實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)妊娠晚期GBS感染的臨床價(jià)值分析△

蕭君明 尹青霞 黃婉婷

(中山市橫欄醫(yī)院檢驗(yàn)科 中山 528478)

B型鏈球菌(GBS)為條件致病菌，寄生在機(jī)體泌尿生殖道與下消化道，是新生兒與孕產(chǎn)婦感染的主要細(xì)菌之一[1]。孕婦感染GBS后易出現(xiàn)宮內(nèi)感染、胎膜早破等，經(jīng)垂直傳播引起新生兒腦膜炎、敗血癥等，危害性極大。細(xì)菌培養(yǎng)法是診斷GBS的金標(biāo)準(zhǔn)，因孕婦生殖道中存在多種細(xì)菌，培養(yǎng)基會(huì)抑制GBS生長(zhǎng)，易出現(xiàn)漏診，且耗時(shí)長(zhǎng)，易貽誤治療時(shí)機(jī)[2]。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)具有敏感度高、檢測(cè)時(shí)間短等優(yōu)勢(shì)，可快速、準(zhǔn)確的獲得GBS結(jié)果，逐漸被應(yīng)用于GBS篩查中。本研究旨在分析實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)妊娠晚期GBS感染的臨床價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2018年1月～12月在我院產(chǎn)檢的200例單胎初產(chǎn)婦，年齡23～38歲，平均年齡(32.21±2.21)歲；孕周35～37周，平均孕周(36.01±0.22)周。納入標(biāo)準(zhǔn)：取樣本前未接受局部或全身使用抗生素，并未使用過(guò)洗液與過(guò)栓劑；無(wú)妊娠合并甲狀腺疾病或糖尿??；簽署知情同意書；心、腎等重要器官正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：陰道分泌物涂片太少或太厚，染色、固定不良；合并滴蟲性陰道炎、外陰陰道假絲酵母菌病、衣原體感染、粘液濃性宮頸炎等其他陰道感染。

1.2 方法

先將外陰分泌物擦去，用無(wú)菌窺器將陰道暴露，將無(wú)菌拭子插入陰道下1/3處，旋轉(zhuǎn)1周采集陰道分泌物，取2份樣本。將陰道拭子接種血瓊脂平皿，并在35℃、10%CO2環(huán)境下孵育24～48h。使用普通細(xì)菌培養(yǎng)法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書實(shí)施操作。陰道分泌物中有一項(xiàng)檢出GBS即為攜帶者。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)記錄入組孕婦GBS攜帶情況；(2)分析細(xì)菌培養(yǎng)法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS陽(yáng)性率；(3)觀察GBS陽(yáng)性與陰性者母嬰妊娠結(jié)局。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件，n(%)表示計(jì)數(shù)資料，行χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 孕婦GBS攜帶情況

200例孕婦GBS攜帶率為10.50%(21/200)。

2.2 細(xì)菌培養(yǎng)法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS陽(yáng)性率

實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS陽(yáng)性率明顯高于細(xì)菌培養(yǎng)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 細(xì)菌培養(yǎng)法與實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS攜帶情況對(duì)比[n(%)]

檢測(cè)方式例數(shù)陽(yáng)性陰性細(xì)菌培養(yǎng)法2008(4.00)192(96.00)實(shí)時(shí)熒光定量PCR法20021(10.50)179(89.50)χ26.283P0.012

2.3 妊娠結(jié)局

2.3.1孕婦不良妊娠發(fā)生情況

GBS陽(yáng)性組孕婦不良妊娠總發(fā)生率高于GBS陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表2。

表2 GBS陽(yáng)性組與陰性組產(chǎn)婦不良妊娠對(duì)比[n(%)]

組別胎兒窘迫宮內(nèi)感染早產(chǎn)胎膜早破產(chǎn)后出血合計(jì)GBS陽(yáng)性組(n=21)2(9.52)3(14.29)2(9.52)3(14.29)2(9.52)12(57.14)GBS陰性組(n=179)10(5.59)6(3.35)6(3.35)9(5.03)7(3.91)38(21.23)χ20.0542.9940.6041.4510.38112.929P0.4720.0840.4370.2280.5370.000

2.3.2新生兒出生情況

GBS陽(yáng)性組新生兒不良結(jié)局發(fā)生率高于GBS陰性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見(jiàn)表3。

表3 GBS陽(yáng)性組與陰性組新生兒出生情況對(duì)比[n(%)]

組別新生兒窒息新生兒感染新生兒低體質(zhì)量肺炎合計(jì)GBS陽(yáng)性組(n=21)1(4.77)3(14.29)3(14.29)2(9.52)9(42.86)GBS陰性組(n=179)2(1.12)8(4.47)6(3.35)7(3.91)23(12.85)χ21.6901.8522.9940.38110.459P0.1940.1740.0840.5370.001

3 討論

妊娠期體內(nèi)孕激素與雌激素水平升高、陰道pH值改變、糖原含量增加、免疫功能低下等會(huì)誘發(fā)陰道菌群失調(diào)，增加GBS繁殖風(fēng)險(xiǎn)[3]。GBS是一種革蘭陽(yáng)性兼性厭氧球菌，正常部位生長(zhǎng)的GBS可逆行至胎盤，經(jīng)炎癥細(xì)胞吞噬作用分泌蛋白水解酶，降解胎膜蛋白，侵襲胎膜，誘發(fā)胎膜早破，并可經(jīng)母嬰垂直傳播，引起陰道感染、子宮內(nèi)感染等[4～5]。本研究中，GBS陽(yáng)性組孕婦不良妊娠總發(fā)生率、新生兒不良結(jié)局發(fā)生率高于GBS陰性組，提示GBS感染會(huì)增加母嬰不良妊娠結(jié)局的發(fā)生。因此，早期準(zhǔn)確診斷，指導(dǎo)臨床實(shí)施干預(yù)措施意義重大。

細(xì)菌培養(yǎng)法是臨床篩查GBS的常用手段，但其具有敏感度差、耗時(shí)長(zhǎng)、干擾多、陽(yáng)性率低、重復(fù)性差等優(yōu)缺點(diǎn)，臨床應(yīng)用受到一定的限制。本研究中，200例孕婦GBS攜帶率為10.50%(21/200)，實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)GBS陽(yáng)性率明顯高于細(xì)菌培養(yǎng)法，提示實(shí)時(shí)熒光定量PCR可有效檢測(cè)GBS感染，利于臨床早期實(shí)施措施干預(yù)，提高母嬰結(jié)局。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)具有敏感度高、準(zhǔn)確度高等優(yōu)勢(shì)，可在10～100min內(nèi)獲得檢測(cè)結(jié)果，可動(dòng)態(tài)反映病毒突變、復(fù)制情況，預(yù)測(cè)抗病毒治療效果，與傳統(tǒng)PCR檢測(cè)相比，無(wú)需通過(guò)PCR后處理，操作簡(jiǎn)單便捷，可避免人為判斷，結(jié)果更客觀[6]。

綜上所述，妊娠晚期GBS感染會(huì)增加宮內(nèi)感染、胎膜早破、新生兒感染等不良結(jié)局的發(fā)生，實(shí)時(shí)熒光定量PCR可快速準(zhǔn)確篩查GBS，指導(dǎo)臨床早期預(yù)防性使用抗生素治療，對(duì)改善母嬰分娩結(jié)局起到關(guān)鍵性作用。