海南地方稻新種質(zhì)抗病蟲(chóng)鑒定與評(píng)價(jià)

唐清杰 嚴(yán)小微 唐力瓊 陳健曉 岑新杰

（1海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所/海南省農(nóng)作物遺傳育種重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海口571100；2廣東省農(nóng)科院植物保護(hù)研究所，廣州510640；第一作者：Flyingfoxtqj@163.com；*通訊作者：hkcenxinjie@163.com）

白背飛虱和褐飛虱是東亞、南亞、東南亞等地水稻的主要害蟲(chóng)[1]，2010-2011年，海南稻飛虱為害面積接近26.67萬(wàn)hm2。白葉枯病是水稻上主要的細(xì)菌性病害，在我國(guó)華南、華中和華東以及其他東南亞稻區(qū)經(jīng)常暴發(fā)成災(zāi)，是水稻高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)的重要限制因子[2-3]。稻瘟病也是華南水稻生產(chǎn)中主要的病害，近年來(lái)發(fā)生日益嚴(yán)重，選育和利用抗病品種是防治稻瘟病最經(jīng)濟(jì)、有效和安全的措施[4]。

為選育適合海南使用的抗病蟲(chóng)品種（組合），提高海南水稻生產(chǎn)水平，本研究于2017年對(duì)7個(gè)不同類型水稻新種質(zhì)進(jìn)行田間噴霧及接種抗性鑒定，以期為海南水稻抗病蟲(chóng)育種提供參考。

1 材料與方法

1.1 稻瘟病鑒定

1.1.1 供試品種和接種菌株

供試品種：山欄糯2號(hào)、山欄陸1號(hào)、華香、海農(nóng)紅1號(hào)、海豐黑糯2號(hào)、海恢1558、海恢227（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所提供），廣陸矮4號(hào)（感病對(duì)照品種，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供）。

人工接種菌株：選用華南稻區(qū)稻瘟病菌優(yōu)勢(shì)小種ZB和ZC群為主的菌株（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供）。

1.1.2 稻瘟病鑒定方法

苗期人工接種鑒定：選用近年來(lái)代表性生理小種，在秧苗3～4葉期開(kāi)展噴霧接種，接種時(shí)氣溫為25℃～28℃；接種后置于25℃～28℃的溫度條件下覆蓋黑暗保濕24 h，后定時(shí)噴霧保濕；7～10 d后等感病對(duì)照品種發(fā)病充分時(shí)調(diào)查葉瘟病級(jí)情況[5]。

穗頸瘟田間自然誘發(fā)鑒定：選擇霧多結(jié)露時(shí)間長(zhǎng)的常發(fā)病稻區(qū)為試驗(yàn)地，并選擇土質(zhì)肥沃、排灌方便的田塊為試驗(yàn)田。供試品種浸種催芽后選擇條播或移栽，四周種植感病品種，在抽穗前增施1次氮肥，有利發(fā)病。黃熟后調(diào)查穗頸瘟[5]。

病級(jí)劃分及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：葉瘟、穗頸瘟調(diào)查標(biāo)準(zhǔn)參照國(guó)家區(qū)試抗病性鑒定標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)綜合抗性指數(shù)開(kāi)展抗性評(píng)價(jià)，品種綜合抗性指數(shù)=葉瘟平均病級(jí)×25%+穗瘟發(fā)病率病級(jí)×25%+穗瘟損失指數(shù)病級(jí)×50%[5]。

1.2 白葉枯病鑒定

1.2.1 供試品種和接種菌株

供試品種：山欄糯2號(hào)、山欄陸1號(hào)、華香、海農(nóng)紅1號(hào)、海豐黑糯2號(hào)、海恢1558、海恢227（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所提供），金剛30（感病對(duì)照品種，廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供）。

菌系選用具有代表性的優(yōu)勢(shì)菌系Ⅳ型，在協(xié)本氏培養(yǎng)基斜面上培養(yǎng)48～72 h后，用無(wú)菌水洗下菌液，配制成3億株/mL的菌液[5]（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供）。

1.2.2 白葉枯病鑒定方法

人工接種法鑒定：晚稻秧齡控制在25 d內(nèi)；每個(gè)品種按序栽插1行，每行10叢，每叢1粒谷苗，株行距為17 cm×23 cm，每隔10個(gè)品種栽插感病品種作為對(duì)照；鑒定圃施肥水平高于一般大田；在水稻分蘗盛期剪葉接種，傍晚用手術(shù)剪刀蘸菌液剪去其中1行植株葉片頂部2 cm長(zhǎng)，每叢接5片葉[5]。接種20 d后，感病對(duì)照品種病情穩(wěn)定達(dá)9級(jí)時(shí)調(diào)查，分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)按照水稻種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)[6]。

表1 三化螟鑒定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

表2 褐飛虱鑒定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)

1.3 三化螟抗性鑒定

1．3．1 檢測(cè)品種和供試三化螟種群

供測(cè)品種：山欄糯2號(hào)、山欄陸1號(hào)、華香、海農(nóng)紅1號(hào)、海豐黑糯2號(hào)、海恢1558、海恢227（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所提供），TKM6（抗蟲(chóng)對(duì)照品種）和TN1（感蟲(chóng)對(duì)照品種）（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所保存）。三化螟種群2016年8月采自田間，待卵塊孵出幼蟲(chóng)后，將幼蟲(chóng)接在苗上。

1．3．2 檢測(cè)方法

于苗期進(jìn)行鑒定：將供測(cè)水稻品種催芽后播在50 cm×40 cm、深25 cm塑料盆，每個(gè)品種播20～30粒，3次重復(fù)，隨機(jī)排列。種子萌發(fā)后第10 d間苗，每個(gè)處理保留壯秧苗10～15株，當(dāng)秧苗長(zhǎng)至3～4個(gè)分蘗，接入三化螟初孵1齡幼蟲(chóng)，每叢10頭。接蟲(chóng)后7 d，調(diào)查枯心苗數(shù)，并計(jì)算枯心率（枯心率=枯心數(shù)/總苗數(shù)×100%）和校正枯心率（校正枯心率=參試品種枯心率/感蟲(chóng)對(duì)照品種枯心率×100%）。枯心苗率達(dá)到25%，試驗(yàn)有效。

1.4 稻飛虱抗性鑒定

1．4．1 檢測(cè)品種和供試褐飛虱種群

供測(cè)品種：山欄糯2號(hào)、山欄陸1號(hào)、華香、海農(nóng)紅1號(hào)、海豐黑糯2號(hào)、海恢1558、海恢227（海南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院糧食作物研究所提供），RATHU HEENATI（抗蟲(chóng)對(duì)照品種）和TN1（感蟲(chóng)對(duì)照品種）（廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所保存）。供試褐飛虱種群采自田間，實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)6代，為生物型1、2混合種群。

1．4．2 檢測(cè)方法

于苗期進(jìn)行鑒定：將供測(cè)水稻品種催芽后播在40 cm×30 cm、深10 cm的塑料盆，每個(gè)品種播30～40粒，3次重復(fù)，隨機(jī)排列。種子萌發(fā)后第4 d間苗，每行保留壯秧苗30株。當(dāng)秧苗長(zhǎng)至3片葉時(shí)，接入2～3齡褐飛虱若蟲(chóng)，平均每株苗接蟲(chóng)5頭。當(dāng)感蟲(chóng)對(duì)照品種TN1受害達(dá)到9級(jí)時(shí)對(duì)供測(cè)品種進(jìn)行評(píng)級(jí)。所得數(shù)據(jù)采用加權(quán)平均進(jìn)行總體測(cè)評(píng)。

2 結(jié)果與討論

2.1 稻瘟病抗性鑒定結(jié)果

從表3可見(jiàn)，對(duì)稻瘟病表現(xiàn)為抗的種質(zhì)為海恢1558，中抗的為海農(nóng)紅1號(hào)，其他種質(zhì)表現(xiàn)為中感、感和高感。

2.2 對(duì)白葉枯病抗性鑒定結(jié)果

從表4可見(jiàn)，對(duì)白葉枯病優(yōu)勢(shì)致病菌系Ⅳ型菌表現(xiàn)為抗病的種質(zhì)為海農(nóng)紅1號(hào)、華香和海恢227，表現(xiàn)中抗的為海恢1558和海豐黑糯2號(hào)，其他種質(zhì)皆表現(xiàn)為高感。

2.3 三化螟抗性鑒定檢測(cè)結(jié)果

當(dāng)感蟲(chóng)對(duì)照品種TN1達(dá)到100%的枯心率，抗蟲(chóng)對(duì)照品種TKM6為33．07%，鑒定有效。從表5可見(jiàn)，表現(xiàn)為抗三化螟的品種有恢復(fù)系海恢1558和海恢227，校正枯心率21%～40%；表現(xiàn)中抗的品種為海豐黑糯2號(hào)，校正枯心率41%～60%；表現(xiàn)感蟲(chóng)的品種為華香，校正枯心率61%～80%；表現(xiàn)高感的為海農(nóng)紅1號(hào)、山欄糯1號(hào)和山欄陸1號(hào)，校正枯心率達(dá)到100%。

表3 稻瘟病抗性鑒定結(jié)果

表4 白葉枯病抗性鑒定結(jié)果

表5 三化螟鑒定結(jié)果

表6 褐飛虱鑒定抗性鑒定結(jié)果

2.4 稻飛虱抗性鑒定結(jié)果

從表6可見(jiàn)，山欄糯2號(hào)受害等級(jí)為5～9級(jí)，以9級(jí)為主，總體抗性評(píng)級(jí)為高感；山欄陸1號(hào)受害等級(jí)全部為9級(jí)，總體抗性評(píng)級(jí)為高感；華香受害等級(jí)為5級(jí)和9級(jí)，總體抗性評(píng)級(jí)為高感；海農(nóng)紅1號(hào)受害等級(jí)分布于5級(jí)和9級(jí)，總體抗性評(píng)級(jí)為高感；海豐黑糯2號(hào)受害等級(jí)為5級(jí)和9級(jí)，以5級(jí)苗為多，總體抗性評(píng)級(jí)為感；海恢1558受害等級(jí)為5～9級(jí)，以5級(jí)苗為多，總體抗性評(píng)級(jí)為感；海恢227受害等級(jí)分布于5級(jí)和9級(jí)，以5級(jí)苗為多，總體抗性評(píng)級(jí)為感。

3 結(jié)論與討論

從7個(gè)供測(cè)的水稻新種質(zhì)的抗性鑒定結(jié)果來(lái)看，稻瘟病抗性種質(zhì)1個(gè)，中抗1個(gè)。白葉枯病優(yōu)勢(shì)致病菌系Ⅳ型菌抗性種質(zhì)3個(gè)，中抗種質(zhì)2個(gè)。三化螟抗性種質(zhì)2個(gè)，皆為恢復(fù)系，中抗1個(gè)。沒(méi)有發(fā)現(xiàn)抗稻飛虱材料。

雖然供測(cè)材料較少，但雙抗甚至三抗的種質(zhì)卻很多；恢復(fù)系海恢1558抗稻瘟病和三化螟，中抗白葉枯病；恢復(fù)系海恢227抗白葉枯病和三化螟；紅米海農(nóng)紅1號(hào)抗白葉枯病，中抗稻瘟病；海豐黑糯2號(hào)中抗白葉枯病和三化螟。這些新種質(zhì)或者品種在海南稻區(qū)推廣種植能有效抵御病蟲(chóng)害的發(fā)生。