牛布魯氏菌病快速檢測卡的應(yīng)用

郭兆衛(wèi) 丁宏 李文忠 楊科 普仕華 段琳琳 張書光*

(1，云南省德宏州動物疫病預(yù)防控制中心 678400；2，云南省盈江縣弄璋鎮(zhèn)李文忠奶牛場 678300；3，云南省隴川縣動物疫病預(yù)防控制中心 678700)

布魯氏菌病（簡稱布病）是由布魯氏菌感染引起的一種人畜共患疾病。患病豬、牛、羊等病畜是布病的主要傳染源，布魯氏菌可以通過破損的皮膚黏膜、消化道和呼吸道等途徑傳播。急性期病例以發(fā)熱、乏力、多汗、肌肉、關(guān)節(jié)疼痛和肝、脾、淋巴結(jié)腫大為主要表現(xiàn)[1]。慢性期病例多表現(xiàn)為關(guān)節(jié)損害等。布病是 《中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告》 (第96 號) 公布的二類動物疫病。

傳染源：羊為主要傳染源，其次為牛和豬，目前為止，尚未見到人傳染給人的病例。傳播途徑：病菌可通過消化道、呼吸道黏膜、皮膚黏膜、眼結(jié)膜和性器官黏膜而發(fā)生感染。主要傳播途徑：獸醫(yī)或牧民為病畜接生；養(yǎng)殖戶、屠戶、擠奶工、廚師、實驗室檢測人員及經(jīng)常接觸病畜的人員等均可受到感染（病菌易從接觸處的破損皮膚進(jìn)入人體，可由皮膚、黏膜感染細(xì)菌）；消化道感染途徑多是通過進(jìn)食染菌的生乳、乳制品和未煮沸病畜肉類。易感人群：所有人對布魯菌普遍易感。據(jù)報道，從 2011年 3～5月間，27 名學(xué)生和 1 名教師相繼確診感染布病，發(fā)病原因經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查確定為某大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院使用了患病山羊做動物實驗導(dǎo)致，該病畜實驗前未經(jīng)現(xiàn)場檢疫。目前我省對布魯氏菌病采用檢疫凈化措施，檢出的布魯氏菌病陽性動物全部無害化處理，并對同群畜進(jìn)行檢測排查。按照國家對撲殺動物補(bǔ)助標(biāo)準(zhǔn)：羊 500 元/只、肉牛 3000 元/頭、奶牛6000 元/頭、豬 800 元/頭，豬牛羊補(bǔ)償標(biāo)準(zhǔn)不高，如果引種時買到布魯氏菌病陽性動物，將給養(yǎng)殖戶帶來巨大損失。因此，建議在養(yǎng)殖場引種時購買布魯氏菌病快速檢測卡進(jìn)行檢測后再行引種。

1 材料與方法

1.1 材料

牛，真空采血管，止血鉗，記號筆，采樣登記表，酒精棉球，平板，牛血清，虎紅平板凝集實驗抗原（中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所）等，布魯氏菌病快速檢測卡（韓國安捷）。

1.2 使用真空采血管采集牛血

使用真空采血管（普通生化管）采集牛靜脈血2～5ml（牛180 份），4℃冰箱過夜保存，析出血清后取上清保存于1.5ml 離心管中，編號為B1-B180，-20℃保存待檢，同時將血清背景信息填寫在采樣登記表上。

1.3 虎紅平板凝集實驗

180 份待檢牛血清和布魯氏菌病陰、陽性血清解凍后，使用虎紅平板凝集實驗進(jìn)行檢測，并記錄檢測結(jié)果等。

1.4 布魯氏菌病快速檢測卡

將分離到的血清和布病陰、陽性血清使用布魯氏菌病快速檢測卡進(jìn)行檢測，記錄檢測結(jié)果。

2 實驗結(jié)果

參見附表。

附表 動物血清的虎紅平板凝集實驗和快速檢測卡檢測結(jié)果

3 討論

布魯氏菌病的檢測采用虎紅平板凝集實驗，需要采血、標(biāo)記動物、分離血清、虎紅平板凝集實驗等步驟，耗費時間和人力。目前市場上出現(xiàn)的布魯氏菌病快速檢測卡種類越來越多，使用方便快捷，價格比虎紅平板凝集實驗略高，但快速檢測卡省去分離血清的時間，10min 內(nèi)可以出檢測結(jié)果，因此未，來快速檢測卡很可能用于引種前快速檢疫[2]。實驗結(jié)果表明，在有限的樣本量里，虎紅平板凝集實驗和布魯氏菌病快速檢測卡檢測結(jié)果完全一致。因此，建議在養(yǎng)殖場引種時先使用布魯氏菌病快速檢測卡進(jìn)行檢測后再行引種。