對乙酰氨基酚注射液制備工藝及穩定性研究

葉 靜，張曉宇，方 群，張全，李長兵

（1.成都醫學院藥學院，成都 610500；2.天津大學藥學院，天津 300072）

對乙酰氨基酚（acetaminophen） 俗稱撲熱息痛（paracetamol），為乙酰苯胺類解熱鎮痛藥。由于對乙酰氨基酚療效好、見效快，對胃腸道刺激小，對凝血機制無影響，且正常劑量下對肝臟無損害，因此被世界衛生組織推薦作為安全有效的解熱藥物廣泛應用于兒科[1，2]。對乙酰氨基酚為環氧化酶抑制劑，通過選擇性抑制下丘腦體溫調節中樞前列腺的合成，導致外周血管擴張，出汗而達到解熱的作用；通過抑制前列腺素等的合成和釋放，提高痛閾而起到鎮痛作用，其鎮痛作用較弱，對輕、中度疼痛有效。近些年，針對對乙酰氨基酚，人們進行了大量的制劑研究，并研制了一些口腔崩解片、溫敏凝膠、結腸靶向制劑[3]等新型制劑，提高藥物的治療效果。

對乙酰氨基酚為最常用的非甾體抗炎解熱鎮痛藥，因其結構中具有酚羥基和乙酰氨基，在水溶液中容易水解形成對氨基酚，而對氨基酚又容易降解成醌亞胺。對乙酰氨基酚在水溶液中是不穩定的，使其不宜做成注射液，但注射液具有起效快，適用于不能口服的患者等優點，在臨床應用中占有重要地位，因此研究對乙酰氨基酚注射液的制備方法，以滿足臨床上對注射液的需求。目前對降低對乙酰氨基酚注射液中有效成分水解的相關報道不多，且現有技術均不能很好的解決對乙酰氨基酚注射液的穩定性。本研究優選對乙酰氨基酚注射液的制備工藝，并考察其穩定性，確保對乙酰氨基酚注射液的質量。

1 實驗材料

1.1 儀器

BP-211D型電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）；HH-2型數顯恒溫水浴鍋（上海常思工貿有限公司）；PHS-320型pH計（成都方舟科技有限公司）；1260安捷倫高效液相色譜儀（安捷倫科技（中國） 有限公司）；Kromasil C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm，阿克蘇諾貝爾（上海）管理有限公司）；GR60DA立式自動壓力蒸汽滅菌器（致微（廈門）儀器有限公司）；UPT純水儀（優普超純科技公司）；KH2200DB型數控超聲波清洗器（昆山禾創超聲儀器有限公司）。

1.2 試劑

對乙酰氨基酚（成都市科龍化工試劑廠）；磷酸氫二鈉（成都市科龍化工試劑廠）；甘露醇（天津博迪化工股份有限公司）；鹽酸半胱氨酸（合肥新恩源生物技術有限公司）；甲醇（色譜純，SIGMA-ALDRICH公司）；甲醇（分析純，成都市科龍化工試劑廠）；鹽酸（四川西隴化工有限公司）；氫氧化鈉（天津市瑞金特化學品有限公司）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱：Kromasil C18柱 （150×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇-水（18：82）；柱溫：25℃；流速：1.0 mL/min，進樣量：10μL；檢測波長：257nm。

2.2 制備工藝

根據已有專利以及參考文獻[4-7]，并結合各成分的性質，初定制備工藝如下：將一定量甘露醇溶于50℃注射用水中，另將磷酸二氫鈉和一定量對乙酰氨基酚原料藥分批加入到80℃注射用水中，混合后加入鹽酸半胱氨酸，并補充注射用水至100mL。溶液冷至室溫后，用10%鹽酸調節pH，用0.22μm的微孔濾膜濾過，脫氣，灌封，高溫滅菌即得。

2.3 磷酸氫二鈉用量的篩選

磷酸氫二鈉為pH緩沖劑，能使注射液的pH處在相對穩定的狀態，減少主藥的水解及其它輔料的降解，為此，需要對其用量進行篩選。按照2.2項下方法分別制備含磷酸氫二鈉100mg、125mg、150mg、175mg、200mg 和 225mg 的 樣品，比較所含對乙酰氨基酚的含量，確定磷酸氫二鈉的最佳用量，結果見表1。

表1 磷酸氫二鈉用量篩選結果

由表1可知，當磷酸氫二鈉用量為150mg和175mg時，對乙酰氨基酚含量大于95%，均符合藥典規定。且在磷酸氫二鈉用量為175mg時，對乙酰氨基酚含量最高，達到99.00%，因此選擇磷酸氫二鈉的用量為175mg。

2.4 產品pH的考察

在不同pH條件下，對乙酰氨基酚的穩定性不同，在酸性或堿性條件下對乙酰氨基酚會發生降解，影響產品的療效并可能會增加毒性，因此需要考察注射液的最適pH。實驗選用“2.3”項所得最佳磷酸氫二鈉用量，分別調節pH為4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0，檢驗樣品的性狀、澄明度、含量等，確定注射液的適宜pH，并考察其穩定性。

表2 pH考察結果

由表2可知，樣品的pH值均無明顯變化，但是pH為6.0時對乙酰氨基酚含量最高，因而選擇pH6.0作為注射液的pH。

2.5 滅菌工藝的選擇

根據《中國藥典》2010年版附錄ⅩⅦ滅菌法規定，選擇濕熱滅菌中的熱壓滅菌法。將按上述處方工藝所制備的樣品分別在121℃熱壓滅菌20min和115℃熱壓滅菌30min，考察不同滅菌條件下注射液的性狀，pH值及對乙酰氨基酚含量的變化，結果見表3。

表3 對乙酰氨基酚注射液制備工藝研究中不同滅菌條件比較

由表3可知，2種條件滅菌下樣品的性狀無明顯變化，均為無色透明，pH也無明顯變化，均處于規定pH范圍，且均能達到滅菌效果。根據實際情況及主藥含量減少率，選擇115℃熱壓滅菌30min作為對乙酰氨基酚注射液的滅菌條件。

2.6 穩定性考察

將按上述處方工藝所制備的樣品密封后，室溫與避光陰涼處放置30d，考察注射液的性狀，pH值及對乙酰氨基酚含量的變化，結果見表4。

在室溫下密封放置30d后，樣品性狀無明顯變化，pH也無明顯變化，對乙酰氨基酚的含量變化均小于1.0%，此制備工藝制備的對乙酰氨基酚注射液在30d內穩定性較好。

表4 對乙酰氨基酚注射液穩定性考察結果

綜合以上實驗結果，對乙酰氨基酚注射液制備工藝最優條件為磷酸氫二鈉用量為175mg，控制產品pH在6.0，并在115℃下高壓蒸汽滅菌30min，可以成功制得對乙酰氨基酚注射液，產品規格為10mg/mL。此產品在常溫下密封放置30d穩定性良好。

4 討論

對乙酰氨基酚注射液對pH較敏感，因此產品需嚴格控制pH在有效范圍內。可在產品制備過程中即調節pH，以減小長時間制備過程中對乙酰氨基酚的水解，提高對乙酰氨基酚含量，減少副產物的生成。

作者參考文獻[4]通過對甲醇-水溶液進行配比調試，當流動相為甲醇-水溶液（18-82）時，主峰保留時間適宜，峰型較好，且與雜質能很好地分離。該法簡單，靈敏，專屬性強，能夠很好的控制產品的質量。

長期穩定性和加速穩定性后期將繼續考察。