忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液質(zhì)量評(píng)價(jià)研究

范帥帥　田偉　王相　馮玉　李軍山　牛麗穎

摘要：目的 制備忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液，并建立其質(zhì)量控制方法。方法 按照標(biāo)準(zhǔn)煎液制備要求制備15批忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液，以綠原酸、咖啡酸、馬錢苷作為定量檢測(cè)指標(biāo)，計(jì)算出膏率、含量和轉(zhuǎn)移率，并建立超高液相色譜特征圖譜分析方法。結(jié)果 15批忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液的出膏率范圍為6.44%～11.95%，綠原酸、咖啡酸、馬錢苷含量范圍分別為12.17～22.61 mg/g、2.75～5.12 mg/g、21.71～40.32 mg/g，轉(zhuǎn)移率范圍分別為28.13%～52.25%、53.93%～100.15%、40.04%～74.36%。采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012版）》軟件進(jìn)行分析和相似度評(píng)價(jià)，標(biāo)定了10個(gè)共有特征峰，并指認(rèn)綠原酸、咖啡酸、馬錢苷3個(gè)色譜峰。通過與對(duì)照?qǐng)D譜比對(duì)，相似度均高于0.96。結(jié)論 本研究建立的忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法準(zhǔn)確、穩(wěn)定、重復(fù)性良好，可為忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量控制提供參考。

關(guān)鍵詞：忍冬藤；飲片；標(biāo)準(zhǔn)煎液；配方顆粒；轉(zhuǎn)移率；出膏率；含量測(cè)定；特征圖譜

中圖分類號(hào)：R284.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1005-5304（2019）03-0082-06

Abstract： Objective To prepare standard decoction of Lonicerae Japonicae Caulis decoction pieces； To establish quality control method. Methods Fifteen batches of standard decoction of Lonicerae Japonicae Caulis decoction pieces were prepared according to the standardization method. With chlorogenic acid， caffeic acid and loganin as the detection indices， the extraction rate， content， and transfer rate were calculated and the UPLC characteristic chromatograms analysis method was established. Results According to the measurement of 15 batches of standard decoction of Lonicerae Japonicae Caulis decoction pieces， the extractum rate was at the range of 6.44%–11.95%. The contents of chlorogenic acid， caffeic acid and loganin were 12.17–22.61 mg/g， 2.75–5.12 mg/g and 21.71–40.32 mg/g， respectively. The transfer rates were 28.13%–52.25%， 53.93%–100.15% and 40.04%–74.36%， respectively. Besides， Similarity Evaluation System for Chromatographic Fingerprint of TCM （2012 edition） was used to analyze and compare the characteristic chromatograms. Ten common peaks were determined， and three chromatographic peaks of chlorogenic acid， caffeic acid， and loganin were identified. The similarity was over 0.96 by comparing with the control map. Conclusion This study establishes the quality control method of standard decoction of Lonicerae Japonicae Caulis decoction pieces， which is accurate， stable， and with good repeatability， which can provide references for the quality control of Lonicerae Japonicae Caulis formula granules.

Keywords： Lonicerae Japonicae Caulis； decoction pieces； standard decoction； formula granules； transfer rate； extractum rate； content determination； characteristic chromatogram

忍冬藤為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥莖枝[1]。始載于陶弘景《名醫(yī)別錄》：“今處處皆有，似藤生，凌冬不凋，故名忍冬。”忍冬藤有清熱解毒、疏風(fēng)通絡(luò)的功效。忍冬藤在我國大部分地區(qū)有分布，很多地方已有栽培，其中以河南、山東的產(chǎn)量最大。研究表明，忍冬藤主要活性成分為有機(jī)酸類和環(huán)烯醚萜苷類[2-3]。綠原酸和咖啡酸具有一定的抗菌、抗感染作用[4]，在忍冬藤中含量較高，為其主要活性成分[5]；馬錢苷具有抗炎及調(diào)節(jié)免疫功能的作用[5]。三者的藥理活性能夠體現(xiàn)忍冬藤的功效。因此，以綠原酸、咖啡酸、馬錢苷為指標(biāo)成分測(cè)定其含量，能更好地整體評(píng)價(jià)忍冬藤的內(nèi)在質(zhì)量。

標(biāo)準(zhǔn)煎液的制備遵循傳統(tǒng)煎液的煎煮原則，對(duì)工藝流程要求規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化，保證臨床用藥的準(zhǔn)確性[6]。因此，本研究以水為溶媒，采用煎煮方式制備15批忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液，對(duì)忍冬藤有效成分進(jìn)行提取，通過測(cè)定綠原酸、咖啡酸、馬錢苷3個(gè)主要活性成分的含量、轉(zhuǎn)移率和出膏率的范圍，并以特征圖譜為主的整體質(zhì)量控制方法建立15批忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液的UPLC特征圖譜，評(píng)價(jià)忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液的內(nèi)在質(zhì)量，為忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量控制和源于忍冬藤水煎液的制劑質(zhì)量控制提供數(shù)據(jù)參考。

1 儀器與試藥

ACQUITY UPLC H-Class系統(tǒng)（PDA檢測(cè)器），美國沃特世公司；Empower3色譜工作站，美國沃特世公司；LC-15C高效液相色譜儀（SPD-15C型紫外檢測(cè)器、SIL-10AF自動(dòng)進(jìn)樣器、CTO-15C柱溫箱），日本島津公司；Pilot5-8L真空冷凍干燥機(jī)，北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司；TB-215D、BSA224S-CW電子分析天平，北京賽多利斯；JY10001型電子天平，上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司；KQ-250型超聲波清洗器（功率250 W，頻率40 kHz），昆山市超聲儀器有限公司；RE-3000型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠）；BJH-W200F型陶瓷自動(dòng)中藥煲（電源220 V、50 Hz，功率300 W，容量2.0 L），廣東天際電器股份有限公司；DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，上海一恒科技有限公司。

綠原酸對(duì)照品（批號(hào)PY20170216，純度≥99%），南京普怡生物科技有限公司；咖啡酸對(duì)照品（批號(hào)110885-200102，純度≥99%），中國食品藥品檢定研究院；馬錢苷對(duì)照品（批號(hào)MUST-16080704，純度≥98%），成都曼思特生物科技有限公司；乙腈（Fisher化學(xué)試劑公司）、磷酸為色譜純，水為超純水，其他試劑均為分析純。15批不同產(chǎn)地忍冬藤飲片均由神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供，經(jīng)河北省藥品檢驗(yàn)院孫寶惠主任藥師鑒定為忍冬科植物忍冬Lonicera japonica Thunb.的干燥莖枝，樣品來源見表1。

2 方法與結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)煎液的制備

取忍冬藤飲片100 g，使用煎藥壺煎煮2次。一煎加水10倍，浸泡30 min，武火煮沸，文火保持微沸20 min；二煎加水8倍，武火沸騰，文火保持微沸15 min。趁熱用200目篩網(wǎng)分離煎液，煎液迅速放入冷水浴中冷卻，合并2次煎液。60 ℃真空減壓濃縮至密度為1.00～1.02 g/mL，使用密度計(jì)和pH計(jì)測(cè)定流浸膏的密度和pH值，放入冰柜冷凍（-40 ℃）過夜，用冷凍干燥機(jī)干燥，得標(biāo)準(zhǔn)煎液干膏粉，計(jì)算出膏率。出膏率（%）=凍干粉質(zhì)量÷飲片質(zhì)量×100%，按2015年版《中華人民共和國藥典》（四部）通則0800水分測(cè)定法第二法（烘干法）測(cè)定水分。結(jié)果見表2。以均值上下浮動(dòng)30%來規(guī)定出膏率，15批忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液出膏率為6.44%～11.95%。

2.2 綠原酸、咖啡酸和馬錢苷含量測(cè)定

2.2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent C18（4.6 mm×250 mm，5 ?m）；流動(dòng)相A為0.3%磷酸，流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫（0～30 min，7%B；30～32 min，7%→10%B；32～50 min，10%B；50～51 min，10%→90%B；51～57 min，90%B；57～58 min，90%→7%B；58～65 min，7%B）；流速：1.0 mL/min；檢測(cè)波長：馬錢苷236 nm，綠原酸、咖啡酸327 nm；進(jìn)樣量：5 ?L；柱溫：35 ℃。色譜圖見圖1。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備

取綠原酸、咖啡酸、馬錢苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇配制成每1 mL含34.6 ?g綠原酸、6.1 ?g咖啡酸和67.9 ?g馬錢苷的混合對(duì)照品溶液，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備

取本品干膏粉適量，研細(xì)，取約0.1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率35 kHz）10 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，即得忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液供試品溶液；取15批飲片粉末各約1.0 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲處理（功率250 W，頻率35 kHz）30 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，即得忍冬藤飲片供試品溶液。

2.2.4 方法學(xué)考察

2.2.4.1 線性關(guān)系考察

精密吸取對(duì)照品溶液4、6、8、10、12、14 ?L，按上述色譜條件測(cè)定，以綠原酸進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，測(cè)定的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明綠原酸在0.138～0.484 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=1.991×106X+3.348×104，r=0.999 8；以咖啡酸進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，測(cè)定的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明咖啡酸在0.024～0.085 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=4.400×106X+1.419×104，r=0.999 7；以馬錢苷進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，測(cè)定的峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明馬錢苷在0.271～0.950 ?g范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為：Y=1.433×106X+5.419×104，r=0.999 6。

2.2.4.2 精密度試驗(yàn)

精密吸取對(duì)照品溶液5 ?L，按上述色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，綠原酸、咖啡酸、馬錢苷峰面積的RSD分別為1.04%、1.52%、1.19%，均小于2%，表明儀器精密度良好。

2.2.4.3 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱取標(biāo)準(zhǔn)煎液干膏粉約0.1 g，按供試品溶液制備方法制備。精密吸取供試品溶液5 ?L，按上述色譜條件分別于0、2、4、6、8、10 h進(jìn)樣測(cè)定，綠原酸、咖啡酸、馬錢苷峰面積RSD分別為1.85%、1.68%、1.08%，結(jié)果表明，供試品溶液中綠原酸、咖啡酸、馬錢苷在10 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.4.4 重復(fù)性考察

精密稱取同一批樣品6份，每份約0.1 g，按供試品溶液制備方法制備，精密吸取供試品溶液5 ?L，按上述色譜條件進(jìn)樣，計(jì)算得供試品溶液綠原酸、咖啡酸、馬錢苷總含量RSD=0.80%，結(jié)果表明，該方法重復(fù)性良好。

2.2.4.5 加樣回收率試驗(yàn)

取同一批樣品9份，研細(xì)，每份約0.05 g，精密稱定。精密加入一定體積的綠原酸、咖啡酸、馬錢苷對(duì)照品貯備液，按供試品溶液制備方法制備，按上述色譜條件測(cè)定，每份平行測(cè)定3次，結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確度良好，見表3。

2.2.5 樣品含量測(cè)定

采用上述方法測(cè)定15批忍冬藤飲片和標(biāo)準(zhǔn)煎液中綠原酸、咖啡酸、馬錢苷的含量，計(jì)算轉(zhuǎn)移率。結(jié)果見表4。以均值上下浮動(dòng)30%規(guī)定綠原酸、咖啡酸、馬錢苷的含量和轉(zhuǎn)移率的變化范圍，綠原酸、咖啡酸、馬錢苷含量范圍分別為12.17～22.61 mg/g、2.75～5.12 mg/g、21.71～40.32 mg/g，轉(zhuǎn)移率范圍分別為28.13%～52.25%、53.93%～100.15%、40.04%～74.36%。

2.3 特征圖譜

2.3.1 色譜條件

色譜柱為ACQUITY UPLC BEH C18（2.1 mm×100 mm，1.7 ?m）；流動(dòng)相A為0.1%磷酸，流動(dòng)相B為乙腈，梯度洗脫（0～4.5 min，95%→92%B；4.5～6 min，92%→91%B；6～8 min，91%→90%B；8～9 min，90%→89%B；9～12 min，89%B；12～12.1 min，89%→95%B；12.1～20 min，95%B）；流速0.3 mL/min；檢測(cè)波長238 nm；柱溫30 ℃；樣品室溫度8 ℃；進(jìn)樣量1 ?L。

2.3.2 對(duì)照品溶液制備

取綠原酸、咖啡酸、馬錢苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇配制成每1 mL含34.6 ?g綠原酸、6.1 ?g咖啡酸和67.9 ?g馬錢苷的混合對(duì)照品溶液，即得。選擇馬錢苷峰作為參照峰。

2.3.3 供試品溶液的制備

取干膏粉約0.1 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50%甲醇50 mL，密塞，稱定質(zhì)量，超聲（功率250 W，頻率35 kHz）10 min，放冷，再稱定質(zhì)量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，過濾，即得。

表4 忍冬藤飲片和標(biāo)準(zhǔn)煎液中綠原酸、咖啡酸、馬錢苷含量及轉(zhuǎn)移率測(cè)定結(jié)果

編號(hào) 標(biāo)準(zhǔn)煎液含量/（mg/g） 飲片含量/（mg/g） 轉(zhuǎn)移率/%

綠原酸 咖啡酸 馬錢苷 綠原酸 咖啡酸 馬錢苷 綠原酸 咖啡酸 馬錢苷

S1 14.12 4.37 21.78 2.80 0.59 2.84 45.88 67.25 69.73

S2 13.60 4.23 21.12 3.17 0.52 3.87 43.34 82.87 55.10

S3 14.16 4.89 20.59 2.95 0.61 3.44 46.05 77.40 57.47

S4 11.24 3.10 29.72 2.98 0.39 5.18 32.45 67.62 49.34

S5 12.57 3.31 32.05 3.05 0.40 5.40 34.23 68.38 49.28

S6 14.01 4.05 34.96 2.99 0.50 5.73 44.10 76.75 57.33

S7 13.26 3.96 33.54 2.93 0.51 5.90 41.59 71.88 52.26

S8 12.88 4.02 32.03 3.16 0.48 5.54 38.70 80.13 54.95

S9 12.64 3.30 30.09 3.18 0.49 5.44 34.19 57.74 47.58

S10 27.85 4.07 36.32 7.25 0.43 6.19 34.55 84.28 52.79

S11 15.07 3.98 27.52 4.03 0.51 4.87 30.26 63.14 45.77

S12 33.74 3.90 40.49 8.19 0.43 6.36 42.45 92.82 65.58

S13 22.75 3.82 39.89 5.12 0.45 6.00 45.29 86.42 67.81

S14 22.52 4.37 35.98 4.83 0.44 4.87 37.73 80.15 59.80

S15 20.42 3.66 29.14 3.84 0.36 3.90 52.07 98.77 73.26

2.3.4 方法學(xué)考察

2.3.4.1 精密度試驗(yàn)

精密吸取同一份供試品溶液，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，結(jié)果RSD均小于3%，表明儀器精密度良好。

2.3.4.2 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密吸取同一份供試品溶液，分別于制備后0、4、6、8、10、14 h進(jìn)樣，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，結(jié)果RSD均小于3%，表明供試品溶液在14 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.3.4.3 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱取同一批干膏粉樣品6份，按供試品溶液制備方法制備，精密吸取供試品溶液1 ?L，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣分析，計(jì)算各共有峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積，結(jié)果RSD均小于3%，表明該方法重復(fù)性良好。

2.3.5 特征圖譜的建立

分別制備15批忍冬藤飲片、標(biāo)準(zhǔn)煎液的供試品溶液，按“2.3.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定，記錄15 min色譜圖，將所得色譜數(shù)據(jù)導(dǎo)入《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012版）》軟件，采用多點(diǎn)校正將譜峰自動(dòng)匹配，中位數(shù)法計(jì)算得樣品特征圖譜的共有模式，結(jié)果見圖2、圖3。確定了15批忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液中10個(gè)共有峰，并指認(rèn)峰4為綠原酸，峰5為咖啡酸，峰10為馬錢苷（S峰），見圖4。

2.3.6 指紋圖譜相關(guān)性分析

采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012版）》計(jì)算相似度，結(jié)果見表5。15批忍冬藤飲片特征圖譜的相似度均在0.95以上；15批忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液特征圖譜的相似度均在0.96以上，表明15批忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液有良好的相似性。比較忍冬藤飲片、標(biāo)準(zhǔn)煎液的特征圖譜，對(duì)共有峰進(jìn)行分析可知，忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液10個(gè)特征峰在飲片中均能得到追蹤，表明忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液與飲片化學(xué)成分基本一致，見圖5。

3 討論

忍冬藤以莖枝入藥，為清熱解毒類中藥，不宜久煎，通過對(duì)煎煮時(shí)間和加水量的考察，并參考《醫(yī)療機(jī)構(gòu)中藥煎藥室管理規(guī)范》（國中醫(yī)藥發(fā)〔2009〕3號(hào)），確認(rèn)一煎加10倍水，煎煮20 min，二煎加8倍水，煎煮15 min；為了防止有效成分熱分解，盡可能保留原成分，本試驗(yàn)采用《中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液研究策略》[6]分離和濃縮方法，對(duì)藥渣和藥液進(jìn)行趁熱過濾、迅速冷卻及低溫減壓濃縮（溫度不超過60 ℃）處理；為盡可能去除藥液中的雜質(zhì)，保證藥液的正常過濾，通過對(duì)分離藥渣和藥液的篩網(wǎng)進(jìn)行考察，優(yōu)選出用200目篩網(wǎng)進(jìn)行固液分離，最大限度達(dá)到與臨床湯劑一致的目的。

標(biāo)準(zhǔn)煎液以水為溶媒，在煎煮過程中藥效成分已被提取出來，因此采用超聲方式溶解即可。本試驗(yàn)對(duì)提取溶媒和提取時(shí)間進(jìn)行了考察，分別以50%甲醇、75%甲醇和100%甲醇作為提取溶媒，結(jié)果表明以50%甲醇提取較完全，故選用50%甲醇作為提取溶劑；選擇10、20、30 min進(jìn)行提取時(shí)間考察，結(jié)果提取效率沒有差異，故選擇超聲10 min進(jìn)行提取即可。

綠原酸、咖啡酸和馬錢苷是忍冬藤的主要活性成分，易溶于水、甲醇，標(biāo)準(zhǔn)煎液以水為提取溶媒，測(cè)定這3個(gè)成分的含量能夠更好地整體評(píng)價(jià)忍冬藤的內(nèi)在質(zhì)量。以其作為制劑的含量測(cè)定指標(biāo)，采用中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液來標(biāo)化忍冬藤不同用藥形式，可以提高臨床用藥的準(zhǔn)確性和療效的一致性，對(duì)保證藥品質(zhì)量具有實(shí)際意義。

本試驗(yàn)基于HPLC和UPLC建立了忍冬藤飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液的含量測(cè)定方法及特征圖譜方法，克服了單一成分信息量不全的缺點(diǎn)；忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液與飲片特征圖譜的主要色譜峰基本一致，其對(duì)照特征圖譜的相似度高達(dá)0.994以上，表明忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液與飲片主要化學(xué)成分基本等同，保證其質(zhì)量的一致性，含量測(cè)定結(jié)合特征圖譜能夠較全面可靠地控制忍冬藤標(biāo)準(zhǔn)煎液的內(nèi)在質(zhì)量；方法學(xué)考察中，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性的RSD均小于3%，表明此方法準(zhǔn)確、可行、重復(fù)性良好。本研究可為忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量控制和評(píng)價(jià)提供可靠的數(shù)據(jù)參考。

參考文獻(xiàn)：

[1] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典：一部[M].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：193.

[2] 陳玲，張海艷，李曉，等.忍冬的化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2015，30（1）：108-113.

[3] 賈獻(xiàn)慧，王曉，張永清.忍冬藤酚酸類化學(xué)成分分離[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2015，21（5）：69-71.

[4] 宋亞玲，王紅梅，倪付勇，等.金銀花中酚酸類成分及其抗炎活性研究[J].中草藥，2015，46（4）：490-495.

[5] 趙媛媛，楊倩茹，郝江波，等.金銀花與忍冬藤及葉藥理作用差異的研究進(jìn)展[J].中國中藥雜志，2016，41（13）：2422-2426.

[6] 陳士林，劉安，李琦，等.中藥飲片標(biāo)準(zhǔn)煎液研究策略[J].中國中藥雜志，2016，41（8）：1367-1375.

（收稿日期：2018-06-21）

（修回日期：2018-07-13；編輯：陳靜）