肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧透皮吸收的影響

趙雪琪 齊笑 管慶霞 馮宇飛 關(guān)楓 王艷宏

摘要：目的? 探討肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿透皮吸收的影響，為馬錢(qián)子相關(guān)制劑的開(kāi)發(fā)和減毒增效研究奠定基礎(chǔ)。方法? 以體外SD大鼠皮膚為滲透屏障，F(xiàn)ranz擴(kuò)散池法考察不同濃度（0.5%、1%、3%、5%、10%）肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧透皮吸收的影響;采用飽和溶解度法測(cè)定馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧在不同濃度肉桂油中的平衡溶解度;采用HPLC測(cè)定馬錢(qián)子總堿角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù);采用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)測(cè)定肉桂油對(duì)皮膚角質(zhì)層的作用。結(jié)果? 不同濃度肉桂油促透馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿的穩(wěn)態(tài)滲透速率（Jss）和增滲比（ER）分別為5.84～19.65 ?g/（cm2·h）、0.23～3.54，促透馬錢(qián)子總堿中士的寧的Jss和ER分別為1.36～18.38 ?g/（cm2·h）、0.19～2.55;馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿、士的寧在不同濃度肉桂油中的平衡溶解度分別為6.10～10.97 g/L、4.10～6.58 g/L;馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧的角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù)分別為0.74～1.39、0.24～0.35。結(jié)論? 不同濃度肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿中的馬錢(qián)子堿及士的寧均有一定促透作用，以1%肉桂油作用最佳，其機(jī)制可能為通過(guò)影響角質(zhì)層內(nèi)角蛋白改變角質(zhì)層結(jié)構(gòu)而促透。

關(guān)鍵詞：肉桂油;馬錢(qián)子總堿;馬錢(qián)子堿;士的寧;透皮吸收

中圖分類(lèi)號(hào)：R285.5? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A? ? 文章編號(hào)：1005-5304（2019）04-0078-07

馬錢(qián)子為馬錢(qián)子科植物馬錢(qián)Strychnos nux-vomica L.的干燥成熟種子，具有通絡(luò)止痛、散結(jié)消腫功效，用于治療風(fēng)濕痹痛、肌膚麻木、牙痛、防風(fēng)、頑癬、惡性腫瘤、重癥肌無(wú)力、截癱、小兒麻痹后遺癥等[1-4]。2015年版《中華人民共和國(guó)藥典》中馬錢(qián)子的含量測(cè)定指標(biāo)為馬錢(qián)子堿、士的寧，二者既是馬錢(qián)子的主要有效成分，也是有毒成分。如何既保留或增強(qiáng)馬錢(qián)子的藥理活性又降低其毒性，是馬錢(qián)子相關(guān)制劑開(kāi)發(fā)需解決的關(guān)鍵問(wèn)題。由于具有恒定的血藥濃度，可降低藥物毒性，經(jīng)皮給藥成為目前馬錢(qián)子制劑開(kāi)發(fā)的理想選擇[5]。研究表明，肉桂與馬錢(qián)子配伍可起到減毒作用[6-9]。肉桂油為肉桂的干燥枝、葉經(jīng)水蒸氣蒸餾提取的揮發(fā)油，是肉桂的主要成分，不僅具有驅(qū)風(fēng)健胃、抗真菌、解熱止痛作用，還可促進(jìn)藥物透皮吸收[5]。本試驗(yàn)以馬錢(qián)子堿和士的寧為評(píng)價(jià)指標(biāo)，測(cè)定馬錢(qián)子總堿在不同濃度肉桂油中的飽和溶解度，采用Franz擴(kuò)散池法探討不同濃度肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿經(jīng)皮滲透性的影響，進(jìn)一步測(cè)定馬錢(qián)子總堿角質(zhì)層/溶劑分配系數(shù)，采用傅里葉變換衰減全反射紅外光譜技術(shù)探討肉桂油對(duì)皮膚角質(zhì)層的作用，旨在通過(guò)探討肉桂油對(duì)馬錢(qián)子總堿透皮吸收的影響，為馬錢(qián)子相關(guān)制劑的開(kāi)發(fā)和減毒增效研究奠定基礎(chǔ)。

1? 儀器、試藥與動(dòng)物

AB265-S分析電子天平，上海梅特勒-托利多國(guó)際貿(mào)易有限公司;FA2004分析天平，上海良單儀器儀表有限公司;LC-20AD型高效液相色譜儀，日本島津公司;HC-188透皮儀、MSE-1600 Franz擴(kuò)散池，天津市矽新科技有限公司;SB-5200超聲波清洗機(jī)，寧波新芝生物科技股份有限公司;IRTracer-100傅里葉變換紅外光譜儀，SHIMADZO島津制作所;HZS-HA水浴振蕩器，哈爾濱市東聯(lián)電子技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司;TGL-16C臺(tái)式離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠;Vacucell真空干燥箱，德國(guó)MMM公司;V3 S025渦旋振蕩器，德國(guó)IKA公司。

馬錢(qián)子，哈爾濱市盛泰中藥飲片廠，批號(hào)20090165，經(jīng)黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院孫慧峰教授鑒定為馬錢(qián)科植物馬錢(qián)Strychnos nux-vomica L.的干燥成熟種子。馬錢(qián)子堿對(duì)照品（純度≥98%，批號(hào)B25064）、士的寧對(duì)照品（純度≥98%，批號(hào)B25079）中國(guó)食品藥品檢定研究院;三乙胺（天津市博迪化工有限公司，批號(hào)HG3121394），冰乙酸（天津市富宇精細(xì)化工有限公司，批號(hào)20160524），色譜甲醇（美國(guó)DIKMA），1，2-丙二醇（天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司），肉桂油（廣西平南縣六陳老謝肉桂場(chǎng)）。

清潔級(jí)雄性SD大鼠，體質(zhì)量220 g，黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（黑）2013-004。

2? 方法與結(jié)果

2.1? 馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧分析方法的建立

分別配制馬錢(qián)子堿和士的寧對(duì)照品溶液、馬錢(qián)子總堿提取物供試品溶液、體外透皮空白接受液及體外透皮試驗(yàn)接受液。考察方法的專(zhuān)屬性、線(xiàn)性關(guān)系、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性及回收率。

馬錢(qián)子總堿中馬錢(qián)子堿和士的寧HPLC分析條件為：采用DIKMA Diamonsil C18色譜柱（4.6 mm×250 mm，5 ?m），流動(dòng)相為甲醇∶水=24∶76（水∶冰乙酸∶三乙胺=230∶2.40∶0.30），流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm，柱溫30 ℃，進(jìn)樣量10 ?L。以濃度為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線(xiàn)性回歸，線(xiàn)性關(guān)系考察結(jié)果見(jiàn)表1，色譜圖見(jiàn)圖1。結(jié)果表明，馬錢(qián)子堿和士的寧的精密度RSD分別為0.42%、0.27%，24 h穩(wěn)定性RSD分別為0.87%、0.35%，重復(fù)性RSD分別為0.60%、0.33%，平均回收率分別為97.83%（RSD=0.28%）、98.65%（RSD=0.39%）。該分析方法的專(zhuān)屬性、精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、準(zhǔn)確性均良好。馬錢(qián)子堿和士的寧在提取物中的質(zhì)量濃度分別為0.04、0.10 g/L。

2.2? 不同濃度肉桂油對(duì)馬錢(qián)子堿和士的寧透皮吸收的影響

2.2.1? 供給液的制備

用丙二醇-水（80∶20）[8]配制成不含肉桂油及含肉桂油0.5%、1%、3%、5%、10%（V/V）的溶液各50 mL，超聲混勻，以3%氮酮作為陽(yáng)性對(duì)照。為確保其具有最大的熱力學(xué)活性和漏槽條件，分別取上述不同濃度肉桂油溶液配制成馬錢(qián)子堿和士的寧的飽和溶液作為供給液，低溫避光密閉保存?zhèn)溆谩?/p>