普洱茶對(duì)膳食誘導(dǎo)肥胖大鼠降低體質(zhì)量及調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的作用

馮 偉，王雪青,*，陳 沛，安文文，張超英，李生英，燕 強(qiáng)，王鵬基，白曉麗，李長(zhǎng)文

（1.天津商業(yè)大學(xué)生物技術(shù)與食品科學(xué)學(xué)院，天津市食品與生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300134；2.云南天士力帝泊洱生物茶集團(tuán)有限公司，云南 普洱 665100）

普洱茶是以云南產(chǎn)大葉種曬青毛茶為原料，經(jīng)后發(fā)酵生產(chǎn)的一種散茶或緊壓茶。普洱茶可以用來(lái)預(yù)防一些慢性疾病，如肥胖[1-3]、糖尿病[4-5]、血脂異常[6-7]、缺血性心臟病[8-10]和癌癥[10-11]。這些嚴(yán)重威脅人體健康的慢性病與肥胖密切相關(guān)。因此，控制體質(zhì)量可以降低人類患慢性疾病的風(fēng)險(xiǎn)，改善生活質(zhì)量。當(dāng)能量攝入大于消耗時(shí)，多余的脂肪會(huì)堆積在脂肪細(xì)胞中，使脂肪細(xì)胞膨脹變大，引發(fā)肥胖癥。因此，脂肪組織歷來(lái)被認(rèn)為是巨大的能量?jī)?chǔ)存器官。然而，脂肪組織更像是一個(gè)分泌器官，當(dāng)通過(guò)自分泌、旁分泌和內(nèi)分泌系統(tǒng)與其他細(xì)胞相互作用時(shí)，脂肪組織會(huì)分泌許多細(xì)胞因子，包括腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、抵抗素、白細(xì)胞介素（interleukin，IL）-1、脂聯(lián)素和瘦素[12-13]。同時(shí)，在免疫反應(yīng)、生長(zhǎng)、細(xì)胞分化和凋亡的生理過(guò)程中，脂肪組織也可分泌這些因子。許多研究表明，肥胖是一種促炎癥狀態(tài)，并且涉及抗炎性脂肪因子（如脂聯(lián)素）的減少和促炎性細(xì)胞因子水平（例如IL-1）的增加[14]。進(jìn)一步的證據(jù)表明，一些慢性疾病常常引起體內(nèi)細(xì)胞因子水平的變化[15-17]。因此，從天然植物中攝取一些具有調(diào)節(jié)細(xì)胞因子作用的活性物質(zhì)，可能是一種治療或預(yù)防這些慢性病的有效方法。研究已證實(shí)，普洱茶能減輕體質(zhì)量和降低血脂水平[18-19]，清除自由基和抗氧化活性[20]，降低氧化脅迫和肝保護(hù)作用[21]。普洱茶的這些干預(yù)慢性病發(fā)生的保健機(jī)制亟待進(jìn)一步研究。普洱茶對(duì)肥胖機(jī)體失衡的細(xì)胞因子的影響尚鮮見(jiàn)報(bào)道，尤其是通過(guò)飲用普洱茶對(duì)肥胖及相關(guān)細(xì)胞因子的影響與關(guān)系尚不清楚。因此，本實(shí)驗(yàn)研究普洱茶熱水提取物對(duì)小鼠血清細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)作用，以期闡釋普洱茶的減肥機(jī)理和保健功效。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、材料與試劑

SPF級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量170～200 g，購(gòu)自中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，生產(chǎn)許可證編號(hào)：SCXK-（軍）2007-004。基礎(chǔ)飼料（含30%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，下同）玉米、20%豆粕、16%麥麩、10%魚粉、0.5%各種維生素、2%鹽和6.5%高粱）、高脂飼料（含60%基礎(chǔ)飼料、4%乳粉、20%豬油、10%蔗糖和6%蛋黃）天津Research Diets公司。

普洱茶干粉由云南天士力帝泊洱生物茶葉集團(tuán)有限公司提供。制備工藝為茶水比1:10（m/V），水溫90 ℃，浸提30 min，收集浸液，重復(fù)1 次，合并2 次浸提液，減壓蒸餾，噴霧干燥成粉。普洱茶成粉主要成分為茶色素（49.44%，其中茶褐素占47.32%）、蛋白質(zhì)（25.75%）以及多糖（16.74%）。

西布曲明 太極集團(tuán)重慶涪陵制藥廠；鼠細(xì)胞因子試劑盒 美國(guó)Millipore公司；胰島素、脂聯(lián)素、瘦素酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒 北京尚柏生物醫(yī)學(xué)技術(shù)有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

3K15冷凍離心機(jī) 德國(guó)Sigma公司；Luminex200液體芯片掃描儀 美國(guó)Millipore公司；MULTISKAN MK3全自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀、Wellwash 4Mk2半自動(dòng)洗板機(jī)美國(guó)Thermo公司；UV-2550紫外分光光度計(jì) 日本島津公司；DH4000型電熱恒溫培養(yǎng)箱 天津Teste公司。

1.3 方法

1.3.1 動(dòng)物飼養(yǎng)及分組

48 只雄性SD大鼠隨機(jī)分為6 組，每組8 只，（23±2）℃條件下飼養(yǎng)。正常組（1 組）喂普通飼料，高脂組（5 組）喂高脂飼料。每周稱大鼠體質(zhì)量，喂養(yǎng)8 周后，高脂飼料喂養(yǎng)大鼠的體質(zhì)量比普通飼料喂養(yǎng)的高20%，成功建立了飲食誘導(dǎo)的肥胖模型。

將8 只正常體質(zhì)量雄性SD大鼠作為正常對(duì)照組，40 只肥胖雄性SD大鼠分為以下5 組：肥胖對(duì)照組、西布曲明陽(yáng)性對(duì)照組（灌胃6 mg/（kg·d）西布曲明）、低劑量普洱茶組（灌胃0.83 g/（kg·d）普洱茶）、中劑量普洱茶組（灌胃1.66 g/（kg·d）普洱茶）和高劑量普洱茶組（灌胃2.5 g/（kg·d）普洱茶）。每天早上9∶00灌胃、稱質(zhì)量，自由飲水，每周測(cè)量體長(zhǎng)（從鼻子到肛門），計(jì)算不同時(shí)間的Lee’s指數(shù)。42 d后禁食24 h，將所有大鼠乙醚麻醉后，稱體質(zhì)量，眼底取血，處死。取腎周和附睪脂肪用生理鹽水清洗并稱質(zhì)量[22-23]。收集的血液經(jīng)3 000 r/min離心5 min，取上清液，用于測(cè)定細(xì)胞因子含量和生化指標(biāo)。樣品于-80 ℃下冷凍備用。Lee’s指數(shù)和脂肪系數(shù)分別按照式（1）、（2）計(jì)算。

1.3.2 細(xì)胞因子TNF-α、VEGF、IL-1α和IL-1β質(zhì)量濃度的測(cè)定

血清中的細(xì)胞因子TNF-α、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）、IL-1α和IL-1β水平的測(cè)定選用液體芯片試劑盒方法。每次測(cè)量樣品需要10 μL，將標(biāo)準(zhǔn)品和樣品加在96 孔板上，并使用xPONENT3.1軟件，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)品的質(zhì)量濃度來(lái)測(cè)定細(xì)胞因子質(zhì)量濃度，重復(fù)一次，具體操作依據(jù)說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3.3 胰島素含量、瘦素和脂聯(lián)素質(zhì)量濃度的測(cè)定

使用酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)試劑盒測(cè)定血清胰島素含量和瘦素、脂聯(lián)素質(zhì)量濃度。

1.3.4 生化指標(biāo)檢測(cè)

葡萄糖（血糖）、高密度脂蛋白膽固醇（highdensity lipoprotein cholesterol，HDL-C）和低密度脂蛋白膽固醇（low-density lipoprotein cholesterol，LDL-C）濃度采用全自動(dòng)生化分析儀按照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)處理采用SPSS l6.0軟件進(jìn)行方差分析，實(shí)驗(yàn)結(jié)果以 ±s表示，組間顯著性分析采用非參數(shù)Mann-Whitney檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 普洱茶對(duì)大鼠體質(zhì)量的影響

由圖1可知，與肥胖對(duì)照組相比，6 周后普洱茶組SD大鼠體質(zhì)量顯著下降（P＜0.05），普洱茶高、中、低劑量組大鼠體質(zhì)量分別降低了27.62%、26.59%和24.80%；陽(yáng)性對(duì)照組大鼠體質(zhì)量減少了21.5%（P＜0.05）。因此，低劑量普洱茶與西布曲明具有同樣的降低體質(zhì)量作用，隨著劑量的增加，減肥效果優(yōu)于西布曲明。

圖1 普洱茶對(duì)SD大鼠體質(zhì)量的影響Fig. 1 Effect of Pu-erh tea on body mass of SD rats

當(dāng)能量攝入大于消耗時(shí)，多余的能量以脂肪形式貯存堆積在脂肪組織的細(xì)胞中，引起肥胖癥。通過(guò)膳食誘導(dǎo)的大鼠肥胖模型在某種程度上與人肥胖癥具有相似的形成機(jī)制。能量攝入過(guò)多首先表現(xiàn)為血糖升高，機(jī)體只能產(chǎn)生過(guò)多的胰島素促使剩余能量被脂肪組織攝取、利用及合成脂肪。脂肪組織能分泌一些激素，如瘦素等，因此，出現(xiàn)肥胖意味著機(jī)體中的脂質(zhì)、膽固醇、葡萄糖、胰島素和瘦素水平增加，而高胰島素和瘦素水平又反過(guò)來(lái)會(huì)刺激食欲，導(dǎo)致肥胖加重，這樣的惡性循環(huán)會(huì)引起胰島素和瘦素的生物學(xué)反應(yīng)低于預(yù)計(jì)正常水平，從而產(chǎn)生抗性。因此，糖尿病、心血管疾病等疾病與肥胖密切相關(guān)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，普洱茶具有減肥作用，這與他人的研究結(jié)果[1-3]一致。

2.2 普洱茶對(duì)肥胖大鼠脂質(zhì)代謝的影響

圖2 普洱茶對(duì)肥胖大鼠HDL-C、LDL-C濃度和脂肪系數(shù)的影響Fig. 2 Effect of Pu-erh tea on the levels of HDL-C, LDL-C and fat coefficient in serum of SD rats

脂肪系數(shù)用來(lái)描述肥胖的程度，尤其是反映內(nèi)臟脂肪的積累程度。由圖2可知，低、中和高3 種劑量的普洱茶處理使SD肥胖大鼠的脂肪系數(shù)由肥胖對(duì)照組的（4.60±0.14）%分別降至（1.47±0.41）%、（1.23±0.36）%和（0.97±0.29）%（P＜0.01）。而陽(yáng)性對(duì)照組脂肪系數(shù)降至（1.49±0.45）%（P＜0.01），與低劑量普洱茶的效果相當(dāng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與肥胖對(duì)照組對(duì)比，3 種劑量的普洱茶組和陽(yáng)性對(duì)照組中內(nèi)臟脂肪含量極顯著減少（P＜0.01），而且，普洱茶處理組內(nèi)臟脂肪的減少呈劑量依賴性。

由圖2可知，與肥胖對(duì)照組相比，低、中和高劑量普洱茶處理組的HDL-C濃度分別增加了20.4%、22.2%、25.0%（P＜0.05），而陽(yáng)性對(duì)照組的HDL-C濃度僅升高1.5%（P＞0.05）。與肥胖對(duì)照組相比，低、中和高劑量普洱茶處理組LDL-C濃度分別降低了7.11%、9.11%和25.74%（P＜0.05），而陽(yáng)性對(duì)照組LDL-C濃度則降低了43.9%（P＜0.01）。以上結(jié)果表明，普洱茶能顯著提高HDL-C濃度，明顯降低LDL-C濃度，且高劑量組作用效果顯著，反映出普洱茶具有糾正異常血脂的作用，而減肥藥物西布曲明對(duì)HDL-C濃度的提高不明顯，對(duì)調(diào)節(jié)LDL-C濃度有顯著的作用。

HDL-C和LDL-C是血清中膽固醇的2 種主要類型。HDL-C的主要功能是將過(guò)量的膽固醇從肝外組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟進(jìn)行代謝，而LDL-C的主要功能是將膽固醇從肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)到其他組織。HDL-C黏度低，在血液循環(huán)期間能保持血液的液化狀態(tài)并防止過(guò)多膽固醇的積累。而LDL-C黏度高、流動(dòng)性差，這使得LDL-C在從肝臟轉(zhuǎn)移到其他器官過(guò)程中，更容易發(fā)生沉積而最終導(dǎo)致動(dòng)脈硬化。最近的研究證實(shí)，肥胖與HDL-C負(fù)相關(guān)，有助于預(yù)防動(dòng)脈硬化和降低冠心病死亡率[24-25]。肥胖的本質(zhì)是機(jī)體的能量攝入大于消耗。這種正能量的高糖高脂飲食可刺激機(jī)體合成內(nèi)源性的甘油三酯和LDL-C，增加了機(jī)體患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。普洱茶能提高肥胖大鼠血清中的HDL-C濃度，降低LDL-C濃度，在糾正異常血脂作用同時(shí)，可能對(duì)心血管疾病有預(yù)防和保健作用。

2.3 普洱茶對(duì)血糖和胰島素水平的影響

圖3 普洱茶對(duì)肥胖大鼠血清中血糖和胰島素水平的影響Fig. 3 Effect of Pu-erh tea on the levels of Glu and insulin in serum of SD rats

由圖3可知，肥胖對(duì)照組的血糖和胰島素水平顯著高于正常體質(zhì)量大鼠的（分別提高了138%和16.7%，P＜0.01）。而經(jīng)過(guò)3 種不同劑量的普洱茶組處理后，血糖濃度和胰島素含量明顯下降。與肥胖對(duì)照組（（6.13±0.18）mmol/L）相比，低劑量組和中劑量組的血糖濃度分別降至（2.62±0.07）mmol/L和（2.02±0.06）mmol/L，接近正常對(duì)照組（（2.57±0.15）mmol/L）水平。但高劑量組血糖濃度比正常對(duì)照組低35%（P＜0.05），說(shuō)明普洱茶不宜超量飲用，特別是對(duì)于低血糖患者。胰島素含量變化與血糖濃度的相似，與肥胖對(duì)照組比較，低、中、高劑量組分別降低了8.6%、17.2%和41.7%，且中劑量普洱茶組胰島素含量略低于正常對(duì)照組（P＞0.05），而高劑量組則顯著低于正常對(duì)照組（P＜0.05）。在實(shí)驗(yàn)劑量范圍內(nèi)，胰島素含量的降低程度取決于普洱茶的劑量。中劑量普洱茶的胰島素含量降低效果大致與西布曲明相當(dāng)，接近正常對(duì)照組。

2.4 普洱茶對(duì)肥胖大鼠細(xì)胞因子的影響

2.4.1 普洱茶對(duì)脂聯(lián)素和瘦素質(zhì)量濃度的調(diào)節(jié)作用

免疫和脂肪細(xì)胞可以分泌各種細(xì)胞因子和激素，這些因子作為化學(xué)信號(hào)，具有細(xì)胞調(diào)節(jié)功能。其種類繁多、數(shù)量龐大且存在復(fù)雜的相互關(guān)系，構(gòu)成了一個(gè)復(fù)雜的細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)。基于免疫應(yīng)答或其在炎癥反應(yīng)中的作用，將細(xì)胞因子分為3 類，即炎性細(xì)胞因子、抑炎性細(xì)胞因子和趨化因子。許多研究表明，慢性疾病或亞健康狀態(tài)與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的不平衡密切相關(guān)[16-17]。具有肥大脂肪細(xì)胞的脂肪組織歷來(lái)被認(rèn)為是巨大的能量?jī)?chǔ)存器，但最近的研究表明，這種組織也是人體內(nèi)最大的分泌器官[12-13,26]。脂肪細(xì)胞因子水平會(huì)隨著脂肪細(xì)胞數(shù)量的改變而增加或減少，從而導(dǎo)致體內(nèi)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的不平衡。脂肪組織分泌的許多激素和細(xì)胞因子已被鑒定，其中瘦素、脂聯(lián)素和TNF-α是脂肪組織分泌的非常重要的激素和細(xì)胞因子。

圖4 普洱茶對(duì)肥胖大鼠血清中脂聯(lián)素和瘦素質(zhì)量濃度的影響Fig. 4 Effect of Pu-erh tea on the levels of leptin and adiponectin in serum of SD rats

瘦素和脂聯(lián)素是由脂肪細(xì)胞分泌的激素。由圖4可知，與正常對(duì)照組相比，肥胖對(duì)照組脂聯(lián)素質(zhì)量濃度下降18%（P＜0.01），而瘦素質(zhì)量濃度顯著升高（達(dá)350%）（P＜0.01），說(shuō)明肥胖可導(dǎo)致激素失衡。與肥胖對(duì)照組比較，各劑量普洱茶組均可極顯著降低血清瘦素質(zhì)量濃度，而使脂聯(lián)素質(zhì)量濃度顯著增加，說(shuō)明普洱茶具有調(diào)節(jié)激素的功能。與肥胖對(duì)照組相比，低、中、高劑量普洱茶組的瘦素質(zhì)量濃度從（22.60±0.67）×10-4μg/mL分別降至（7.10±0.20）×10-4、（7.50±0.25）×10-4μg/mL和（8.00±0.26）×10-4μg/mL，分別下降了68.6%、66.8%和64.6%（P＜0.01）；脂聯(lián)素質(zhì)量濃度從（6.080±0.012）×10-3μg/mL分別增加到（6.440±0.013）×10-3、（6.540±0.013）×10-3μg/mL和（6.670±0.014）×10-3μg/mL，分別增加了5.9%、7.6%和9.7%（P＜0.05），普洱茶中劑量組瘦素（（7.10±0.20）×10-4μg/mL）和脂聯(lián)素（（6.540±0.013）×10-3μg/mL）質(zhì)量濃度分別接近正常對(duì)照組的瘦素（（6.50±0.19）×10-4μg/mL）和脂聯(lián)素（（7.36±0.14）×10-3μg/mL）質(zhì)量濃度。與肥胖對(duì)照組相比，陽(yáng)性對(duì)照組瘦素質(zhì)量濃度（（7.70±0.22）×10-4μg/mL）下降65%；脂聯(lián)素質(zhì)量濃度（（6.350±0.013）×10-3μg/mL）增加4.4%。結(jié)果表明：普洱茶和西布曲明都能降低瘦素水平，且中劑量普洱茶與西布曲明的作用效果相同；在調(diào)控脂聯(lián)素水平作用方面，普洱茶比西布曲明效果更好。

脂聯(lián)素（也稱為Acrp30、apM1）是一種與肥胖程度呈負(fù)相關(guān)的抗炎因子，是調(diào)節(jié)許多代謝過(guò)程（包括葡萄糖調(diào)節(jié)和脂肪酸分解代謝）的蛋白激素。這種激素通過(guò)上調(diào)胰島素受體和胰島素受體底物1（insulin receptor substrate 1，IRS-1）的表達(dá)，激活5’-AMP蛋白激酶，磷酸化乙酰輔酶A，通過(guò)促進(jìn)脂肪氧化而抑制動(dòng)脈粥樣硬化并降低血糖水平，從而提高胰島素敏感性并降低血糖肝臟或肌肉細(xì)胞中的甘油三酯含量[27]。由圖4可知，普洱茶處理的肥胖大鼠脂聯(lián)素質(zhì)量濃度顯著提高；血清中的血糖質(zhì)量濃度和胰島素含量降低，胰島素敏感性增加。而脂聯(lián)素是脂質(zhì)和葡萄糖代謝過(guò)程中的重要調(diào)節(jié)因子，這意味著普洱茶可用于干預(yù)和治療2型糖尿病，即與胰島素抵抗和非肥胖高血糖有關(guān)的代謝綜合征。

瘦素是由脂肪組織分泌的一種激素，其與下丘腦神經(jīng)細(xì)胞上的瘦素受體結(jié)合，產(chǎn)生飽食反應(yīng)等一系列生理效應(yīng)。瘦素在體內(nèi)通過(guò)調(diào)控機(jī)體的食欲來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)體質(zhì)量的調(diào)節(jié)及體脂的自穩(wěn)。肥胖者體內(nèi)血液循環(huán)中存在與瘦素功能拮抗的物質(zhì)（甘油三酯）或者同時(shí)存在瘦素介導(dǎo)的神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)通路異常（瘦素受體轉(zhuǎn)運(yùn)效率下降），使機(jī)體的這種自穩(wěn)調(diào)節(jié)系統(tǒng)遭受不同程度的破壞，表現(xiàn)為肥胖者體內(nèi)瘦素水平往往很高，產(chǎn)生瘦素抵抗[28]。因此，減少脂肪含量可以減弱瘦素抵抗和胰島素抵抗。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，低劑量普洱茶即可顯著降低膳食誘導(dǎo)的大鼠體內(nèi)的瘦素質(zhì)量濃度（圖4），有效緩解由肥胖引起的瘦素抵抗。

2.4.2 普洱茶對(duì)TNF-α、VEGF質(zhì)量濃度及Lee’s指數(shù)的調(diào)節(jié)作用

TNF-α是由單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分泌的炎性細(xì)胞因子；然而研究表明，這種細(xì)胞因子也在脂肪細(xì)胞中表達(dá)，其水平與血清胰島素水平[29]以及葡萄糖和脂質(zhì)代謝[30]密切相關(guān)。癌細(xì)胞的生長(zhǎng)和代謝取決于血管生成。VEGF是最有效的促血管生長(zhǎng)因子，其主要生物學(xué)功能是促進(jìn)血管生成。一些癌癥，如乳腺癌、肺癌、食管癌、胃癌和結(jié)腸癌，往往導(dǎo)致機(jī)體具有很高的VEGF水平[31-32]。因此，在篩選抗癌藥物時(shí)，降低VEGF的表達(dá)至關(guān)重要。然而，越來(lái)越多的證據(jù)表明癌癥與肥胖有關(guān)，肥胖人群的患癌風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于正常體質(zhì)量人群[33]。

圖5 普洱茶對(duì)肥胖大鼠血清中的TNF-α、VEGF質(zhì)量濃度和Lee’s指數(shù)的影響Fig. 5 Effect of Pu-erh tea on TNF-a, VEGF levels and Lee’s index in serum of SD rats

低、中、高劑量普洱茶組的Lee’s指數(shù)分別從肥胖對(duì)照組的299.7±4.5降至286.1±4.3、284.9±4.3和271.9±4.0，且TNF-α和VEGF質(zhì)量濃度極顯著下降（P＜0.01）（圖5）。與正常對(duì)照組相比，肥胖對(duì)照組TNF-α和VEGF質(zhì)量濃度分別升高了180%和163%。與肥胖對(duì)照組比較，低、中、高劑量普洱茶組的血清TNF-α質(zhì)量濃度分別極顯著降低了25.0%、27.8%、33.3%（P＜0.01），VEGF質(zhì)量濃度分別極顯著降低45.3%、44.6%、40.5%（P＜0.01）。在降低TNF-α質(zhì)量濃度方面，普洱茶的劑量效應(yīng)不明顯；而在降低VEGF質(zhì)量濃度方面，普洱茶沒(méi)有劑量效應(yīng)。因此，本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果也證實(shí)，肥胖是身體的炎癥狀態(tài)，普洱茶可以通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞因子平衡來(lái)改善炎癥狀態(tài)。

TNF-α是一種重要的炎性細(xì)胞因子，具有抑制或殺死腫瘤細(xì)胞、促進(jìn)細(xì)胞增殖分化等多種功能。除了單核細(xì)胞和激活的巨噬細(xì)胞，脂肪細(xì)胞也可以產(chǎn)生TNF-α[30]。由圖5可知，與正常對(duì)照相比，肥胖組的TNF-α質(zhì)量濃度顯著增加。長(zhǎng)時(shí)間維持較高的TNF-α質(zhì)量濃度會(huì)抑制葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4的mRNA表達(dá)，同時(shí)增加IRS-1的絲氨酸磷酸化水平，抑制IRS-1的酪氨酸磷酸化，降低IRS-1蛋白表達(dá)水平。這些變化中斷胰島素的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致胰島素抵抗。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，肥胖對(duì)照組TNF-α質(zhì)量濃度和胰島素含量分別比正常組高80%和63%（P＜0.01），葡萄糖濃度和瘦素質(zhì)量濃度分別是正常對(duì)照組的2.39 倍和3.48 倍。因此，肥胖大鼠出現(xiàn)瘦素和胰島素抵抗以及高血糖癥。肥胖使炎性細(xì)胞因子保持在高水平，而抗炎性細(xì)胞因子保持在較低水平，導(dǎo)致細(xì)胞因子的失衡。

血管生成對(duì)于癌細(xì)胞的快速生長(zhǎng)和繁殖非常重要，因?yàn)樗鼈冃枰哼\(yùn)輸足夠的能量和氧氣。許多動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)表明，大多數(shù)癌細(xì)胞系可以表達(dá)高水平的VEGF[31-32]，例如乳腺癌、結(jié)腸直腸癌和胃癌患者機(jī)體的VEGF水平急劇增加。因此，VEGF可能是癌癥與肥胖之間的重要聯(lián)系。流行病學(xué)研究也顯示肥胖增加了與癌癥相關(guān)的危險(xiǎn)因素[33]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，普洱茶能降低VEGF質(zhì)量濃度，提高脂聯(lián)素水平，改善炎癥和抗炎癥細(xì)胞因子的平衡，降低癌癥的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)。

2.4.3 普洱茶對(duì)IL-1α和IL-1β質(zhì)量濃度的調(diào)節(jié)作用

IL-1是參與炎癥反應(yīng)，細(xì)胞生長(zhǎng)和皮層組織修復(fù)的多效細(xì)胞因子[14]。IL-1超家族含有3 個(gè)成員：IL-1α、IL-1β和IL-1受體拮抗劑。IL-1α（含159 個(gè)氨基酸）和IL-1β（含153 個(gè)氨基酸）由不同的基因分別編碼，氨基酸順序僅有26%的同源性，但是具有相同的受體和相似的生物活性，在多數(shù)細(xì)胞中它們表現(xiàn)為促炎作用[34]。但是，IL-1α主要在細(xì)胞中發(fā)揮作用。

圖6 普洱茶對(duì)IL-1α（A）和IL-1β（B）質(zhì)量濃度的影響Fig. 6 Effect of Pu-erh tea on the levels of IL-1α (A) and IL-1β (B) in serum of SD rats

由圖6可知，肥胖能夠?qū)е卵逯械腎L-1α質(zhì)量濃度降低，肥胖對(duì)照組與正常對(duì)照組比下降26.6%（P＜0.05），而使IL-1β質(zhì)量濃度升高37.6%（P＜0.01），而灌胃普洱茶后，IL-1α質(zhì)量濃度升高，IL-1β質(zhì)量濃度降低，呈劑量依賴性。西布曲明具有相同的效果，即糾正失衡的IL-1α/IL-1β比例，說(shuō)明2 種因子有不同的作用，特別是在肥胖這種慢性系統(tǒng)炎癥過(guò)程中，發(fā)揮著不同的作用。

3 結(jié) 論

普洱茶能降低飲食誘導(dǎo)的肥胖大鼠的體質(zhì)量，Lee’s指數(shù)和脂肪系數(shù)，通過(guò)降低LDL-C水平和升高HDL-C水平，糾正失衡的脂質(zhì)代謝。普洱茶能顯著的降低瘦素水平，改善肥胖引起的瘦素抵抗。普洱茶具有顯著降低血糖和胰島素水平的功能，僅使用低劑量的普洱茶，肥胖小鼠的血糖和胰島素水平就能回到正常對(duì)照水平。普洱茶能降低炎癥因子TNF-α和VEGF的質(zhì)量濃度，提高脂聯(lián)素等抗炎細(xì)胞因子水平，調(diào)節(jié)炎癥和抗炎過(guò)程的平衡，調(diào)節(jié)IL-1α/IL-1β的比例。因此，普洱茶可以用作潛在的健康飲料，用于預(yù)防或治療許多與營(yíng)養(yǎng)性肥胖相關(guān)的疾病。