自體疣包埋療法聯合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的療效分析

黃邦高 徐智慧 王彥彬 諸靖宇 李軍華

尖銳濕疣是由人乳頭瘤病毒（HPV）感染引起的一種常見的性傳播疾病。近年來，我國尖銳濕疣發病率逐年升高，占性傳播疾病的第3位[1]。自體疣包埋療法是一種免疫療法，通過自體疣包埋使疣體與機體免疫系統接觸，激發機體針對HPV的細胞免疫反應，有利于機體打破對HPV的免疫耐受，降低尖銳濕疣復發率。光動力療法是通過光敏劑特異性地積聚在病變組織，并結合相應波長的激光照射來激發光敏劑的光化學反應，產生多種活性氧，選擇性地殺傷生物細胞而達到治療目的。本研究對3組外陰部尖銳濕疣患者分別采用自體疣包埋療法聯合鹽酸氨基酮戊酸光動力療法（ALA-PDT）、單純自體疣包埋療法、單純ALA-PDT治療，觀察并比較3組患者免疫系統變化及臨床療效，現將結果報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取90例會陰部尖銳濕疣患者為研究對象，其中杭州市第三人民醫院70例，浙江省人民醫院20例。納入標準：（1）皮損原發于會陰部皮膚；（2）經HPV-DNA 檢測為尖銳濕疣；（3）無淋巴結轉移；（4）簽署知情同意書。排除有嚴重光過敏反應者。將90例患者按抽簽法隨機分成3組，每組30例，分別采用自體疣包埋療法聯合ALA-PDT（A組）、單純自體疣包埋療法（B組）、單純ALA-PDT（C組）治療。本研究經醫院醫學倫理委員會審批通過。

1.2 方法

1.2.1 主要材料及設備 0.25%氯霉素溶液（0.25g氯霉素針劑溶于100ml 0.9%氯化鈉溶液），外用ALA（118mg/瓶，上海復旦張江生物醫藥股份有限公司）；XD-635AB型光動力激光治療儀（桂林市興達光電醫藥器械有限公司）。

1.2.2 自體疣包埋療法 患者新鮮疣體常規消毒、局麻，使用蚊式鉗夾住疣體基底部，手術刀切取約米粒大小的濕疣組織1個，壓迫止血。將分離的濕疣組織浸泡在0.25%氯霉素溶液中備用。患者左上臂三角肌區常規消毒、局麻，使用手術刀縱向切開皮膚1cm左右，深達淺筋膜。將浸泡在0.25%氯霉素溶液中的濕疣組織取出，用0.9%氯化鈉溶液沖洗后，小心置入切口，埋置于皮下組織，注意勿觸及上皮。縫合皮膚切口，局部用無菌紗布包扎。予抗生素口服3d，術后10d拆線。

1.2.3 ALA-PDT 使用滅菌0.9%氯化鈉溶液清洗皮損部位，新鮮配制的20%ALA均勻涂在皮損部位及其周圍2cm皮膚，塑料薄膜封包3h，使用波長為635nm的光動力激光治療儀照射，選擇最大輸出功率150mW，根據光斑大小及照射時間計算激光照射總能量，使其達60～100J/cm2。7～10d重復治療1次，共治療5次。

1.2.4 觀察指標 （1）治療前及治療1、3、6個月時外周血T淋巴細胞亞群（CD4+、CD8+T淋巴細胞）及血清免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM）水平，計算 CD4+/CD8+。（2）治療后6個月HPV復發率：采用局部皮損HPV-DNA檢測及光敏試驗檢查復發情況。

1.3 統計學處理 應用SPSS 13.0統計軟件。計量資料用表示，兩組比較采用兩獨立樣本t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 尖銳濕疣患者外周血T淋巴細胞亞群及血清免疫球蛋白水平與正常參考值比較 90例外陰部尖銳濕疣患者外周血CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+以及血清 IgG、IgA、IgM 水平分別為（30.86±5.42）%、1.12±0.21和（7.53±0.82）、（1.17±0.32）、（0.97±0.38）g/L，均低于正常參考值；CD8+T淋巴細胞百分比為（35.26±5.51）%，高于正常參考值。

2.2 3組患者治療前后外周血T淋巴細胞亞群及血清免疫球蛋白水平變化 與治療前比較，治療后1、3、6個月時3組患者外周血CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均明顯升高，CD8+T淋巴細胞百分比明顯下降，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。A組患者治療后1、3、6個月CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平均高于B、C組，CD8+T淋巴細胞百分比均低于B、C組，差異均有統計學意義（均P＜0.05）；B組患者治療后1、3、6個月外周血CD4+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA水平均高于C組，差異均有統計學意義（均P＜0.05），見表 1。

表1 3組患者治療前后外周血T淋巴細胞亞群及血清免疫球蛋白水平變化

2.3 3組患者治療后6個月HPV復發率比較 經治療后，所有患者去除疣體。A組患者治療后6個月HPV復發率為0，低于B組的10.0%和C組的16.7%，差異均有統計學意義（均P＜0.05）。

3 討論

尖銳濕疣是臨床上常見的性傳播疾病，具有傳染性強、復發率高等特點[2]。加上患者感染HPV后，機體免疫功能出現紊亂，會導致尖銳濕疣的病情延長，增加治愈難度[3]。因此，選擇合適的治療方法具有重要意義。自體疣包埋療法是一種主動免疫療法，將含有大量HPV顆粒的疣組織移植于患者皮下組織，疣體分解后，緩慢釋放大量HPV抗原，刺激機體產生針對HPV的特異性免疫反應，增強患者的免疫功能[4]。Usman等[5]從血清免疫球蛋白水平及T淋巴細胞計數等方面進行評價，發現自體疣包埋療法能增強尖銳濕疣患者的機體細胞免疫及體液免疫功能。ALA-PDT是一種安全、有效的新型治療方法。外源性ALA能被疣體及周圍受HPV感染的組織選擇性地吸收，經特定波長紅光照射后發生光敏反應，產生活性氧而殺死受感染的細胞，對周圍正常組織損傷輕微[6]。此外，ALA-PDT對尖銳濕疣的效果也可能與誘導機體局部產生免疫反應有關[7-8]。

相關研究表明，尖銳濕疣患者機體細胞免疫及體液免疫功能受到抑制[9-10]。而CD4+T淋巴細胞計數、CD4+/CD8+及免疫球蛋白是衡量細胞免疫及體液免疫功能的主要指標。本研究采用3種療法治療外陰部尖銳濕疣，觀察并比較3組患者治療前后外周血CD4+T淋巴細胞百分比、CD8+T淋巴細胞百分比、CD4+/CD8+以及血清IgG、IgA、IgM水平，結果顯示自體疣包埋療法聯合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的患者，其細胞免疫及體液免疫功能較單純自體疣包埋療法及單純ALA-PDT治療的患者均明顯增強；且單純自體疣包埋療法的療效優于單純ALA-PDT。進一步比較術后6個月HPV復發率，結果顯示自體疣包埋療法聯合ALAPDT治療組明顯低于其他兩組。這說明自體疣包埋療法聯合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣能提高患者機體細胞免疫及體液免疫功能，并降低HPV復發率，其療效優于單一療法。

綜上所述，自體疣包埋療法聯合ALA-PDT治療外陰部尖銳濕疣的療效明顯，能增強患者機體免疫功能，降低HPV復發率，可作為臨床上治療外陰部尖銳濕疣的首選方案。