脂多糖和維甲酸相關(guān)孤兒受體α在胸腔積液中的含量及臨床意義

楊 帆 沈 甜 龔凌雁 邱 青 王 琳 施軍衛(wèi)

結(jié)核性胸腔積液是肺結(jié)核的常見(jiàn)癥狀之一[1]，往往由結(jié)核性胸膜炎引起，對(duì)結(jié)核病患者危害較大。惡性胸腔積液也是臨床上惡性腫瘤常見(jiàn)的并發(fā)癥狀，往往是遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的征象之一，通常惡性胸腔積液患者的預(yù)期壽命為3個(gè)月～12個(gè)月[2-3]。因此，臨床上兩者的早期鑒別對(duì)于患者獲得及時(shí)有效的治療非常重要，我們對(duì)南通市第六人民醫(yī)院54例患者體內(nèi)胸腔積液中的脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)和維甲酸相關(guān)孤兒受體α(Retinoid-related orphan receptor-alpha, RORα)含量進(jìn)行了測(cè)定，并進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)道如下。

對(duì)象與方法

一、一般資料

資料選取2016年2月至2017年2月收治于南通市第六人民醫(yī)院ICU胸腔積液患者共54例，分為結(jié)核性胸腔積液組和惡性胸腔積液組。其中結(jié)核性胸腔積液組患者30例，男性26例，女性4例，中位年齡55歲；惡性胸腔積液組患者24例，男性21例，女性3例，中位年齡57歲。結(jié)核病患者臨床診斷根據(jù)肺結(jié)核診斷與治療指南[4]，均為臨床確診病例，惡性胸腔積液組患者最終經(jīng)病理診斷證實(shí)。

二、檢驗(yàn)方法

入院后常規(guī)行胸腔穿刺術(shù)留取胸腔積液，進(jìn)行常規(guī)、生化等檢查，標(biāo)本在-20 ℃冰箱中保存?zhèn)錅y(cè)。應(yīng)用ELISA雙抗體夾心法測(cè)定胸腔積液中LPS及RORα的含量(LPS及RORα檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京森貝伽生物科技有限公司)。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、兩組胸腔積液中LPS及RORα含量比較

結(jié)核性胸腔積液組LPS含量明顯高于惡性胸腔積液組(2 027.88±539.25vs. 1 018.45±395.33，P=0.000)，見(jiàn)圖1；結(jié)核性胸腔積液組RORα含量明顯高于惡性胸腔積液組(240.87±85.38vs. 171.86±46.32，P=0.000)，見(jiàn)圖2。

圖1 兩組患者胸腔積液中LPS的含量比較

圖2 兩組患者胸腔積液中RORA的含量比較

二、 兩組患者胸腔積液中LPS含量和RORα含量的相關(guān)性比較

結(jié)核性胸腔積液組和惡性胸腔積液組患者胸腔積液中LPS含量與RORα含量均呈正相關(guān)性(R=0.631，P=0.000)，見(jiàn)圖3。

討 論

胸腔積液由多種疾病引起，包括肺部感染、胸膜腫瘤轉(zhuǎn)移和結(jié)核性胸膜炎等[5-6]，后兩者目前在臨床上鑒別仍有很大難度。目前十種標(biāo)志物，包括癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)、腺苷脫氨酶(adenosine deaminase)、C-反應(yīng)性蛋白(C-reactive protein, CRP)及乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase)等已用于鑒別胸腔積液的性質(zhì)[6-18]，但其敏感性和特異性均不理想。盡管有有大宗病例報(bào)道，腺苷脫氨酶水平>35 U/ml對(duì)結(jié)核性胸腔積液診斷的敏感性和特異性分別為93%和90%[19]，也有報(bào)道對(duì)于胸腔積液中腺苷脫氨酶水平> 40 U/ml，診斷結(jié)核性胸膜炎的敏感性和特異性分別為80.3%～100%和60%～100%[13]。此外，有研究顯示在結(jié)核性胸腔積液中干擾素水平升高，通過(guò)薈萃分析顯示，干擾素診斷結(jié)核性胸腔積液的平均敏感性和特異性分別為89.0%和97.0%[20]。在胸腔積液的鑒別診斷中，癌胚抗原對(duì)于惡性胸腔積液診斷的特異性為100.0%，但敏感性小于30.0%。由于上述標(biāo)記物在診斷結(jié)核性胸腔積液中表現(xiàn)出來(lái)的低靈敏度和高變異性，因此，它們的臨床應(yīng)用相對(duì)有限，因而，尋找適用于胸腔積液鑒別診斷的有效生物標(biāo)志物是非常重要的。

圖3 兩組患者胸腔積液中LPS和RORα的含量相關(guān)性比較

LPS是革蘭氏陰性細(xì)菌的細(xì)胞壁組成成分，機(jī)體在受到革蘭氏陰性細(xì)菌感染時(shí)，LPS是革蘭氏陰性細(xì)菌主要的致病成分。胸腔積液中的LPS參與到肺結(jié)核局部免疫反應(yīng)和炎癥發(fā)生，本文發(fā)現(xiàn)，結(jié)核性胸腔積液中LPS含量明顯高于惡性胸腔積液，證實(shí)了上述觀點(diǎn)。有研究發(fā)現(xiàn)，RORα基因敲除的小鼠對(duì)卵白蛋白誘導(dǎo)的肺部炎癥不易感，過(guò)敏反應(yīng)受到明顯抑制[21]。同時(shí)，有文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)核性胸腔積液中RORα mRNA水平明顯高于非結(jié)核性胸腔積液[22]，本文結(jié)果文獻(xiàn)報(bào)告相一致相符。因此，我們考慮LPS和RORα含量的差異可能是各種疾病不同的發(fā)病機(jī)制所造成的。

結(jié)核性胸腔積液主要的發(fā)病機(jī)制是遲發(fā)型超敏反應(yīng)，炎癥導(dǎo)致胸膜血管通透性增加，致使大量蛋白質(zhì)和淋巴細(xì)胞進(jìn)入胸腔積液[23]。在此過(guò)程中，多種T細(xì)胞亞群(T cell, TC)參與到免疫應(yīng)答，包括輔助性TC-1，輔助性TC-2，輔助性TC-9，輔助性TC-17和輔助性TC-22，其分泌白介素-2(interleukin-2, IL-2)，IL-4，IL-6，IL-10，IL-17，IL-22，IL-27等多種細(xì)胞因子[24-27]。在此基礎(chǔ)上，我們發(fā)現(xiàn)LPS和RORα存在一定的相關(guān)性，推測(cè)可能存在LPS誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生RORα的機(jī)制，這需要實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)。

在本研究中，結(jié)核性胸腔積液中的LPS、RORα含量明顯高于惡性胸腔積液組，且兩者存在一定的相關(guān)性，我們考慮LPS與RORα可能是鑒別結(jié)核性胸腔積液與惡性胸腔積液的潛在生物標(biāo)志物。