1例親子鑒定中Y染色體基因座缺失案例分析

呂國權 宋健文 古小玉

1.廣東公量司法鑒定中心，廣東 中山 528403；2.廣東司法警官職業學院，廣東 廣州 510520；3.廣東康怡司法鑒定中心，廣東 東莞 523000

一、案例

(一)案情

2017年6月委托人蘇某(男性，可疑父)因其小孩尹某(男性)需要辦理入戶手續，故委托鑒定親權關系。分別用DNA樣品采集專用卡采集三名被鑒定人血液樣本，并通風干燥保存。

(二)鑒定方法

三名被鑒定人的血痕均參照《法庭科學DNA實驗室檢驗規范》(GA/T 383-2014)中FTA卡法提取檢材的DNA。檢材DNA用熒光標記STR復合擴增試劑盒MicroreaderTM21D進行10μL體系擴增，并設立陰性及陽性對照，應用ABI3130型基因分析儀對擴增產物進行電泳分離，用Gene Mapper基因座分型軟件對電泳數據進行分析。

1.3STR檢查結果

小孩尹某STR基因分型結果顯示其性別與其外部信息不吻合，Amel基因座顯示該檢材性別為女性，但其檢驗結果證實小孩與其被檢父母存在親權關系且經過多次檢驗從而排除由于樣本混亂導致錯誤的信息。為慎重起見通知其家屬重新采集該小孩的毛發指甲作為鑒定檢材，并經檢驗發現前后所采集的檢材STR圖譜分型一致。并通過不同實驗室間不同儀器不同批號的試劑進行平行測定發現檢驗結果均顯示該檢材性別為女性。其變異情況如圖1所示：

圖1 委托人留下小孩的人口信息為男性但基因圖譜信息為女性，Amel基因座中僅在X的BIN中出現峰型。

圖2 基因圖譜可見該小孩的檢材中含有Y染色體。

二、討論

根據GA/T1163-2014《人類DNA熒光標記STR分型結果的分析及及應用》中4.6.1在STR分型圖譜中，一個基因座檢出一個等位基因，與純合子的檢測結果相似，但峰面積與信號強度與相鄰的雜合子單峰面積值相當考慮為等位基因丟失。當擴增包含STR重復區域的DNA片段時，因重復區域內或側翼序列或引物結合區發生單堿基突變，阻礙引物的結合，導致擴增失敗，無法檢測到模版DNA中本身存在的一個等位基因。在實際工作過程中這種情況一般在PCR過程中出現，DNA模版本應為雜合子在一系列外部因素的參與導致等位基因缺失。但該樣本的情況與標準規定不符，在性別基因座中其X染色體峰的信號強度比相鄰雜合子信號強度要高[1]。并且不同實驗室不同儀器間的平行測試后排除其基因座在PCR過程中丟峰的情況。初步排除由于試劑或儀器的影響導致的假純合子的情況。為了結果的準確性將該小孩檢材用MicroreaderTM24Y試劑按操作說明書進PCR及電泳得出該男性Y染色體相關圖譜(圖2所示)其Y24-STR結果僅在DYS393、DYS19、DYS458、DYS481、DYS456基因座出現峰型，結合其常染色體STR分型中Amel基因座檢驗結果可以明確其因為自身的基因突變導致Y染色體大片段缺失從而引起性別基因座等位基因缺失。一般而言，等位基因丟失概括有兩種情況，一種是由于PCR體系在擴增過程中本應存在的等位基因由于引物的設計、PCR的循環退火溫度、PCR抑制物等因素影響下導致STR分型本應為雜合子而錯誤的顯示為純合子[2]，另一種情況在堿基(AUTG)配對過程中出現配對錯誤或者嚴重基因缺失[3]。在日常法醫物證鑒定過程中Amel基因座檢測結果與外部信息不符的情況不多見，作者在工作過程中曾遇到另一案例經兩種不同廠家的試劑進行熒光擴增(閱微MicroreaderTM21D及中德美聯AUCG EX20)檢驗結果一致，Amel基因座顯示為女性，最后還是采用Y染色體試劑進行檢測得出正確結論，該案例MRY24檢測出完整的基因分型。

三、鑒定意見

該小孩常染色體STR基因座分型在Amel基因座中顯示為女性與委托人提交的個人信息不符。通過對該小孩的血痕進行M24Y檢測，并得出其Y-STR部分基因分型，確定該小孩性別為男性。結合MR21及M24Y DNA分型結果分析考慮該小孩自身的Y染色體出現變異部分缺失的情況。