炎癥性腸病活動期患者腸黏膜白細胞介素-22結(jié)合蛋白及細胞因子表達研究

李息友 邱曉敏 曹杰

【摘要】?目的?研究炎癥性腸病活動期患者腸黏膜白細胞介素-22結(jié)合蛋白（IL-22BP）及細胞因子的表達狀況。方法?選取2016年6月至2018年6月接診的65例炎癥性腸病患者進行研究。其中克羅恩病組（CD組）30例，潰瘍性結(jié)腸炎組（UC組）35例。并選取同期接受治療的結(jié)腸息肉患者30例作為對照組，檢測分析三組腸黏膜IL-22BP及細胞因子表達水平。結(jié)果?CD組及UC組活動期患者的IL-22BP mRNA及蛋白水平均明顯高于緩解期患者（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05）。CD組及UC組活動期患者的IL-6、IL-8及TNF-α水平均明顯高于緩解期患者（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05）。結(jié)論?炎癥性腸病活動期患者腸黏膜IL-22BP及細胞因子表達水平明顯升高，檢測各項指標有助于預(yù)測患者活動期狀況，值得臨床推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】?炎癥性腸病;活動期;細胞因子;白細胞介素-22結(jié)合蛋白

中圖分類號：R574???文獻標志碼：A???DOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2019.02.005

【Abstract】?Objective?To study the expression of interleukin-22 binding protein（IL-22BP） and cytokines in intestinal mucosa of patients with inflammatory bowel disease in active stage.Methods?65 patients with inflammatory bowel disease from June 2016 to June 2018 were selected for the study，with 30 cases in Crohns disease group（CD group） and 35 cases in ulcerative colitis group（UC group）.At the same time，30 patients with colonic polyps were selected as control group.And then，the expressions of IL-22BP and cytokines in the intestinal mucosa of the three groups were detected and analyzed.Results?The levels of IL-22BP in the CD group and the UC group in active stage were significantly higher than those in remission stage（P<0.05），and were all significantly higher than those in the control group（P><0.05）.In addition，the levels of IL6，IL8 and TNFα in active stage in the CD group and the UC group were significantly higher than those in remission stage（P><0.05），and were all significantly higher than those in the control group（P><0.05）.Conclusion?The expressions of IL-22BP and inflammatory cytokines in intestinal mucosa of patients with inflammatory bowel disease in active stage increase significantly.The detection of various indicators is helpful to predict the status of patients in

active stage，and it is worth popularizing in clinical practice.

【Key words】?inflammatory

bowel disease;active stage;cytokines; IL-22BP

炎癥性腸病屬于慢性非特異性腸道疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎（UC）和克羅恩病（CD）。炎癥性腸病的發(fā)病機制及病因尚不明確，臨床研究認為常與宿主的基因及消化道炎癥等密切相關(guān)[1～2]。近年來，相關(guān)研究顯示，白細胞介素-22結(jié)合蛋白（IL-22BP）在維持腸黏膜屏障功能穩(wěn)定性方面發(fā)揮著重要作用[3]。為進一步研究炎癥性腸病活動期患者腸黏膜IL-22BP表達水平，筆者對65例炎癥性腸病患者進行研究，現(xiàn)報道如下。

1?資料與方法

1.1?一般資料?選取2016年6月至2018年6月接診的65例炎癥性腸病患者進行研究。其中克羅恩病組（CD組）30例，潰瘍性結(jié)腸炎組（UC組）35例。并選取同期在我院接受治療的結(jié)腸息肉患者30例作為對照組進行分析。CD組30例患者中，活動期12例，男7例，女5例，年齡為25～37歲，平均（33.34±4.52）歲;緩解期18例，男10例，女8例，年齡為26～38歲，平均（34.12±4.39）歲。UC組35例患者中，活動期15例，男8例，女7例，年齡為23～39歲，平均（31.97±5.04）歲;緩解期20例，男12例，女8例，年齡為24～40歲，平均（33.29±5.59）歲。對照組30例，其中男17例，女13例，年齡為28～40歲，平均（36.23±5.02）歲。三組患者的一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2?納入和排除標準?納入標準：①患者均符合炎癥性腸病的診斷標準[4];②患者均簽署知情同意書，自愿入組;③近期均未使用過炎癥性腸病的相關(guān)治療藥物。排除標準：診斷為急性感染性結(jié)腸炎、放射性腸炎等其他出現(xiàn)膿血便的腸道疾病;②合并有大出血、腸穿孔及癌變的患者;③妊娠或者哺乳期婦女;④診療依從性較差，不能配合檢查的患者。

1.3?研究方法?（1）首先，留取炎癥性腸病患者病變較為明顯位置的腸黏膜組織，另外選取對照組患者30例（留取距離息肉5 cm以上位置的結(jié)腸和回腸組織）。每組的腸黏膜選取2處組織，1份置于液氮，并置于-80℃的冰箱中保存?zhèn)溆?。?份則采用甲醛溶液進行固定，并且應(yīng)用石蠟進行包埋。（2）采用實時熒光定量PCR法對腸黏膜中的IL-22BP mRNA進行檢測，將腸黏膜組織進行充分研磨，并采用RNA提取劑對總的RNA進行提取。采用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA，并計算IL-22BP mRNA的相對表達量。采用免疫組化法對IL-22BP蛋白表達情況進行檢測，對腸黏膜進行常規(guī)石蠟包埋，選用4 μm進行連續(xù)切片。常規(guī)封片后，在光學(xué)顯微鏡下進行觀察，對陽性細胞進行計數(shù)，并觀察染色強度。（3）結(jié)腸鏡下切取患者的腸黏膜進行活檢，并對黏膜進行免疫組化檢查。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）對IL-6、IL-8及TNF-α水平進行檢測分析。

1.4?觀察指標?檢測分析三組腸黏膜IL-22BP及細胞因子（IL-6、IL-8及TNF-α）表達水平。

1.5?統(tǒng)計學(xué)方法?采用SPSS 18.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)處理，W檢驗進行正態(tài)性檢驗，計量資料符合正態(tài)分布，以均數(shù)±標準差（±s）表示，組間比較采用兩獨立樣本t檢驗，檢驗水準：α=0.05，雙側(cè)檢驗。

2?結(jié)??果

2.1?不同組別IL-22BP mRNA及蛋白表達水平比較?CD組及UC組活動期的IL-22BP mRNA及蛋白表達水平均明顯高于緩解期患者（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05）。見表1。

2.2?不同組別炎癥性腸病患者細胞因子水平比較?CD組及UC組活動期的IL-6、IL-8及TNF-α水平均明顯高于緩解期患者（P<0.05），且均明顯高于對照組（P<0.05）。見表2。

3?討??論

目前，臨床研究顯示炎癥性腸病與腸道微生態(tài)、宿主基因、環(huán)境以及腸道炎癥等多種因素相關(guān)[5]。多種細胞因子及機體免疫反應(yīng)的異常均與該病的發(fā)病密切相關(guān)。因此，深入分析炎癥性腸病患者的腸道黏膜炎癥機制，進一步分析患者腸道炎癥狀況，進而判斷患者病情狀況，分析活動期及緩解期炎癥性腸病患者的不同炎癥狀況，成為目前臨床研究的重點[6]。

近年來，多位學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)腸道黏膜IL-22BP mRNA及蛋白的高表達與炎癥性腸病患者的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[7～8]。IL-22能夠通過促進腸道上皮細胞分泌較多的黏蛋白及抗菌肽，從而促進腸道上皮細胞的增殖，從而維持患者腸黏膜功能的穩(wěn)定性[9]。本研究顯示，炎癥性腸病患者活動期的IL-22BP mRNA及蛋白水平均明顯高于緩解期患者，且均明顯高于正常人。證實了炎癥性腸病患者IL-22BP mRNA及蛋白水平的高表達狀況，且能夠反映患者的病情程度。

IL-6、IL-8及TNF-α是臨床中常用的檢測患者促炎因子狀況的指標，常用于評估患者的腸道黏膜炎癥狀況[10]。本研究還對患者腸黏膜的細胞因子（IL-6、IL-8及TNF-α）水平進行了檢測，結(jié)果顯示，炎癥性腸病患者活動期的IL-6、IL-8及TNF-α水平均明顯高于緩解期患者，且活動期及穩(wěn)定期患者的細胞因子水平均明顯高于結(jié)腸息肉患者。

綜上所述，炎癥性腸病活動期患者腸黏膜IL-22BP及細胞因子（IL-6、IL-8及TNF-α）表達水平會明顯升高，對于各項指標的檢測有助于預(yù)測患者活動期狀況，值得在臨床推廣應(yīng)用。

參?考?文?獻

[1]?蔣科芳，范一宏.血清學(xué)標志物與炎癥性腸病：血清標志物盛行及對炎癥性腸病診治價值[J].世界華人消化雜志，2018，26（25）：1487-1493.

[2]?吳開春，梁?潔，冉志華，等.炎癥性腸病診斷與治療的共識意見（2018年·北京）[J].中國實用內(nèi)科雜志，2018，38（9）：796-813.

[3]?王燕琴.炎癥性腸病發(fā)病機制研究新進展[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2018，18（58）：76-78.

[4]?馬?靜，陳達凡，宛新建.IL-22BP在活動期炎癥性腸病患者腸黏膜中的表達及其意義[J].胃腸病學(xué)，2018，23（4）：216-220.

[5]?蔣學(xué)佩，吳小麗，黃智銘.Treg細胞和Th17細胞在炎癥性腸病治療中的作用[J].胃腸病學(xué)，2018，23（2）：109-112.

[6]?周?艷.炎癥性腸病患者腸道菌群變化與發(fā)病機制的相關(guān)性[J].醫(yī)療裝備，2017，30（2）：17-18.

[7]?張?婷，崔伯塔，張發(fā)明.細胞因子在炎癥性腸病治療中的研究進展[J].胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志，2016，25（7）：724-728.

[8]?孫欽娟，李?琴，宛?東，等.細胞因子在炎癥性腸病患者腸黏膜中表達的分析[J].胃腸病學(xué)，2018，23（1）：13-17.

[9]?郭雪坤，胡小玉.炎癥性腸病的發(fā)病機理與免疫治療的研究進展[J].生命科學(xué)，2017，29（9）：873-882.

[10]?孟曉弘，季明昉，方?一，等.炎癥性腸病患者血清巨噬細胞極化相關(guān)細胞因子水平及其意義[J].胃腸病學(xué)，2015，20（9）：538-541.

（收稿日期：2018-12-19?修回日期：2019-01-26）

（編輯：梁明佩）