伯樂樹種子育苗及扦插技術試驗研究

許晶 韋建杏 李連珠 陳侯鑫

摘要：為研究伯樂樹種子物理性狀，和種子繁育及枝條扦插的影響因素，篩選最佳的種子繁育和枝條扦插方法。選取一定的伯樂樹種子，測定其長寬、千粒重、含水量等生理指標，并在河沙、紅土、表層土基質中進行了種子繁育及枝條扦插試驗。結果表明，在沙土中種子發芽率最高，達到46.67%;去皮種子發芽率達36.7%，不去皮種子發芽率為0。在扦插試驗中，紅土和全木質化枝條是扦插成活率最高的2個條件。沙土和全木質化枝條扦插是愈傷組織形成率最高的2個條件。

關鍵詞：伯樂樹;種子;育苗;扦插

伯樂樹（Bretschneidera sinensis）是中國特有樹種、國家一級保護樹種，在研究被子植物的系統發育和古地理、古氣候等方面都有重要科學價值。2003年3月，伯樂樹在海南首次發現并記錄，僅發現7株，長期以來，伯樂樹更新困難，處于瀕危狀態，急需對分布在海南的伯樂樹種群進行原地和遷地保護。伯樂樹根系發達，可選作低山營造混交林和行道綠化樹種，并且伯樂樹樹干通直，紋理直，色紋美觀，為優良家具用材，具有潛在開發價值。因此，在保護海南伯樂樹現有野生資源的基礎上，開展伯樂樹的人工培育具有非常重要的科研價值和現實意義。

近年來，國內外的研究者們開展了大量的引種栽培及播種繁殖的研究工作。喬琦等研究了伯樂樹1年生更新幼苗的死亡原因和保育策略[1];郭治友等研究了伯樂樹組織培養和快速繁殖技術，篩選出伯樂樹最佳芽誘導、增值生根培養基及煉苗基質[2]。伯樂樹種子育苗是重要的研究內容，李坊貞等研究伯樂樹種子萌發的基本參數及根的組織分化過程[3];康華靖等測定了3個不同地區的伯樂樹種子形態指標，并分別設置3種貯藏方式，結果表明，以濕沙低溫下儲藏的種子的發芽率和發芽勢為最高[4];本文通過伯樂樹種子育苗與扦插育苗，以期增加伯樂樹資源，并為進一步的種植應用奠定基礎。

1 試驗材料

伯樂樹種子種源在海南鸚哥嶺;試驗器材：電子天平、Ⅰ型游標卡尺、烘干箱和水浴鍋;試驗試劑：TTC試劑、高錳酸鉀（有效成分：80%）;試驗基質：河沙、紅土、表層土。

伯樂樹在鸚哥嶺及湖南伯樂樹種苗的枝條，選取健壯、無病蟲害的枝條，按試驗要求剪成相應長度（10～15cm），上切口平剪，下切口斜剪，剪口平滑，插條不留葉。15根/捆，為1個處理。

2 試驗方法

2.1 種子物理性狀測定試驗

去除伯樂樹果皮、假種皮和雜質后，根據《林木種子檢驗規程》（GB277

2.1 999），測定伯樂樹種子的物理性狀。

2.1.1 種子長寬測定方法。隨機選取300粒種子，每個重復100粒。用型號為Ⅰ型游標卡尺（GB/T1214.2-1996）分別測量其長和寬，以種子縱軸長度為長，橫向最大寬為其寬，測量伯樂樹種子的長寬。

2.1.2 種子千拉重測定方法。先對伯樂樹種子進行凈種，除去果皮、假種皮和雜質，隨后以對角取樣法分別從種子中隨機取5×100粒種子，每個重復100粒，分別稱重，計算種子百粒重，乘以10求得千粒重。

2.1.3 種子含水量的測定。選取50粒伯樂樹種子稱量后放入105℃烘箱中烘24h后，取出在干燥器里冷卻30～45min后稱重，用前后重量差與樣品鮮重的比值求得種子含水量。重復3次。

2.1.4 種子活力的測定方法。測定方法采用TTC染色法：將各種源種子分別用溫水（3090）浸種12h，使種子充分吸脹后利于剝除假種皮。每個種源隨機取種子25粒，剝除假種皮后沿其種胚平行切開，每25粒為1次重復，每種源重復3次。然后將準備好的種子浸泡于TTC試劑中在恒溫培養箱中（359C，黑暗）保溫染色3h。染色結束后倒出TTC溶液，用清水將種子沖洗2次后觀察種胚被染色的情況，統計被染色的種子數。

染色標準：凡種子胚根、下胚軸及子葉全部染色或者胚根、下胚軸染色，子葉大部分染成紅色的即為具有活力的種子：種胚不被染色的為死種子。

2.2 種子繁育試驗

2.2.1 種子發芽率的測定方法。選取500粒伯樂樹種子，去除雜質，用多菌靈（有效成分：80%，濃度：5%）對種子進行殺菌消毒12h，沖洗干凈后播種至盛放已用高錳酸鉀（有效成分：80%，濃度：10%）消毒河沙的規格為330mm花盆中，置于室內，每7d觀測，以種子萌發后，長出子葉為發芽標準。然而連續14d內每天發芽粒數不超過供試種子粒數的1%為結束發芽。設置3個重復，統計發芽率和發芽勢。

發芽率（%）=正常發芽的種子數/供試種子總數×100。

發芽勢（%）=種子發芽數達到高峰時的正常發芽種子的總數/供測種子總數×100。

2.2.2 不同基質的發芽率試驗。選取120粒伯樂樹種子，去除雜質，用多菌靈（有效成分：80%，濃度：5%）對種子進行殺菌消毒12h，沖洗干凈后播種至盛放已用高錳酸鉀（有效成分：80%，濃度：10%）消毒河沙的規格為330mm花盆中，置于溫室內，每7d觀測，以種子萌發后，長出子葉為發芽標準。然而連續14d內每天發芽粒數不超過供試種子粒數的1%為結束發芽。統計發芽率和發芽勢。

2.2.3 伯樂樹枝條扦插試驗。本試驗15根全木質化枝條為1個處理，插入培養箱中，土質分別為表土、沙土、紅土。扦插深度為插穗長度的1/3，插后用手壓實，澆透水。觀察其成活率、愈傷組織形成率。

再采用15根枝條為1個處理，不同處理枝條分別為嫩枝、半木質、全木質。插入培養箱中，土質分別為紅土。扦插深度為插穗長度的1/3，插后用手壓實，澆透水。觀察其成活率、愈傷組織形成率。

成活率（%）=存貨枝條數/總枝條數×100;愈傷組織形成率（%）=形成愈傷組織的枝條數/總枝條數×100。

3 結果與分析

3.1 伯樂樹種子物理性狀

伯樂樹種子千粒重為1234.5～1408.8g，伯樂樹去假種皮千粒重為973.4～1121.9g，其種子平均長度為15.98mm，種子平均寬度為12.45mm，平均含水率47.31%，種子活力測定出種子正常的百分比為95%～100%。

3.2 種子繁育試驗

3.2.1 帶假種皮種子和去假種皮種子發芽率和發芽勢的比較。帶假種皮伯樂樹種子的發芽勢和發芽率均為0，去皮種子的發芽勢和發芽率分別為36.67%和50.00%（表2），經方差分析表明，去皮與帶皮種子的發芽率和發芽勢均具有顯著性差異，表明伯樂樹去假種皮有助于種子的萌發。

3.2.2 不同基質下種子發芽率的比較。不同基質條件下，種子發芽率均在49～63天達到穩定。其中，河沙內播種的種子發芽率最高，達到46.67%。表土發芽率較低，達到16.67%。紅土最低，只有3.33%。經方差分析表明，3種基質內的扦插率相互之間均具有顯著性差異。

3.3 枝條扦插試驗

3.3.1 不同基質條件類型時扦插存活率的影響。不同基質類型條件下，伯樂樹在紅土的扦插成活率最高，為73%;表土的扦插成活率最低，為61%。多重比較中，表土、沙土和紅土3種條件沒有顯著性差異，說明表土、沙土和紅土對伯樂樹的扦插成活率沒有顯著性影響。

3.2.2 不同木質化的枝條對扦插成活率的影響。嫩枝的伯樂樹扦插成活率（0%）<半木質化（61%）<全木質化（75%），顯然全木質化的伯樂樹成活率最高。多重比較中，嫩枝與半木質化和全木質化有顯著性差異，而半木質化與全木質化無顯著性差異，所以半木質化和全木質化對伯樂樹扦插的成活率有顯著性影響。

3.2.3 不同基質類型對扦插愈傷組織形成率的影響。表土條件下的伯樂樹愈傷組織形成率表土（5.7%）<紅土（7.3%）<沙土（14.7%），由此可見，沙土條件下伯樂樹愈傷組織的形成率最大且為14.7%，而表土條件愈傷組織形成率較低僅為5.7%。多重比較中，表土條件和紅土條件無顯著性差異，而與沙土條件存在顯著性差異，說明沙土條件對愈傷組織形成率有顯著性影響。

3.2.4 不同木質化枝條對扦插愈傷組織形成率的影響。嫩枝的伯樂樹扦插成活率（0%）<半木質化（13.3%）<全木質化（14.7%），嫩枝的愈傷組織形成率為0，而全木質化的愈傷組織形成率為14.7%。多重比較中，半木質化與全木質化無顯著性差異，而木質化與嫩枝有顯著性差異，說明半木質化和全木質化對伯樂樹愈傷組織形成率有顯著影響。

4 結論與討論

4.1 種子成分含量測定

張東生等研究發現伯樂樹新鮮果實平均重量為139，最大重量為18.92 g，最小為8.398;種子（含假種皮）橢圓形，平均長度為1.84cm，平均寬度為1.3 3cm;新鮮種子平均粒重為2.679，最大重量為5.529，最小重量為1.61g;千粒重為2 679g[5]。通過本試驗，測得伯樂樹種子千粒重為1234.5～1408.89，伯樂樹去假種皮千粒重為973.4～1121.08，其種子平均長度為15.98mm，種子平均寬度為12.45mm，平均含水率47.31%，種子活力測定出種子正常的百分比為95%～100%。本試驗測量的樣本量較少，測量指標不夠，應該繼續研究。

4.2 種子發芽試驗

帶假種皮伯樂樹種子的發芽勢和發芽率均為。，去皮種子的發芽勢和發芽率分別為36.67%和50.00%（表），伯樂樹去假種皮有助于種子的萌發。不同基質條件下，表土內播種的種子發芽率最高，達到46.67%。沙土最低，只有3.33%。表明表土有利于種子發芽。而吳彩新研究發現，伯樂樹種子內缺乏萌發促進物質和酶活性低致其種子具深休眠特性，自然條件下萌發率僅2%～4%[6]。故而為了提高發芽率，伯樂樹種子需要催芽。武銘凱等研究發現機械破裂種皮、清水浸泡36h、種臍向下的方式最好，出土時間最早（10d）、出土天數最少（3d），種子發芽率最高，平均發芽率為86%1'10相較而言，本試驗設置的考慮因素不夠，忽視了種臍朝向，可能會對試驗結果產生影響。

4.3 枝條扦插試驗

不同扦插基質中紅土的扦插成活率最高，達73%。沙土的愈傷組織形成率最高達14.7%。不同木質化枝條扦插中，全木質化枝條成活率和愈傷組織形成率都是最高，分別達75%和14.7%。嫩枝的扦插成活率和愈傷組織形成率都為0。而陳輝等研究發現，扦插時根莖粗度以0.5cm以下為好，發根率高，萌芽率也強[8]。本試驗中未將根莖粗度作為變量參考，可能會對試驗結果產生一些影響。

參考文獻：

[1]喬琦，秦新生，邢福武，等.珍稀植物伯樂樹一年生更新幼苗的死亡原因和保育策略[J].生態學報，2011，31（16）：4709-4716.

[2]李坊貞，劉仁林，劉燕.伯樂樹種子萌發與根組織分化規律的研究[J].南師范學院學報，2008，29（3）：95-98.

[3]康華靖，陶月良，陳子林，等.伯樂樹種子不同條件貯藏下前后生理比較[J].中國野生植物資源2011.30（1）：35-39.

[4]郭治友，龍應霞，肖國學.鐘萼木的組織培養和快速繁殖[J].植物生理學報，2007，43（1）：127-127.

[5]張冬生，謝金蘭，范劍明，等.伯樂樹播種育苗技術探討[J].園藝與種苗，2017（01）：40-42.

[6]吳彩新，曾昭佳.伯樂樹栽培技術及應用[J].現代園藝，2013（24）：46-47.

[7]伍銘凱，楊漢遠，龍舞，等.伯樂樹種子育苗試驗[J].貴州林業科技，2006（04）：39-41+38.

[8]陳輝，王正剛.伯樂樹根插育苗試驗[J].江西林業科技，1986（02）：12-13.