桑葉葉質對顯性三眠蠶眠性的影響

丁小娟 李俊 楊忠生

（四川省蘇稽蠶種場，四川 樂山 614013）

三眠蠶品種具有發育經過短、纖度細、纖度均方差小、凈度優等特點，但在大面積生產上，由于受環境因素的影響，往往會出現三眠眠性不穩定的情況，特別在秋季，三眠蠶品種更容易引發四眠蠶。

控制三眠蠶眠性的基因類型有:顯性三眠蠶（M3）和隱性三眠蠶(rt)，其中顯性三眠蠶基因又分為強顯性三眠基因和弱顯性三眠基因。諸星（1939）認為，當M3為強顯性三眠蠶基因時，其遺傳遵循顯性基因的典型遺傳規律，其遺傳屬性關系為：M3M4M5；下平（1947）研究發現，顯性三眠蠶由一個三眠蠶主基因M3和多個修飾基因支配[1]；錢荷英等研究認為，三眠蠶的眠性遺傳規律很復雜，除受眠性主效基因控制及性染色體上的早熟基因控制外，還在很大程度上受環境影響，夏蠶期用空調降溫以及由于葉質老化等不良營養因素均不利于三眠蠶的表現和誘發[2]；張鳳林等認為，三眠蠶的眠性遺傳并不是完全顯性，受環境因素影響很大，在環境條件發生改變時，尤其是在溫度低、葉質差、飼料含水率低時，三眠率顯著下降[3]；岳宣等發現，三眠蠶品種春季三眠率高，夏秋季受葉質的影響三眠率下降[4]。

本試驗通過對同質型三眠蠶雜交種和異質型三眠蠶雜交種用不同老嫩葉質的桑葉進行飼養，探索研究桑葉葉質老嫩對三眠蠶基因表現的影響。

1 試驗材料與方法

1.1 供試蠶品種

以我單位保育的中系強顯性三眠蠶品種（編號為：中3）、日系強顯性三眠蠶品種（編號為：日3）及中系四眠蠶品種（編為：中4）分別組配：

三眠蠶基因異質型雜交種：中4×日3、日3×中4

三眠蠶基因同質型雜交種：中3×日3、日3×中3

共四個雜交組合，供試驗用。

1.2 試驗時間和地點

2019年春季，四川省蘇稽蠶種場。

1.3 試驗方法

1.3.1 試驗設置：按照中4×日3（正交）、日3×中4（反交）、中3×日3（正交）、日3×中3（反交）四個雜交組合及偏老、適齡、偏嫩三個桑葉組合等因素，共設置12個試驗組，根據通常習慣，將“中×日”稱為正交，“日×中”稱為反交（下文同）；3齡數蠶時，每個試驗組設三個重復區，每區400頭蠶，具體方法見表1。

表1 試驗設置

1.3.2 催青收蟻。采用戊3胚子前22℃，戊3胚子后25.5℃的兩段簡易催青法催青，每個試驗組稱取蟻蠶1g混收1區。

1.3.3 用桑方法。偏老桑葉組各齡用下一個齡期的桑葉飼喂，1齡蠶用2齡葉飼養、2齡蠶用3齡葉飼養、3齡蠶用4齡葉飼養；適齡桑葉組各齡用適齡桑葉飼養；偏嫩桑葉組各齡用上一個齡期的桑葉飼喂，即1齡蠶用收蟻葉飼養、2齡蠶用1齡葉飼養、3齡蠶用2齡葉飼養。此方法用桑從收蟻開始，一直到三眠，眠性調查結束為止。

1.3.4 分區數蠶。3齡36h后數蠶，每個試驗組三區重復，每區數400頭蠶。

1.3.5 眠性調查。三眠就眠后，對所有試驗區逐區調查三眠蠶和四眠蠶頭數，計算三眠率。

2 試驗結果與分析

2.1 試驗結果：各試驗組三眠蠶發生情況見表2。

2.2 結果分析

用Excel中的TTEST函數對試驗數據進行組間差異性分析，百分數用“DEGREES(ASIN（SQRT））”公式進行反正弦轉化，分析結果如下：

表2 三眠率發生試驗結果

2.2.1 三眠基因同質型與異質型間差異

三眠基因同質型與異質型三眠率差異性分析結果見表3。

表3 三眠基因同質型與異質型三眠率差異性分析表

分析結果表明：在葉質偏老的情況下，無論正反交，同質型組合的三眠率都顯著高于異質型組合。在葉質適齡的情況下，正交同質型組合的三眠率極顯著高于異質型組合，反交同質型組合與異質型無顯著差異，無論正反交，三眠率都高于95%，達到生產實用水平。在葉質偏嫩的情況下，無論正反交，同質型組合與異質型組合的三眠率無顯著差異。

2.2.2 正反交差異正反交三眠率差異性分析結果見表4。

表4 正反交三眠率差異性分析表

分析結果表明：在葉質偏老的情況下，無論同質型組合或異質型組合，正交（中×日）的三眠率都顯著高于反交（日×中）；在葉質適齡的情況下，同質型組合的正交三眠率顯著高于反交，異質型正交與反交的三眠率無顯著差異；在葉質偏嫩的情況下，無論同質型組合或異質型組合，正反交的三眠率無顯著差異。

2.2.3 桑葉老嫩差異

飼喂老桑葉與飼喂嫩桑葉的三眠率差異性分析結果見表5。

表5 葉質老嫩三眠率差異性分析表

分析結果表明：三眠蠶為異質型基因時，無論正反交，飼喂嫩桑葉三眠率都極顯著高于飼喂老桑葉；三眠蠶為同質型基因時，無論正反交，飼喂嫩桑葉和飼喂老桑葉三眠率無顯著差異。

3 結論

3.1 基因型差異

三眠蠶雜交種是“三眠×四眠”的異質基因型時，桑葉老嫩對三眠表現穩定性有極顯著影響，容易誘發四眠蠶；三眠蠶雜交種是“三眠×三眠”的同質基因型時，桑葉老嫩對三眠表現穩定性沒有顯著影響。在選育三眠蠶品種時，應采用“三眠×三眠”的雜交組合方式，以減小環境因素對三眠穩定性的影響。

3.2 葉質影響

在葉質偏老的情況下，無論同質型組合或異質型組合，正交（中×日）的三眠率都顯著高于反交（日×中），說明以日系為母本的雜交種三眠穩定性更易受環境影響，尤其是日3×中4組合，三眠率只有61%，遠低于實用水平三眠率95%的標準。在生產中，三眠蠶品種用偏嫩桑葉進行小蠶共育，可有效防止四眠蠶發生。

3.3 影響三眠穩定性的因素

雜交種三眠蠶基因型、桑葉老嫩和雜交方式都影響三眠穩定性，“三眠×四眠”異質基因型、飼喂老桑葉、日三眠×中四眠等三因素共存時，對三眠穩定性的影響最大。

4 討論

中4×日3和日3×中4在飼喂偏老桑葉的情況下，三眠率差異非常大，是否與性染色體上的早熟基因有關。假設三眠蠶的表現是受顯性三眠蠶主效基因和Z染色體上的早熟基因共同控制，那么中4×日3的基因型雌用ZA/W、M3/M4表示，雄用ZA/Za、M3/M4表示，日3×中4的基因型雌用Za/W、M3/M4表示，雄用ZA/Za、M3/M4表示，而四眠蠶以雌為主（有待證實），就能比較合理的解釋正反交三眠率差異現象。如果這個假設和基因型成立，那么在三眠蠶品種選育過程中，要將控制三眠蠶的基因導入四眠品種，須以三眠材料為父本進行雜交，并以各雜交代的雄進行輪回交配。