人微小纖溶酶原cDNA在畢赤酵母中的高效表達及活性檢測

王 娜，何成霞，鄒 強，茍興華，陳 松，吳昊俁，蔡心析，許天恒

(成都大學，四川 成都 610106)

【研究意義】人纖溶酶原由791個氨基酸被分子內24個二硫鍵折疊形成多結構域的糖蛋白，其分子量約92～94 kDa。人纖溶酶原包含3個結構域：N端肽鏈、五環結構域和絲氨酸活性中心[1]。人纖溶酶原是絲氨酸類酶人纖溶酶的前體，主要在肝臟中合成，進而分泌到血液和細胞外液中[2]。人纖溶酶原的激活是纖溶級聯的中心事件，纖溶酶原被激活劑高效切割R561～V562的肽鍵激活形成纖溶酶，該物質可以分解體內的血塊[3]。纖溶酶還在金屬蛋白酶激活、傷口的愈合、器官移植、血管再生術、病原體和腫瘤細胞的侵襲等反應中發揮重要的作用[4-8]。人纖溶酶原是一條氨基酸鏈組成而人纖溶酶是由兩條鏈組成；重鏈包含N端肽鏈、五環結構域，輕鏈包含絲氨酸活性中心[9]。人微小纖溶酶原不僅分子量小、擴散快、易于大批制備、可長期貯存，并可避免交叉污染，對于眼科疾病及其并發癥的治療有很好的效果。【前人研究進展】尿激酶和葡激酶都可以作為纖溶酶原激活劑，這些激活劑本身就可以作為治療溶栓障礙的藥物[10]。而纖溶酶治療血栓疾病的效果最好。近期發現纖溶酶原在治療人玻璃體后脫落有很大的效果。由于栓塞局部血流阻斷，纖溶酶原不能持續補充，所以效率不高。如果注射人微小纖溶酶原到視網膜靜脈，可以使靜脈血栓溶解，血管再通，而達到治療效果。【本研究切入點】本文中通過去除人……