ＨＰＬＣ法測定去炎酊中游離大黃素和大黃酚的含量

鮑云惠 呂鎖忠

基金項目：

作者簡介：鮑云惠（1978-），女，本科，主管中藥師，研究方向為醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥制劑研究與開發(fā)。E-mail：147161146@qq.com

通信作者：

【摘 要】 目的：建立高效液相色譜法測定去炎酊中游離大黃素和大黃酚含量的方法。方法：色譜柱為Hypersil ODS（C18）柱（4.6mm×250mm，5μm）， 柱溫為30 ℃;流動相為0.1%磷酸溶液-甲醇 （25∶75），流速為1.0mL/min; 檢測波長為254nm。結(jié)果： 大黃素和大黃酚分別在8.4604～211.5100（r=1.0000 ，n=6）和3.5237～88.0915（r=1.0000 ，n=6）μg/mL范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系;精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗的RSD均<1.0%;平均加樣回收率（RSD）分別為99.72%（0.37%）、99.78%（0.39%）。結(jié)論：該方法專屬性強(qiáng)、簡單易行、節(jié)約時間和成本，可用于測定去炎酊中游離大黃素和大黃酚的含量。

【關(guān)鍵詞】 HPLC法;去炎酊;大黃素;大黃酚;含量測定

【中圖分類號】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號】1007-8517（2019）7-0047-03

Abstract：Objective To establish a high performance liquid chromatography （HPLC） method for determining the content of free emodin and chrysophanol in Quyan tincture.? Method The determination was performed on Hypersil ODS（C18） （4.6mm×250 mm，5μm） column， and the column temperature was 30℃.The mobile phase was consisited of 0.1% phosphoric acid and methanol （25∶75）.The flow rate was 1.0mL/min. The detection wavelength was 254nm. Result Emodin have a good linear relationship range in 8.4604～211.5100μg/mL（r=1.000 0 ，n=6），and chrysophanol have a good linear relationship range in 3.5237～88.0915μg/mL（r=1.000 0 ，n=6），RSD of precision、repeatability and stability test were all lower than 1.0%; The average recovery（RSD） were 99.72%（0.37%） and 99.78%（0.39%）. Conclusion The method is specific， simple， time-saving and cost-saving，and can be used for the determination of free emodin and Chrysophanol in Quyan tincture.

Keywords：HPLC;Quyan Tincture;Emodin;Chrysophanol;Content? Determination

去炎酊是由重樓、大黃、紅花、白芷、虎杖、紫草、草烏、獨定子、馬錢子、生南星、苦參等中藥經(jīng)滲漉制成的酊劑。有清熱除濕、瀉火解毒、活血化瘀、消腫止痛、消炎排膿之功效，主治跌打損傷、外傷感染、癰疽、瘡癤、蚊蟲叮咬、皮膚癢疹等。大黃為方中君藥，具有瀉下攻積、清熱瀉火、涼血解毒、逐瘀通經(jīng)、利濕退黃，用于實熱積滯便秘、血熱吐衄、目赤咽腫、癰腫疔瘡、腸癰腹痛、瘀血經(jīng)閉、產(chǎn)后瘀阻、跌打損傷、濕熱痢疾、黃疸尿赤、淋證，水腫，外治燒燙傷;虎杖具有利濕退黃、清熱解毒、散瘀止痛、止咳化痰，用于實熱黃疸、淋濁、帶下、風(fēng)濕痹痛、癰腫瘡毒、水火燙傷、經(jīng)閉、癥瘕、跌打損傷、肺熱咳嗽[1]。現(xiàn)代藥理研究表明，大黃有瀉下、興奮胃腸平滑肌、對消化道黏膜保護(hù)、抗病原微生物及抗炎、保護(hù)心腦血管、抗腫瘤、保肝利膽等[2]作用;虎杖有抗炎、抗病毒、抗菌、調(diào)血脂、抗血栓、改變血流變、擴(kuò)張血管、保護(hù)心肌、抗氧化、抗腫瘤、改善阿爾茨海默病癥狀及預(yù)防艾滋病等[3]作用。去炎酊現(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)簡單，沒有對處方中任何一味中藥進(jìn)行含量測定。本文參照中國藥典[1]及文獻(xiàn)[4-12]，建立了HPLC法測定去炎酊中游離大黃素和大黃酚含量的方法，為去炎酊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提升提供參考。

1 儀器與材料

1.1 儀器 島津LC-20AT型高效液相色譜儀（配有四元泵，自動進(jìn)樣器，紫外檢測器，柱溫箱，真空在線脫氣機(jī)，LC solution工作站）（株式會社島津制作所），AE240型電子天平（瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司）。

1.2 材料 去炎酊（曲靖市中醫(yī)醫(yī)院，批號： ZD2017040，ZD2017041，ZD2017042，ZD2017043，規(guī)格：60 mL/瓶）;大黃素對照品（批號：110756-201512，含量：98.7%）、大黃酚對照品（批號：110796-201520，含量：99.2%），以上對照品均購置于中國食品藥品檢定研究院;乙腈（德國默克公司）為色譜純;水為雙蒸水;其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的制備

2.1.1 對照品溶液 精密稱取大黃素和大黃酚對照品適量，用乙醇制成每1mL分別含大黃素和大黃酚423.020和176.183μg/mL的對照品溶液儲備液，精密量取對照品儲備液1mL，置10mL容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得對照品使用液。