冷霧化兩用機(jī)在病理石蠟組織切片中的應(yīng)用

陸海善　羅春英　黃永秩　趙志文

【關(guān)鍵詞】 病理切片;干燥;靜電;冷霧化機(jī)

中圖分類號：R361+2? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B? ?DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.06.018

在病理組織石蠟切片制作時，切片的質(zhì)量與切片時工作環(huán)境、溫度、濕度有直接關(guān)系;在冬季，空氣干燥，切片時容易產(chǎn)生靜電，導(dǎo)致切片困難和切下的組織薄片粘連或出現(xiàn)裂縫、皺褶、顫痕、攤片困難、切片速度慢等問題。此類現(xiàn)象直接影響切片質(zhì)量、鏡下觀察，造成診斷困難，影響工作效率。所以，在臨床病理制片過程中急需解決以上問題。我們通過使用組織切片冷霧化兩用機(jī)對蠟塊和周圍空氣進(jìn)行霧化加濕，期望通過該方法改善制片質(zhì)量，同時提高工作效率。

1 材料與方法

1.1 材料 搜集2018年8～12月間右江民族醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院病理科外檢標(biāo)本蠟塊100個，其中胃腸鏡活檢35個，腺樣囊性癌組織蠟塊25個，甲狀腺蠟塊15個，淋巴結(jié)組織蠟塊25個。所用器材：萊卡脫水機(jī)，LeicaRM2245型切片機(jī)，組織切片冷霧化兩用機(jī)（CA310，見圖1），珊頓MX35型刀片。

1.2 方法 選取100個蠟塊均經(jīng)過4%中性甲醛固定，在萊卡脫水機(jī)中經(jīng)過梯度乙醇脫水、二甲苯透明、石蠟浸泡、常規(guī)包埋[1]。蠟塊均使用同一臺切片機(jī)進(jìn)行切片，厚度均為3 μm;每一蠟塊切片2次，第1次切片時采用組織切片冷霧化兩用機(jī)進(jìn)行霧化處理，在切片過程中從始至終對蠟塊進(jìn)行冷凝及霧化，該組切片為霧化組;第2次切片時按照常規(guī)切片即不使用冷霧化兩用機(jī)處理，該組切片為對照組。整個操作過程均由同一經(jīng)驗豐富的技師操作。

1.3 病理組織切片質(zhì)量評價標(biāo)準(zhǔn) 在顯微鏡下觀察兩組病理組織切片的質(zhì)量，將病理組織切片分為優(yōu)質(zhì)片、良質(zhì)片和差質(zhì)片三個等級[2]。（1）優(yōu)質(zhì)片：編號清晰，薄厚適宜，無褶皺，色彩鮮亮，對比明確，易于觀察;（2）良質(zhì)片：編號清晰，有較少的褶皺，無污染及活氣泡， 色彩較為鮮亮，比較容易觀察;（3）差質(zhì)片：編號不清晰，有較多的褶皺或氣泡，顏色不清晰，對比不明顯，不易于觀察。優(yōu)良率= （優(yōu)質(zhì)片數(shù)+良質(zhì)片數(shù)） /總片數(shù)×100%。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 將本次研究的數(shù)據(jù)錄入到SPSS 20.0軟件中進(jìn)行處理，計數(shù)資料用%表示， 采用χ2檢驗，檢驗水準(zhǔn)：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2 結(jié)? 果

對照組切片時，用毛筆挑起切片時有靜電現(xiàn)象，由于靜電吸附，組織薄片容易粘連刀架和毛筆，不易挑起和分離（如圖2-A），切片困難，切完100個蠟塊用時130 min;霧化組切片時，用毛筆能輕松挑起組織片，靜電黏附現(xiàn)象消失（如圖2-B），切片放入水中容易展平，切完100個蠟塊用時100 min。

兩批石蠟切片均入自動染色機(jī)進(jìn)行染色，自動封片后，利用顯微鏡鏡下觀察組織，對照組有8張胃腸組織、6張腺樣囊性癌組織、4張甲狀腺組織、8張淋巴結(jié)組織切片出現(xiàn)裂隙或折疊（如圖3-A、B）;霧化組只有3張淋巴結(jié)組織、1張甲狀腺組織出現(xiàn)少許折疊，其余組織均平整無裂隙;霧化組切片優(yōu)良率明顯高于對照組（圖3-C、D），用時也少于對照組，工作質(zhì)量及效率高于對照組。兩組組織標(biāo)本優(yōu)良率比較見表1。

3 討? 論

切片是影響組織切片質(zhì)量的重要一步，其相關(guān)影響因素較多。首先，在寒冷的冬天，空氣干燥，濕度低，當(dāng)濕度小于40%時，切片容易出現(xiàn)靜電現(xiàn)象，用毛筆不易挑起切片，容易出現(xiàn)粘連、皺褶甚至裂隙現(xiàn)象，造成組織切片困難[3]。其次出于成本考慮，很多基層醫(yī)院病理科只能配備1～2臺組織脫水機(jī)，還不能做到組織的分類處理，為了保證多數(shù)組織的脫水質(zhì)量，難免有些小組織（如胃腸、鼻咽等組織）和部分類型的組織（如子宮內(nèi)膜、淋巴結(jié)等）脫水過度，出現(xiàn)組織過脆的現(xiàn)象，切片時容易出現(xiàn)裂隙折疊，影響制片質(zhì)量[4]。

針對以上問題，有些技術(shù)員在切片時采取冰塊涂抹或用冰水浸泡，或在切片過程中遇到較硬、脆的組織時，取下所戴口罩向蠟塊吹氣，或用戴著手套的手摸蠟塊，防止蠟塊冰冷過度，并以此增加蠟塊濕度。這些補(bǔ)救措施雖然在一定程度上解決問題，但其操作不規(guī)范，不能保證切片質(zhì)量的穩(wěn)定性，并且影響工作效率，拖延病理報告的發(fā)出時間。

我們應(yīng)用冷霧化兩用機(jī)來解決空氣干燥和靜電吸附問題，結(jié)果顯示效果好、操作簡單，切片質(zhì)量穩(wěn)定，工作效率明顯提高。冷霧化兩用機(jī)的工作原理是利用成熟的超聲波霧化技術(shù)為基礎(chǔ)，霧化、加濕蠟塊表面及周圍的空氣，能有效地消除切片的干燥和靜電，同時輔以制冷機(jī)進(jìn)行溫度調(diào)節(jié)，保持蠟塊的冷凍狀態(tài)。

冷霧化兩用機(jī)體積小，價格不貴，場地需求不高，而且能明顯提高工作效率，因此，我們認(rèn)為值得推廣使用。

參 考 文 獻(xiàn)

[1]? 王伯沄，李玉松，黃高升，等.病理學(xué)技術(shù)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：75-76.

[2]? 王德田，董建強(qiáng).實用現(xiàn)代病理學(xué)技術(shù)[M].北京：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)出版社，2012：76.

[3]? 付先利，吳建農(nóng).一種解決切片干燥的方法[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志，2013，29（7）： 807.

[4]? 楊 梅.免疫組化染色對病理技術(shù)質(zhì)量控制的影響分析[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2017，15（19）：72-73.

（收稿日期：2018-12-19 修回日期：2019-04-11）

（編輯：潘明志）