源抗體，母源抗體中含有gB抗體，同時也可能有gE抗體。本次檢測該場商品豬 30～35、40～45、50～55、60～70、90～100 日齡gE抗體陽性率分別為95%、65%、40%、35%、5%，隨著日齡的增加，gE抗體陽性率逐漸下降直至5%，符合母源抗體消長規律[6]，這提示在前期gE抗體來自母源抗體的可能性更大[7]；110～120日齡gE抗體陽性率提升至20%，這表明部分豬只被野毒感染了，因此，必須提高豬群免疫抗體水平和豬場生物安全。

（5）落實生物安全措施，扎實做到“五個嚴格執行”。嚴格執行豬場內外人員進場消毒程序；嚴格執行一切車輛未經徹底消毒不得入場；嚴格執行引種制度，特別是引種前進行豬偽狂犬病gE抗體檢測，gE抗體陰性方可進場；嚴格執行場內環境定期消毒制度；嚴格執行消滅貓、老鼠、蒼蠅、蚊蟲等，防止病源傳播擴散。