注射用蛋黃卵磷脂的制備工藝研究

胡承

南京威爾藥業(yè)股份有限公司 江蘇南京 210000

蛋黃卵磷脂是蛋黃中磷脂的總稱，主要含有磷脂酰膽堿（PC）、磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰肌醇（PI）、神經(jīng)鞘磷脂（SPM）等，此外還存在因制備工藝和儲(chǔ)存條件不當(dāng)導(dǎo)致的降解雜質(zhì)，如溶血磷脂酰膽堿（LPC）、溶血磷脂酰乙醇胺（LPE）等。

注射用蛋黃卵磷脂主要應(yīng)用于藥物制劑中脂肪乳的關(guān)鍵輔料，在脂肪乳制劑中起到乳化作用，其中注射用蛋黃卵磷脂的關(guān)鍵指標(biāo)包括有關(guān)物質(zhì)、過(guò)氧化值、游離脂肪酸等指標(biāo)，其質(zhì)量好壞直接影響脂肪乳制劑相關(guān)指標(biāo)[1]。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 試劑與儀器

蛋黃粉PL-30，食品級(jí)，北京華夏厚德生物科技有限公司；無(wú)水乙醇，分析純，南京化學(xué)試劑有限公司；丙酮，分析純，南京化學(xué)試劑有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)步驟

取計(jì)量的蛋黃粉投入到1L三口燒瓶中，按照一定比例加入無(wú)水乙醇，在一定溫度下進(jìn)行攪拌提取，過(guò)濾得濾液，濾液通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至一定比例得蛋黃卵磷脂粗品。

另取1L燒瓶加入過(guò)量的丙酮，開(kāi)啟攪拌，在冷阱中降溫，將蛋黃卵磷脂粗品滴加至丙酮中，繼續(xù)降溫至-18℃，攪拌1h，過(guò)濾得粉末狀固體。

將粉末狀固體轉(zhuǎn)至單口燒瓶中，在冰水浴中進(jìn)行減壓旋蒸干燥得成品。

2 結(jié)果與討論

2.1 乙醇提取比例和提取次數(shù)對(duì)含量和收率的影響

在乙醇提取時(shí)間為2小時(shí)，提取溫度為50℃的情況下，分別考察乙醇與蛋黃粉PL-30比例為5:1，7:1，10:1（V：W）時(shí)一次提取和二次提取對(duì)提取收率的影響，結(jié)果如下表所示：

乙醇：PL-30（V：W） PC含量 一次提取收率 二次提取收率5:1 83.90% 67.56% 82.90%7:1 80.12% 78.71% 95.91%10:1 78.79% 79.55% 96.34%

由上表可以看出，隨著溶劑用量的增大，PC含量逐漸降低，產(chǎn)品收率逐漸升高。當(dāng)乙醇與PL-30比例為7:1時(shí)，樣品的一次提取和二次提取的收率均較高，PC含量較高，和溶劑比例為10:1水平接近，但是考慮到后者溶劑用量較大，因此最終確定乙醇與PL-30的提取比例為7:1。

并且由上表可以看出，當(dāng)乙醇提取次數(shù)為兩次比乙醇提取次數(shù)為一次時(shí)收率均有約15個(gè)百分點(diǎn)的提升，二次提取能大大提升產(chǎn)品的收率，因此進(jìn)行二次提取。

2.2 乙醇提取溫度對(duì)收率和酸值的影響

在乙醇與PL-30的提取比例為7:1，提取次數(shù)為一次，提取時(shí)間為2小時(shí)的情況下，分別考察提取溫度為30、40、50、60℃時(shí)，對(duì)產(chǎn)品酸值和收率的影響，提取溫度（℃）分別為30、40、50、60時(shí)，酸值（mgKOH/g）分別為14．88、15．81、16．10、17．30，收率（%）分別為 76．0、82．8、86．0、86．7。

由數(shù)據(jù)可以看出，隨著提取溫度的上升產(chǎn)品的收率會(huì)隨之增加，但是不難發(fā)現(xiàn)，提取溫度為50℃和60℃時(shí)產(chǎn)品的收率相差不大；另一方面，隨著溫度的升高，產(chǎn)品的酸值也隨之升高，且當(dāng)溫度為60℃時(shí)，產(chǎn)品的酸值變化較大，因此最終選取提取溫度為50℃，此時(shí)的收率相對(duì)較高且酸值較低[2]。

2.3 乙醇與蛋黃卵磷脂粗品比例的確定

在上述確定的提取條件下，對(duì)PL-30提取，將提取液濃縮至含固量分別為86%、76%、71%、68%時(shí)，在丙酮溶液中進(jìn)行共沉淀，并進(jìn)行低溫干燥得成品，考察蛋黃卵磷脂粗品含固量對(duì)其外觀狀態(tài)的影響，含固量分別為86%、76%、71%、68%時(shí)，成品外觀呈現(xiàn)棕色塊狀、黃色塊狀、乳白色粉末、乳白色粉末。

從數(shù)據(jù)可以看出，隨著含固量的增大，成品由乳白色粉末變?yōu)辄S色塊狀，2015版《中國(guó)藥典》對(duì)蛋黃卵磷脂（供注射用）外觀要求為乳白色或蛋黃粉的粉末或塊狀，從上述結(jié)果可以看出當(dāng)含固量為71%產(chǎn)品外觀狀態(tài)較好，且乙醇?xì)埩糨^少。因此蛋黃卵磷脂粗品含固量定為71%[3]。

2.4 干燥時(shí)間的確定

將得到的蛋黃卵磷脂濾固，加入單口燒瓶中，在冰水浴中減壓干燥，考察干燥時(shí)間對(duì)溶劑殘留的影響。干燥時(shí)間3/6/9/12小時(shí)，乙醇?xì)埩簦?）分別為0．2525/0．2039/0．1953/0．1143丙酮?dú)埩簦?）分別為 0．0349/0．0078/0．0045/0．0031。

從數(shù)據(jù)可以看出，隨著干燥時(shí)間段增加，溶劑殘留逐漸降低，但是如果干燥時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，帶來(lái)能耗較大，當(dāng)干燥時(shí)間為9小時(shí)時(shí)，乙醇才能滿足中國(guó)藥典上對(duì)于蛋黃卵磷脂（供注射用）溶劑殘留的要求（乙醇、丙酮≤0．2%）。因此為了保證產(chǎn)品的溶劑殘留指標(biāo)合格，產(chǎn)品干燥時(shí)間至少要9小時(shí)。

3 結(jié)語(yǔ)

本工藝是通過(guò)乙醇提取食品級(jí)蛋黃粉PL-30，其中乙醇提取溶劑比例為7:1，提取次數(shù)兩次，提取溫度為50℃，再將提取液濃縮至含固量為71%的蛋黃卵磷脂粗品，通過(guò)丙酮共沉淀，低溫干燥，得到粉末或顆粒狀的蛋黃卵磷脂。其中產(chǎn)品酸值較低，工藝較為簡(jiǎn)單，且產(chǎn)品外觀形態(tài)較好，檢測(cè)指標(biāo)符合2015版《中國(guó)藥典》蛋黃卵磷脂（供注射用）標(biāo)準(zhǔn)。