醫療機構制劑術元健脾止痛丸中橙皮苷含量測定方法的研究

李彩云

[摘要] 目的 制定醫療機構制劑術元健脾止痛丸質量標準草案中含量測定的方法與指標。方法 分析處方，選取陳皮中的橙皮苷為指標成分，采用HPLC法，進行方法學考察，對制劑中橙皮苷含量測定方法進行研究。結果 建立了制劑的含量測定方法并制定了質控指標。結論 通過三批中試樣品的測定，驗證了所建立的含量測定方法的穩定性和可靠性，質控指標的合理性。

[關鍵詞] 醫療機構制劑;水丸;橙皮苷;含量測定;HPLC

[中圖分類號] R286.0 [文獻標識碼] A [文章編號] 1672-5654（2019）03（b）-0102-03

該文所研究的“術元健脾止痛丸”屬于醫療機構制劑新品種的研發，該文就該制劑質量標準草案中“含量測定”項目的測定方法及指標進行研究。

該制劑處方由麩炒白術、醋延胡索、 醋香附、麩炒蒼術、黨參、黃芪、陳皮、木香、砂仁、炒枳實、焦山楂、焦神曲、焦麥芽、炒雞內金、海螵蛸、煅牡蠣、黃連、炙甘草等18味中藥組成，參照《中國藥典》[1]各藥材飲片下含量測定方法，該文選擇陳皮中的橙皮苷的含量作為該制劑的含量測定指標，采用HPLC法，通過方法學考察，建立了該制劑中橙皮苷的HPLC含測方法。具體實驗如下。

1? 實驗材料

1.1? 供試藥品

術元健脾止痛丸：中試生產樣品三批，批號為：20160201、 20160202、20160203。

1.2? 儀器與試藥

儀器：島津LC-2010A高效液相色譜儀;Sartorius CP225D電子天平對照品及來源：橙皮苷，中國藥品生物制品檢定所，批號為0721-9909。

試劑：乙腈為色譜純，甲醇、乙醇為分析純，水為娃哈哈純凈水。

2? 實驗方法

2.1? 色譜條件與系統適用性試驗

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙腈-0.01%磷酸水（20：80）為流動相;檢測波長為283 nm。理論板數按橙皮苷峰計算應不低于2 000。

2.2? 耐用性試驗

使用三種色譜柱：Inertsil ODS-3 5 μm;250×4.6 mm;依利特Hypersil BDS C18;5 μm;4.6×250 mm;Kromasil 100A C18;5 μm;250×4.6 mm，按上述色譜條件進行測試是可行的。

2.3? 供試品溶液制備方法的考察

2.3.1 提取溶劑的考察? 對照品溶液的制備：精密稱取橙皮苷對照品（批號：0721-9909）5.2 mg，置50 mL量瓶中，用甲醇溶解后得到濃度為0.104 0 mg/mL的對照品溶液。

供試品溶液的制備：取該品10 g，精密稱定，精密加人甲醇、80%甲醇、50%甲醇各50 mL，加熱回流1 h，放冷后再稱重量，分別用甲醇、80%甲醇、50%甲醇補至原重，取續濾液后即得。3種濃度的甲醇提取效果相當。沒有明顯差別，可確定甲醇為提取溶劑。

2.3.2 提取方法的考察? 供試品溶液的制備：取本品適量，研細，取約10 g，精密稱定，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，分別超聲處理（功率500 W，頻率40 kHz）20、30、40 min，加熱回流分時段提取出，放冷后稱重，用甲醇補至原重量，取續濾液即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算含量。見表1。

由測定結果可知，加熱回流1.0、1.5、2.0 h提取結果相當，故確定提取方法為加熱回流提取1 h。

2.3.3 取樣量的考察? 供試品溶液的制備：分別取研細的本品約5 g、10 g、15 g，加入甲醇50 mL，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，取續濾液即得。分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液10 μL，注入液相色譜儀，測定，計算含量。三種取樣量測定結果差異不大，其中10 g的峰面積與對照品溶液峰面積大小接近，為了最大限度的減小系統誤差，確定取樣量為10 g。

2.3.4 供試品溶液的制備[2]? 取本品適量，研細，取約10 g，精密稱定，精密加人甲醇50 mL，密塞，稱定重量，加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醉補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。

2.4? 線性關系的考察

分別精密吸取濃度為0.104 0 mg/mL的橙皮苷對照品溶液各2、4 、6、8、10、12 μL，注入液相色譜儀，分別測定峰面積積分值。以橙皮苷對照品的進樣濃度為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，進行線性回歸，得回歸方程。測定結果見表2。

回歸方程y=1 484 364.05x+73.47，相關系數r=0.999 9。

試驗結果表明，橙皮苷進樣濃度在0.041 6～0.145 6 mg/mL之間進樣量與峰面積積分值呈良好的線性關系。

2.5? 儀器精密度試驗

精密吸取橙皮苷對照品溶液（0.104 0 mg/mL）10 μL，連續進樣6次，測其峰面積積分值。見表3。

試驗結果顯示儀器精密度良好。

2.6? 樣品穩定性試驗

取本品適量，每隔5 h進樣1次測定橙皮苷的峰面積積分值，共考察25 h，以觀察供試品溶液在檢測過程中待測成分的穩定性。見表4。

試驗結果表明供試品溶液在25 h內穩定性良好，能夠滿足測定需要。

2.7? 樣品測定

按確定的方法和條件，對所收集到的3批樣品進行測定，見表5。

根據上述3批樣品的含量測定結果，并結合《中國藥典》中“陳皮”中橙皮苷的含量限度為2.5 mg/g，本品每g水丸中含陳皮0.086 g，按檢出率70%計算暫定本品每g含陳皮以橙皮苷計，應不得少于0.16 mg，實際測定值也均大于此值，故標準定為不得少于0.16 mg。

3? 討論

醫療機構制劑質量標準是反映醫療機構制劑質量特性的技術參數、指標，執行標準是控制醫院制劑質量的有效手段，因此，質量標準的高低，決定著醫療機構對自制制劑質量控制的效力[3]，故本制劑質量標準的起草過程中，采用含量測定代替浸出物含量來控制藥品的質量，為全省醫療機構制劑的質量標準提高工作提供了一定的參考。

中藥制劑的質量受中藥原材料的影響較大，同樣都是合格的藥材，不同批次的藥材中有效成分的含量差別可能較大，甚至同一批次不同部位的藥材差別也較大[4-5]。因此本文含量指標的確定時，在確保制劑質量的前提下，將指標定的相對較低，即根據藥典中規定的指標成分的最低含量的基礎上，再按照藥材原粉入藥提取率不得低于70%，換算后得出的。

因基層醫療機構制劑室條件有限，制劑生產規模較小，為降低制劑成本，該文在選擇含量測定指標成分時，在能夠反映制劑質量的前提下，選擇操作比較簡單，實驗成本較低的橙皮苷作為指標成分。

[參考文獻]

[1]? 國家食品藥品監督管理局.《中國藥典》[S].北京：化學工業出版社，2015：179-181.

[2]? 嚴曉麗，閆倩倩，劉曉政，等.高效液相色譜法測定衢枳殼中新橙皮苷及柚皮苷[J].食品研究與開發，2018，39（21）：161-167.

[3]? 陳家潤，江映珠，吳雪龍.廣東省醫療機構制劑質量標準修訂存在問題及對策[J].中國藥事，2016，30（3）：209-214.

[4]? 王美紅，張曉芹，王慧玉.中草藥醫院制劑的研究進展與發展趨勢[J].中醫藥管理雜志，2018，26（20）：11-13.

[5]? 嚴倩茹，鄔偉魁.中藥制劑含量均勻度研究[J].藥學研究，2018，27（9）：28-30.