電化學發光免疫法與酶聯免疫吸附試驗法檢測人類免疫缺陷病毒的臨床價值

謝玉娜

福建省龍巖市人民醫院檢驗科 (福建龍巖 364000)

艾滋病是一種具有危害范圍廣、傳播速度快、潛伏期長等顯著特征的傳染病，人類免疫缺陷病毒(HIV)感染是其主要發病因素[1]。有效的監控、診斷HIV對抑制病毒傳播、治療與判斷預后具有積極意義。檢測HIV抗體是診斷艾滋病的常用方式，可有效判斷機體是否感染HIV，適用于初篩量大的單位和地區[2]。目前，雙抗夾心法為初篩HIV抗體的主要方式，但該方式操作復雜，有較長的檢測周期。電化學發光免疫(ECLIA)法與酶聯免疫吸附試驗(ELISA)法為常用的兩種檢測HIV的方式。本研究選取2016年1月至2018年8月在我院進行血液檢驗的樣本9 830份，旨在分析ELISA法與ECLIA法檢測HIV的臨床價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年8月我院收集的血液檢驗樣本9 830份，均在無菌下進行操作，并保存于低溫冰箱中待檢。

1.2 方法

(1)ECLIA法。將被檢驗品與一份生物抗生素抗HIV-1p24單克隆抗體共同孵育成抗原-抗體復合物，收集磁性粒子(用磁石)后清洗干凈，并完全去除未反應物質。將磁性粒子與ALP標記的抗HIV抗原的HIV抗體發生特異性反應，收集磁性粒子后清洗干凈，將未反應物質徹底去除。加入發光底物后實施攪拌，分散集聚的磁性粒子，加入清洗液，將磁性粒子上ALP以發光底物CDP-Star分解并發光，對其發光強度進行檢測，使用光強度以獲取待檢測物的HIV cutoff值。檢測儀器為SYS-MEX-HISCL-5000。檢測結果：A≥cutoff值為陽性；A1時，結果評定為陽性；<1時，判定為陰性。

1.3 臨床評價

對比ELISA法與ECLIA法檢測陽性率，并與確證中心檢測結果對照，分析兩種方式檢測結果的符合情況。

1.4 統計學處理

采用SPSS 21.0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 陽性檢出情況

9 830份樣本經ELISA法初診陽性28份，陽性率為0.285%，ECLIA法初診陽性26份，陽性率為0.264%,兩者比較,差異無統計學意義(χ2=0.446，P=0.504)。見表1。

表1 9 830份樣本經ELISA法與ECLIA法檢測陽性率比較

2.2 檢測結果的符合情況

ECLIA法臨界值分布中占比最高的為150～220，占陽性標本的80.77%(21/26)；ELISA法吸光度值分布中占比最高的為1.35～1.80，占陽性標本的53.57%(15/28)，兩種檢測方式比較，差異有統計學意義(χ2=4.488，P=0.034)。見表2。

表2 ELISA法與ECLIA法檢測結果的符合情況比較

3 討論

HIV可誘導艾滋病的發生，傳播速度快且潛伏期長，嚴重危害人類生命健康。早期準確診斷，制定合理的防控措施，是控制傳播、指導臨床用藥的最有力依據。檢測血清病毒抗體是國內對HIV感染診斷的主要方式，血清HIV抗體為重要指標，因大部分HIV感染可終身攜帶，體內HIV難以清除[3]。因此，檢測HIV抗體可有效判斷機體是否存在HIV，早期實施干預手段，避免HIV傳播。

國內大部分醫院常采用ELISA法檢測HIV，其需分離結合態的抗體或抗原與游離態的抗體，重復進行加樣和洗板操作，誤差率高，且酶標板存在孔間差異也會增加變異系數，操作步驟煩瑣，結果需1～2 h才可獲得，臨床判斷難度增大[4-5]。ECLIA法是在抗原或抗體上標記發光物質或酶，待免疫反應結束時，將氧化劑或酶底物加入，光電倍增管測量光強度，且光強度與復合體的濃度呈線性關系，利用其獲得待激測物品的含量[6]。ECLIA法綜合了磁性微珠包被技術、電化學發光技術、生物素-親和素技術等多種先進技術，檢測HIV抗體的靈敏度得到了大幅度提高，確保了檢測的自動化與標準化，顯著減少了批內、批間誤差，可獲得較為精確的檢測結果[7-8]。ECLIA法具有標記物有效期長、線性范圍寬、無有害污染、靈敏度高等優點，得到眾多學者的青睞。ELISA法與ECLIA法的OD/CO值和cutoff檢測陽性結果與確認結果，OD/CO值與臨界指數高低與確認檢測結果符合率呈正比。ECLIA法是在封閉的流動系統中實施檢測，可有效防止出現交叉感染，因操作簡便與試劑的穩定性高，20 min便能完成整個樣品的分析，測定結果準確可靠，與ELISA法相比，測定的線性范圍高3～4個數量級，可減少假陰性的發生，具有更好的檢測靈敏性、穩定性及重復性，可批量上機實施自動化分析檢測，可有效減少職業暴露，優越性突出。與傳統抗體分析法相比，ECLIA法可提前6 h發現HIV感染，可使診斷窗口期大幅度縮短。但該方式也存在一定的不足，如檢測成本相對較高，難以在部分基礎醫院普及；陰性結果中可能存在HIV暴露或感染，需送確證中心診斷確診。

綜上所述，ELISA法與ECLIA法均是檢測HIV的有效方式，臨床可根據實際情況選擇適宜的檢測方式。