綠原酸通過PI3K/Akt信號通路抑制異丙 腎上腺素誘導的心肌肥大

楊 洋， 李 覺

(同濟大學醫學院，上海 200092)

心肌肥大是心臟對多種心血管刺激，如激素、細胞因子和外界壓力等因素的刺激下的一種適應性反應，持續性的心肌肥大會造成心臟的失代償，并進一步發展為心肌缺血、心律失常和心力衰竭，甚至猝死，心肌肥大是心血管疾病發病率和死亡率增高的主要原因之一[1]。因此，探討心肌肥大的發病機制，尋求有效的防治措施具有重要意義。研究[2]表明，心肌肥大主要與細胞內磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信號通路激活密切相關。綠原酸(CGA)類物質是植物體內有氧呼吸過程中經莽草酸途徑產生的一種苯丙酸類次生代謝產物[3]，是咖啡酸與奎尼酸形成的縮酚酸[4]，具有較強的生物活性,具有抗氧化、抗病毒、抗腫瘤、免疫調節、降糖等多種作用[5]。CGA在異丙腎上腺素(ISO)誘導的心肌肥大中，通過NF-κB信號通路，提升細胞內活性氧(ROS)水平，從而起到抑制心肌肥大的作用[6]。在細胞凋亡調節過程中，糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)具有重要意義，而GSK-3β是PI3K/Akt信號通路的作用底物，激活的PI3K/Akt促進GSK-3β磷酸化，間接出現細胞凋亡減少。然而，PI3K/Akt信號通路是否參與CGA抑制心肌肥大少見報道。本研究通過H9c2大鼠心肌細胞建立ISO誘導的心肌肥大模型并應用PI3K/Akt特異性抑制劑LY294002來觀察PI3K/Akt信號通路在CGA預處理抑制心肌肥大中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

H9c2大鼠心肌細胞；胎牛血清、DMEM培養基購自HyClone公司;LY294002、p-Akt兔單克隆抗體、Akt兔多克隆抗體、山羊抗兔二抗；CCK-8細胞活力檢測試劑盒、SDS-PAGE凝膠試劑盒、SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液、ISO、CGA購自Sigma公司。……