2018年全國省級獸醫系統實驗室檢測能力比對結果分析

邴國霞,金 萍,劉 偉,董昕欣,吳 迪,王曉英,原 霖,李雁冰,郭建宏

(1.中國動物疫病預防控制中心,北京 朝陽 100125;2.北京市動物疫病預防控制中心,北京 大興 102629;3.中國農業科學院哈爾濱獸醫研究所,黑龍江 哈爾濱 150001;4.中國農業科學院蘭州獸醫研究所,甘肅 蘭州 730046)

實驗室檢測能力比對是農業農村部加強獸醫系統實驗室管理的主要抓手,也是評價和提高實驗室管理水平和檢測能力的重要手段。按照《農業農村部辦公廳關于開展2018年獸醫系統實驗室檢測能力比對工作的通知》[1]要求,中國動物疫病預防控制中心組織實施了2018年獸醫系統省級實驗室能力比對,全國32個省級獸醫實驗室參加,在規定時間內完成了比對樣品制備、分發、檢測和結果回收。通過能力比對,驗證了各實驗室檢測技術水平,發現了實驗室在質量管理方面和能力建設存在的問題,為農業農村部今后加強獸醫系統實驗室管理提供了數據支撐和政策建議。

1 比對計劃

本次比對依據中國動物疫病預防控制中心有關2018年獸醫系統實驗室檢測能力比對的文件[2]要求,共設置4個比對項目,分別是H7亞型禽流感病毒(AIV Ab)抗體檢測、口蹄疫病毒(FMDV)和塞內卡病毒(SVA)鑒別檢測、布魯菌抗體檢測(BRU Ab)、豬偽狂犬病病毒(PRV)gE抗體檢測。全國共有32個省級獸醫實驗室(含新疆生產建設兵團)參加此次比對。

2 比對方法

2.1 試驗方法與標準 針對4個檢測能力比對項目,采用國家獸醫參考實驗室或專業實驗室推薦的方法和試劑,其中部分試劑由參加比對的省級實驗室自行準備,見表1。

2.2 比對樣品制備

2.2.1 制備方式 各國家獸醫參考實驗室和專業實驗室分別完成相應樣品的制備、標定、分裝和編號,并將樣品和標定值送交中國動物疫病預防控制中心統一保存,作為盲樣下發使用。

表1 比對試驗的方法、標準和主要試劑

2.2.2 H7亞型AIV Ab檢測樣品 雞血清樣品6份,參考值設為 6log2、0log2、3log2,各參考值樣品數目不確定。

2.2.3 FMDV和SVA鑒別檢測樣品 口蹄疫和塞內卡病毒樣品6份,參考值分別設為FMDV陰性和SVA陰性、FMDV陽性和SVA陽性、FMDV陽性和SVA陰性、FMDV陰性和SVA陽性。

2.2.4 BRU Ab檢測樣品 羊血清樣品6份,樣品參考值分別設為強陽性、陽性、陰性,各參考值樣品數目為2份。

2.2.5 PRV gE Ab檢測樣品 豬血清樣品6份,樣品參考值分別設為強陽性、弱陽性、陰性,各參考值樣品數目不確定。

2.3 比對樣品傳遞 比對樣品為具有生物學活性的血清、細胞液,為保持其良好的生物學活性,樣品存放在-20℃以下冰柜中。分發時將樣品和試劑放入裝有冰袋的保溫箱中保存,由參加比對的省級實驗室派專人在規定的時間內統一領取,并在12小時之內送達參加比對的實驗室。

2.4 評判標準

2.4.1 H7亞型 AIV Ab檢測評判標準：6log2、3log2、0log2樣品的檢測結果應分別為“6”、“3” 、“0”。

2.4.2 FMDV和SVA鑒別檢測評判標準：FMDV陰性和SVA陰性、FMDV陽性和SVA陽性、FMDV陽性和SVA陰性、FMDV陰性和SVA陽性的檢測結果應分別為“FMDV(-)和 SVA(-)”、“FMDV(+)和 SVA(+)”、“FMDV(+)和 SVA(-)”、“FMDV(-)和 SVA(+)”。

2.4.3 BRU Ab檢測評判標準：強陽性樣品的檢測結果為“＞200”;弱陽性樣品的檢測結果為“100”;陰性樣品的檢測結果應為“＜25”。

2.4.4 PRV gE Ab檢測評判標準：強陽性和弱陽性樣品的檢測結果為“+”;陰性樣品的檢測結果應為“-”。

3 比對結果

3.1 總體結果 根據比對結果評判標準,在32個參加檢測能力比對省級獸醫實驗室中,共有26個實驗室的4個比對項目全部符合,有6個實驗室各有1個比對項目存在較大偏差,見表1。

表1 32個實驗室比對結果統計

3.2 H7亞型AIV Ab檢測比對結果 29個實驗室對該項目6份樣品檢測結果全部準確,其中有2個實驗室有1份樣品的檢測結果錯誤,分別將參考值為“6log2”樣本檢測為“4”、將參考值為“3log2”樣本檢測為“0”;有1個實驗室有2份樣品的檢測結果錯誤,分別將參考值為“6log2”樣本檢測為“8”、將參考值為“0log2”樣本檢測為“3”,見中插彩版圖1。

30個實驗室對該項目6份樣品檢測結果全部準確,其中有2個實驗室有1份樣品的檢測結果錯誤,均將 SVA陰性檢測為“SVA(+)”見表2。

表2 各實驗室FMDV和SVA鑒別檢測結果

3.3 PRV gE Ab檢測比對結果 32個實驗室的檢測結果全部正確,見表3。

表3 各實驗室PRV gE Ab檢測結果

3.4 BRU Ab檢測比對結果 31個實驗室對該項目6份樣品檢測結果全部準確,1個實驗室有4份樣品的檢測值與參考值存在較大偏差。結果見中插彩版圖2。

4 討論

4.1 從比對結果來看,共32個省級獸醫實驗室參加了4個比對項目768樣品的檢測,其中758份樣品檢測結果準確,準確率均為98.7%,同時近3年(2016-2018年)的準確率分別為 98.8%[3]、99.3%[4]、98.7%,保持了較高的檢測水準,這說明各省實驗室檢測質量體系比較穩定,同時也說明獸醫實驗室考核和檢測能力比對在提升實驗室能力建設方面發揮了重要作用。

4.2 本次實驗室檢測能力比對在H7亞型AIV Ab檢測項目中設置了平行樣品,用以評估實驗室檢測體系的穩定性。結果顯示,30個實驗室的檢測結果平行性好,有2個實驗室對于參考值相同的2份樣品檢測結果不一致。這說明檢測過程中存在較多的隨機性誤差,檢測系統的穩定性不好。

4.3 半定量檢測項目一直是實驗室檢測的薄弱環節,今年共有10份樣品的檢測值出現較大偏差,其中有8份樣品在半定量項目上出現偏差,占偏差樣本總數的80%。這說明各省級實驗室仍需在精細化管理上下功夫,繼續完善檢測技術體系,提高半定量項目檢測的精確度。

4.4 本次實驗室檢測能力比對緊密結合了《2018年獸醫工作要點》[5]關于突出抓好幾個重要動物疫病防治的要求,設置了H7亞型禽流感病毒抗體檢測、口蹄疫病毒和塞內卡病毒鑒別檢測、布魯菌抗體檢測、豬偽狂犬病病毒gE抗體檢測等4個檢測項目,達到了較好的效果。今后應繼續結合國家動物疫病防治計劃和凈化工作的要求,著重提高各省級獸醫實驗室在動物疫病防控一線的實戰能力。