多花素馨總生物堿模擬胃液條件下清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成

呂祎彤，羅琨映，麻燕琴，張 嵐，何婷婷

(西北民族大學 化工學院，甘肅 蘭州 730124)

多花素馨(Jasminum polyanthum Franch)為木犀科(Oleaceae)素馨屬(Jasminum)植物[1]，又名素興花、雞爪花、狗牙花。多花素馨主產(chǎn)于中國四川、貴州、云南等地[2]，其氣味芳香，有舒肝解郁、行氣止痛、生津益氣、養(yǎng)肝明目、排毒養(yǎng)顏及健胃消積之功效[3]。

1 儀器與材料

1.1 儀器

紫外-可見分光光度計(SPECORD-50型，美國安捷倫公司)、旋轉蒸發(fā)儀(RE-52AA，上海亞榮生化儀器廠)、超聲清洗儀(SK8200LH，上海科導超聲儀器有限公司)。

1.2 材料

多花素馨(購自安國市涵博堂中藥材銷售有限公司)，鹽酸小檗堿對照品(上海源葉生物科技有限公司)1-萘胺(上海展云化工有限公司)，無水對氨基苯磺酸(上海中秦化學試劑有限公司)，N-1-萘乙二胺鹽酸鹽(天津光復精細化工研究所)，二甲胺(天津光復精細化工研究所)，其他均為國產(chǎn)市售分析純。

2 方法

2.1 標準曲線的建立

精密稱取鹽酸小檗堿對照品0.0050g，用適量鹽酸-甲醇溶液(1∶/100)溶解至25mL容量瓶中，待完全溶解后定容，搖勻，配置成濃度為0.2000mg/mL的鹽酸小檗堿對照品貯備液。將對照品貯備液分別稀釋成濃度為0.0010mg/mL、0.0020mg/mL、0.0040mg/mL、0.0060mg/mL、0.0080mg/mL、0.0100mg/mL、0.0200mg/mL的溶液，在358nm出測各溶液的吸光度。

2.2 多花素馨總生物堿的提取

精密稱取多花素馨0.5000g，按料液比為1∶30的比例加入體積分數(shù)為85%的乙醇，超聲提取45min后，在70℃的條件下水浴提取90min，得到多花素馨總生物堿的提取液。

2.3 模擬胃液的制備

模擬胃液A：稱取2gNaCl，加去離子水溶解，加入7mL濃鹽酸，加去離子水定容至1000mL。

2.4 亞硝酸鹽清除率的測定-鹽酸萘乙二胺法[4]

取5支25mL比色管加入模擬胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出，分別加入濃度為0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的樣液2.0mL，加入5ug/mL的亞硝酸鈉溶液2mL，分別37℃下水浴30min取出，立即加入0.4%對氨基苯磺酸2mL混勻，靜置3～5min后分別加入1mL 0.2%的鹽酸萘乙二胺溶液，加蒸餾水至刻度混勻，靜置15min，在538nm下測吸光度A1，以去離子水代替亞硝酸鈉做空白對照試驗測吸光度A01，以去離子水代替生物堿溶液做空白對照試驗測吸光度A02，亞硝酸鹽清除率(%)=(A02+A01-A1)/A02。

2.5 亞硝胺阻斷能力測定[5]

取5支25mL比色管加入模擬胃液A10mL，37℃下水浴10min后取出加入濃度為0.0004mg/mL、0.0008mg/mL、0.0012mg/mL、0.0016mg/mL、0.0020mg/mL的樣液2mL，再加入1mmol/mL二甲胺溶液1mL，1mmol/mLNaNO21mL，蒸餾水稀釋至刻度， 37℃下水浴1h，移液管移取1mL上述溶液加入到試管中，加入質量分數(shù)為0.5%的Na2CO3溶液0.5mL,于紫外分析儀上照15min,取出后加入質量分數(shù)為質量分數(shù)1.0%對氨基苯磺酸1.5mL，再加入質量分數(shù)為0.1%α-萘胺1.5mL，去離子水0.5mL，搖勻靜置15min，在波長525nm波長下測吸光度A1，以去離子水代替亞硝酸鈉做空白對照試驗測吸光度A01，以去離子水代替生物堿溶液做空白對照試驗測吸光度A02，亞硝胺阻斷率(%)=(A02+A01- A1)/A02。

3 結果與討論

3.1 標準曲線方程

建立的標準曲線方程為Y = 60.883X- 0.0039，R2= 0.9999(n=7)，鹽酸小檗堿在0.0010～0.0200mg/mL范圍內呈良好的線性關系。

3.2 亞硝酸鹽清除率結果

圖1 亞硝酸鹽清除率結果

由圖1可知，在濃度范圍為0.0004～0.0020mg/mL時，濃度為0.0016mg/mL時，多花素馨生物堿，維生素C在模擬胃液A條件下對亞硝酸鹽清除率達到最大，并且在模擬胃液A中多花素馨總生物堿對亞硝酸鹽清除能力稍弱于維生素C。

3.3 阻斷亞硝胺合成結果

由圖2可知，在濃度范圍為0.0004～0.0020mg/mL時，濃度為0.0012mg/mL時，多花素馨總生物堿在模擬胃液A中對亞硝胺阻斷能力最大，濃度為0.0016mg/mL時，維生素 C在模擬胃液A中對亞硝胺合成阻斷能力最大。

圖2 阻斷亞硝胺合成結果

[1] 張正付,邊寶林,田秀峰.素馨屬植物化學成分及藥理活性研究進展[J].中國中藥雜志,2004,29(12):1209-1212.

[2] 林善遠.素馨花藥材質量標準的研究[J].世界中醫(yī)藥,2013,8(6):667-668.

[3] 羅塞塞,郝婷,趙桂琴.素馨花總環(huán)烯醚萜苷的大孔樹脂富集純化工藝優(yōu)選[J].中國實驗方劑學雜志,2013,19(15):13-16.

[4] 梁英躍,傅 亮,孫穎鶯,等.模擬胃液條件下紅豆多肽清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的研究[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2010,36(4):40-44.

[5] 呂 娜,任利江.模擬胃酸條件下冬棗和青棗清除亞硝酸鹽及阻斷亞硝胺合成的比較研究[J].毒理學雜志,2016,30(5):378-380.