全自動酶聯免疫分析儀與手工酶聯免疫法檢測結果的一致性

孫立慧

天津市濱海新區大港醫院檢驗科 (天津 300270)

醫療技術的不斷發展使得臨床檢測的標本大量增加，為適應這一需求，臨床標本的檢測均采用自動化程序化檢測儀器。全自動酶聯免疫分析儀逐漸代替手工檢測，越來越多的檢驗科免疫室將全自動酶聯免疫分析儀作為手工酶聯免疫檢測的輔助儀器[1]。但全自動酶聯免疫分析儀加樣系統采用的是非一次性Tef-lon涂層鋼針，易造成拖帶污染，對檢測結果的準確性造成一定影響。本研究采用全自動酶聯免疫分析儀與手工酶聯免疫法對血清標本進行檢測，分析檢測符合率，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年8月至2018年9月我院收治的患者80例，男49例，女31例；年齡25～75歲，平均(48.87±6.14)歲。本研究經醫院醫學倫理委員會批準，患者均知曉研究詳情，并簽署知情同意書，女性入選者未處于妊娠期或哺乳期，均未患有血液系統疾病。

1.2 儀器與試劑

儀器：全自動酶聯免疫分析儀(瑞士TECAN公司生產，型號為Tecan Freedom Evolyzer-2200)；酶標儀RT2100c(鄭州南北儀器設備有限公司生產)；W5000洗板機(天美科學儀器有限公司生產)。

試劑：甲型肝炎病毒抗體檢測試劑盒，上海科華生物工程股份有限公司提供，生產批號201608142；乙型肝炎病毒5項診斷試劑盒，北京萬泰藥業有限公司生產，生產批號201709212；人類免疫缺陷病毒抗體診斷試劑盒，上海科華生物工程股份有限公司生產，生產批號201610161；丙型肝炎病毒抗體診斷試劑盒，英科新創科技公司，生產批號2016102617；戊型肝炎2項診斷試劑盒，北京萬泰生物藥業股份有限公司，生產批號EG20160101；梅毒螺旋體抗體診斷試劑盒，北京萬泰生物藥業股份有限公司，生產批號N20161017。

1.3 方法

清晨空腹狀態下抽取5 ml靜脈血，3 500 r/min離心后取上層血清備測，分別采用手工酶聯免疫法和全自動酶聯免疫分析儀進行檢測，自動酶聯免疫分析儀操作程序嚴格按試劑說明書設置，設置檢測參數。手工檢測由操作熟練工作人員進行，并嚴格按照試劑說明書進行，確保檢測質量。觀察檢測結果。

1.4 臨床評價

觀察80例患者標本經手工酶聯免疫法與全自動酶聯免疫分析儀檢測的11項指標符合率。

2 結果

全自動酶聯免疫分析儀檢測的80例患者標本與手工酶聯免疫法對照，11項檢測結果符合率為96.59%。見表1。

3 討論

手工酶聯免疫法主要通過酶標記顯色檢測抗體或抗原是否存在的試驗，特異度和靈敏度較高，且易于操作，成本低廉，是臨床重要的檢測方法之一，在醫學檢驗領域應用廣泛[2]。手工酶聯免疫法檢測時，若檢測批次中不同反應孔試劑標本分配量、分配時間不一致，試劑反應溫度、溫育時間不同，可影響試劑盒檢測水平，從而造成檢測誤差。手工酶聯免疫法檢測的相關操作由操作者遵循儀器和設備的說明完近年來，隨著免疫檢測儀器的不斷更新，全自動酶聯免疫分析儀通過自動化酶聯免疫吸附試驗，增強不同反應孔試驗條件的一致性，在標本識別、加樣全過程中采用全自動條碼識別管理，溫育、洗板、測定通過軟件控制，可以避免人為誤差，最大限度減少假陰性、假陽性的發生，從而提高檢測水平。同時，自動化的操作也可減輕實驗室人員工作壓力。

表1 80例患者標本手工酶聯免疫法與全自動酶聯免疫分析儀的測定結果對照

注：HEV-IgG=戊型肝炎病毒IgG；HAV-IgM=甲型肝炎病毒IgM；HEV-IgM=戊型肝炎病毒IgM；HBeAb=乙型肝炎e抗體；HBcAg=乙型肝炎核心抗原；HIV=人類免疫缺陷病毒；TP=梅毒螺旋體；HCV=丙型肝炎病毒；HBsAg=乙型肝炎表面抗原；HBsAb=乙型肝炎表面抗體；HBcAb=乙型肝炎核心抗體成，但操作過程中若與陽性血清直接接觸，可造成交叉感染，由此可見，手工操作誤差較大，精密度不高，某一細節顧及不到易造成檢測結果出現假陰性、假陽性[3]。

本研究采用全自動酶聯免疫儀檢測結果顯示，全自動酶聯免疫儀假陰性檢出率較低，與臨床研究相似[4]。原因可能在于相較于人工操作，溫育溫度較為恒定，時間較為固定，在封閉環境下完成，且標準性與規范性較高，可降低交叉感染的可能性。全自動酶聯免疫儀試劑的洗板均一、加樣量準確，可確保樣本檢測質量[5]。本研究結果顯示，兩種檢測方法的檢測結果符合率高，提示全自動酶聯免疫分析儀精密度高，重復性好，可代替手工酶聯免疫法。但全自動酶聯免疫分析儀臨床操作過程中對工作人員要求較高，檢驗人員應熟悉儀器原理及性能，掌握日常保養方法，并嚴格遵守試劑盒與儀器說明操作[6]。