噁蟲酮原藥高效液相色譜分析方法研究

馮彥妮，姜宜飛，郭海霞，吳進龍*

(1.山東省農藥科學研究院，山東 濟南 250100；2.農業農村部農藥檢定所，北京，100125)

1 前言

噁蟲酮英文通用名稱：Metoxadiazone，CAS號：60589-06-2，分子式：C10H10N2O4，相對分子質量：222.2，化學名稱：5-甲氧基-3-(鄰甲氧基苯基)-1,3,4-二唑-2-(3H)-酮，結構式(圖1)。[1]

圖1 噁蟲酮結構式

噁蟲酮具有良好的殺螨殺蟲活性，殺蟲譜廣，能夠將昆蟲快速擊倒。其作用機理是抑制乙酰膽堿酯酶和對神經軸索作用，對防治對擬除蟲菊酯類產生抗性的家蠅、蟑螂等害蟲具有很好的效果。對刺吸式口器害蟲、同翅目害蟲如蚜蟲、飛虱、葉蟬等農業害蟲都具有優異的殺蟲活性。它在植物體內的持久期比較短而在葉面和土壤中的持效時間相對較長。[2]

目前國內有關噁蟲酮原藥的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法，對噁蟲酮原藥進行定量分析，該方法操作簡便、快速，準確度和精密度均能達到定量分析的要求，可以作為企業生產過程質量控制和質檢機構分析檢測的參考方法。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 甲醇(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；磷酸(分析純)；噁蟲酮標樣，已知質量分數99.9%(由農業農村部農藥檢定所提供)；噁蟲酮原藥(由某公司提供)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：Agilent 1200，具有二極管陣列檢測器和自動進樣器，定量環：100μL；Agilent色譜工作站；Millipore超純水制備系統；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內裝ZORBAX SB-C185.0μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：ψ(甲醇:0.1%磷酸水溶液)=50:50；流速：1.0mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：280nm；進樣體積：5μL；保留時間：噁蟲酮約6.7min。

噁蟲酮標樣和原藥的高效液相色譜圖(圖2、3)。

圖2 噁蟲酮標樣高效液相色譜圖

圖3 噁蟲酮原藥高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標樣溶液的配制 稱取噁蟲酮標樣0.02g(精確至0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含噁蟲酮0.02g的試樣(精確至0.000 2g)，置于50mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針標樣溶液的響應值相對變化<1.5%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標樣溶液中噁蟲酮峰面積分別進行平均。試樣中噁蟲酮的質量分數ω(%)，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1──標樣溶液中噁蟲酮峰面積的平均值；

A2──試樣溶液中噁蟲酮峰面積的平均值；

m1──標樣的質量，g；

m2──試樣的質量，g；

P──標樣中噁蟲酮的質量分數，%。

3 結果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過Agilent 1200高效液相色譜儀的光譜數據采集功能，獲得噁蟲酮的紫外波長掃描圖(圖4)。從圖中可以看到噁蟲酮最大吸收波長在220nm處，在280nm處也有較大的吸收，為了盡量減少溶劑的干擾，將檢測波長定為280nm。

圖4 噁蟲酮紫外吸收譜圖

色譜柱選擇常規的ZORBAX SB-C18反相柱。依據噁蟲酮物化性質，用甲醇作為溶劑溶解樣品，并選擇甲醇和水作為流動相，為了得到更好的分離效果和峰形，將流動相按不同比例在色譜柱上進行試驗，最終確定流動相為ψ(甲醇:0.1%磷酸水溶液)=50:50，在流速1.0mL/min時，有效成分與雜質能得到很好的分離，峰形對稱，基線平穩，能在短時間能得到滿意的分析結果，提高了工作效率。

3.2 分析方法的線性相關性試驗 在0～1.0g/L范圍內，配制0.05、0.1、0.45、0.7、1.0g/L的1組噁蟲酮標準溶液，按上述色譜操作條件進行分析，測定噁蟲酮的峰面積，取2次測定的平均結果，以噁蟲酮的質量濃度(x，g/L)為橫坐標，峰面積(y)為縱坐標，繪制標準校正曲線。擬合噁蟲酮線性方程為y=4.034 3x-0.415 8，相關系數為0.999 9。結果表明噁蟲酮在測試的質量濃度范圍內線性關系良好。

3.3 分析方法的精密度試驗 從同一產品中準確稱取5個試樣，在上述色譜操作條件下進行分析，測得噁蟲酮的標準偏差為0.16%，變異系數為0.16%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗結果

3.4 分析方法的準確度試驗 從已知質量分數的噁蟲酮(99.62%)中稱取5個試樣，分別加入一定量的噁蟲酮標樣(99.9%)，在上述色譜操作條件下進行分析，測得噁蟲酮的平均回收率為99.98%(表2)。

表2 分析方法的準確度試驗結果

4 結論

試驗建立了高效液相色譜法檢測噁蟲酮中有效成分的分析方法。試驗結果表明，噁蟲酮在測試濃度范圍內線性關系良好，方法準確度和精密度較高，具有操作簡便、快速的特點，是產品質量控制和應用研究中較為理想的分析方法。