徐良 劉堯 林駿

【摘要】 目的:分析通過基因克隆表達(dá)的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原在臨床診斷中的應(yīng)用價(jià)值及意義。方法:收集1型糖尿病臨床樣本50例,將其設(shè)置為1型組,另收集2型糖尿病臨床樣本50例,將其設(shè)置為2型組。對(duì)1型組和2型組分別實(shí)施常規(guī)指標(biāo)檢查及鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢查,分析診斷效果。結(jié)果:1型組和2型組的血常規(guī)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),利用鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原診斷1型組和2型組樣本的陽性率分別為62%和16%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:通過應(yīng)用基因克隆表達(dá)的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原對(duì)糖尿病臨床樣本實(shí)施診斷,可更好地鑒別1型和2型,有較高應(yīng)用價(jià)值,達(dá)到預(yù)期效果。
【關(guān)鍵詞】 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原; 糖尿病; 臨床診斷
doi:10.14033/j.cnki.cfmr.2019.02.026 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B 文章編號(hào) 1674-6805(2019)02-00-02
糖尿病是臨床較常見的疾病,主要分為1型和2型,其治療方法并不相同。若沒有較為準(zhǔn)確的診斷,則無法起到較好的治療效果[1]。但需要注意的是,兩種類型的糖尿病從臨床癥狀和血常規(guī)結(jié)果上看差異并不顯著,因此對(duì)其實(shí)施精準(zhǔn)診斷變得非常重要。本研究分析了通過基因克隆表達(dá)的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原在糖尿病鑒別診斷中的臨床應(yīng)用情況,具體報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
研究對(duì)象為筆者所在醫(yī)院收集的1型糖尿病臨床樣本50例,將其設(shè)置為1型組。其中男28例,女22例,年齡39~56歲,平均(47.5±8.5)歲,臨床需使用胰島素治療,未發(fā)生腫瘤和嚴(yán)重臟器功能障礙等嚴(yán)重并發(fā)癥。另收集同期的2型糖尿病臨床樣本50例,將其設(shè)置為2型組,其中男27例,女23例,年齡41~58歲,平均(49.5±8.5)歲,2型組患者均未出現(xiàn)酮癥或酮癥酸中毒情況,未發(fā)生嚴(yán)重臟器功能障礙或惡性腫瘤等疾病。對(duì)兩組患者一般資料分析后顯示,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 常規(guī)診斷 首先對(duì)所有患者均實(shí)施血生化診斷,檢測(cè)臨床樣本均為患者空腹血清樣本,檢測(cè)過程使用貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(蘇州)有限公司生產(chǎn)的葡萄糖測(cè)定試劑盒,儀器為貝克曼庫(kù)爾特實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(蘇州)有限公司生產(chǎn)的AU680全自動(dòng)生化分析儀,對(duì)臨床樣本進(jìn)行葡萄糖(GLU)檢測(cè)。同時(shí),輔助檢測(cè)包括總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白(HDL-C)等項(xiàng)目。在檢測(cè)過程中嚴(yán)格按照試劑盒說明書中的要求進(jìn)行試驗(yàn)。在常規(guī)診斷后,統(tǒng)計(jì)對(duì)比試驗(yàn)結(jié)果。
1.2.2 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè) 同時(shí)對(duì)兩組臨床樣本進(jìn)行鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè)。首先空腹抽取其肘靜脈血,量為3~5 ml,
3 000 r/min離心20 min,收集血清,血清樣本保存在-80 ℃的冰箱中。另外,利用實(shí)驗(yàn)室經(jīng)基因克隆表達(dá)的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原包被膜條,應(yīng)用免疫印跡法,制備鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè)試劑(免疫印跡法),同時(shí)制定該試劑的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。在試驗(yàn)過程中,嚴(yán)格按照該試劑標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的步驟進(jìn)行操作,分析臨床樣本中鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8自身免疫抗體陽性情況。
1.3 觀察指標(biāo)
需對(duì)兩組臨床樣本的GLU、TC、TG、HDL-C進(jìn)行對(duì)比分析。同時(shí)對(duì)血常規(guī)診斷及鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè)診斷1型和2型糖尿病的診斷陽性率進(jìn)行分析。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
使用SPSS 20.0軟件分析數(shù)據(jù),計(jì)量資料以(x±s)表示,采用t檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用字2檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
2.1 不同糖尿病類型臨床樣本的GLU、TC、TG、HDL-C對(duì)比
1型組和2型組的血生化檢測(cè)結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),見表1。
2.2 鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè)不同糖尿病類型陽性率
常規(guī)診斷后,用鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原診斷,1型組和2型組樣本的陽性率分別為62%和16%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表2。
3 討論
由于諸多因素的影響,當(dāng)前我國(guó)糖尿病患者數(shù)量呈現(xiàn)出不斷上升的趨勢(shì),并且也對(duì)我國(guó)人民的身體健康造成了越來越嚴(yán)重的危害[2]。對(duì)于糖尿病而言,其一般被分為1型和2型,兩種類型的糖尿病均會(huì)導(dǎo)致患者出現(xiàn)典型癥狀,并且也會(huì)對(duì)其造成較為嚴(yán)重的影響。因此對(duì)1型和2型糖尿病患者實(shí)施有效的鑒別診斷非常重要。
1型和2型糖尿病的主要特征也并不相同,1型糖尿病是由于免疫功能紊亂,對(duì)胰島中分泌胰島素的β細(xì)胞進(jìn)行破壞而導(dǎo)致發(fā)病的一類疾病[3-4]。而2型糖尿病僅會(huì)對(duì)胰島素的生理功能造成影響。對(duì)于這類患者而言,其胰島素分泌量并未出現(xiàn)減少,甚至可能增高。但由于胰島素生理功能受到了影響,在臨床發(fā)病時(shí)會(huì)出現(xiàn)糖尿病的相關(guān)癥狀。
正是因?yàn)閮煞N不同類型糖尿病的特點(diǎn),在臨床治療時(shí)的治療方法也并不相同。若在治療前沒有對(duì)兩種類型糖尿病患者起到準(zhǔn)確的診斷效果,則可能無法取得較好治療效果,甚至?xí)?duì)其身體造成更加嚴(yán)重的影響[5-6]。因此鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原檢測(cè)開始得到了較多關(guān)注。
當(dāng)前已經(jīng)證實(shí),在1型糖尿病患者體內(nèi)其自身抗原主要為胰島素、鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白以及IA-2等。尤其是鋅在胰島β細(xì)胞中的含量是最高的,其包括了6個(gè)胰島素及2個(gè)鋅離子結(jié)合的六聚物,主要存在形式為鋅胰島素結(jié)晶[7]。而鋅離子和糖尿病的發(fā)生也有著較為典型的關(guān)系。在這樣的前提下,通過檢測(cè)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體則能夠取得較好診斷效果。在一些研究中顯示,鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原定位在胰島β細(xì)胞分泌囊膜上,可刺激胰島素的分泌,并會(huì)造成電壓敏感性鈣離子通道的開放,也會(huì)導(dǎo)致鈣離子含量的提升[8-10]。因此,通過檢測(cè)鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體能夠?qū)?型和2型糖尿病患者起到較好的鑒別診斷效果。
本研究也顯示,1型和2型糖尿病患者的血常規(guī)結(jié)果比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,如不結(jié)合其他臨床指標(biāo),難以區(qū)分1型和2型,且會(huì)存在1型糖尿病樣本誤判為2型的結(jié)果,這說明若使用常規(guī)診斷方法無法起到較好鑒別診斷效果。而使用鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體檢測(cè)后,1型組和2型組樣本的陽性率分別為62%和16%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
綜上所述,在對(duì)不同類型糖尿病患者實(shí)施臨床診斷時(shí),通過基因克隆表達(dá)的鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗原,通過某種方法(如免疫印跡法)應(yīng)用到臨床檢測(cè),可取得較好臨床診斷效果,有較高使用價(jià)值。
參考文獻(xiàn)
[1]趙鴻斌,祁潔,孫曉慧,等.鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8在1型糖尿病診斷中的敏感性和特異性研究[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2018,15(4):463-466.
[2]錢莉,楊濤,陳小羅,等.鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8自身抗體對(duì)1型糖尿病診斷價(jià)值及其與HLA-A基因的關(guān)系[J].南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2017,37(10):1297-1301.
[3] Mbanya A,Ngandeu A,Kamwa V,et al.Metabolic features associated with positivity to ZnT8 autoantibody in sub-Saharan African young-onset diabetes patients[J].Diabetes & Metabolism,2016,42(3):204-206.
[4] Fichna M,Rogowicz-Frontczak A,?urawek M,et al.Positive autoantibodies to ZnT8 indicate elevated risk for additional autoimmune conditions in patients with Addison's disease[J].Endocrine,2016,53(1):249-257.
[5]寧翠利,吳孟水,劉寬芝.鋅轉(zhuǎn)運(yùn)體8及其自身抗體與糖尿病[J].河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2017,38(3):363-366.
[6]周暉,李正康,徐曉明,等.胰島自身抗體和生化指標(biāo)在糖尿病分型診斷中的應(yīng)用價(jià)值[J].重慶醫(yī)學(xué),2016,45(21):2909-2913.
[7] Wan H,Merriman C,Atkinson M A,et al.Proteoliposome-based full-length ZnT8 self-antigen for type 1 diabetes diagnosis on a plasmonic platform[J].Proc Natl Acad Sci USA,2017,114(38):10196.
[8]張翼鴻,徐明艷,孫巍,等.鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白8抗體對(duì)1型糖尿病的診斷意義[J].中國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)管理,2016,7(14):148-149.
[9] Faccinetti N I,Rovitto B D,Guerra L L,et al.Detección y caracterización de autoanticuerpos anti-ZnT8 en pacientes argentinos con diabetes mellitus tipo 1[J].Revista Argentina De Endocrinología Y Metabolismo,2016,53(3):77-83.
[10]馮曉燕,宋曉國(guó),王國(guó)華,等.人ZnT8抗原在1型糖尿病診斷中的初步應(yīng)用[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2011,15(1):102-106.