長期高頻血小板獻(xiàn)血者凝血功能及健康狀況變化研究

張玉忠，欒 鹢

(1.內(nèi)鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院血庫,河南南陽 474350；2.南陽市中心血站,河南南陽 473000)

血小板輸注是目前預(yù)防和治療因血小板數(shù)量減少或者功能異常所致出血的重要手段，臨床對(duì)單采血小板需求量較大[1]。2011年，原衛(wèi)生部頒布《獻(xiàn)血者健康檢查要求》[2]將單采血小板最短間隔時(shí)間縮短為2周，不大于24次/年，不少固定獻(xiàn)血者長期以最大頻率捐獻(xiàn)血小板。枸櫞酸鹽在人體內(nèi)代謝快，大量應(yīng)用于尿毒癥終末期患者血液透析，安全性已得到證實(shí)[3]，而單采血小板枸櫞酸鹽抗凝劑(ACD)回輸量遠(yuǎn)低于血液透析，故長期血小板捐獻(xiàn)者健康狀況研究應(yīng)注重血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否穩(wěn)定再升[4]。但國內(nèi)相關(guān)研究較少，國家相關(guān)規(guī)定中對(duì)單采后凝血狀態(tài)的監(jiān)測亦幾乎為零。為此，筆者研究了南陽市中心血站60位長期以2周/次頻率進(jìn)行血小板捐獻(xiàn)者的凝血功能及健康狀況，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年2月至2018年6月在南陽市中心血站以最高頻率(2周/次)連續(xù)捐獻(xiàn)血小板≥24次的捐獻(xiàn)者60例作為研究對(duì)象。其中男53例，女7例，中位年齡是27.5歲(21～45歲)。所有血小板捐獻(xiàn)者均簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《獻(xiàn)血者健康檢查要求》(GB18467-2011)；(2)每兩周進(jìn)行1次單采血小板捐獻(xiàn)，且每次捐獻(xiàn)量為2 U。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)中途因任何原因中斷捐獻(xiàn)3周以上者；(2)因任何疾病不滿足獻(xiàn)血者健康要求者。

1.2檢測指標(biāo)方法 所有捐獻(xiàn)者首次捐獻(xiàn)血小板后(第1次檢測)及連續(xù)單采血小板(Amicus血細(xì)胞分離機(jī)-德國Fresenius Kabi公司生產(chǎn))達(dá)6次(第2次檢測)、12次(第3次檢測)、24次(第4次檢測)后休息10 min，于對(duì)側(cè)手臂采集乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血2 mL和枸櫞酸鈉抗凝血2 mL，于血小板采集24 h后采集生化促凝血2 mL，血樣采集后1 h內(nèi)上機(jī)檢測，所有檢測均嚴(yán)格按照相應(yīng)操作規(guī)程進(jìn)行。

1.2.1血常規(guī)和生化檢測 血常規(guī)使用日本希森美康血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(KX-21)進(jìn)行檢測，主要統(tǒng)計(jì)血紅蛋白(Hb)、血細(xì)胞壓積(Hct)、紅細(xì)胞(RBC)、平均紅細(xì)胞容積(MCV)、紅細(xì)胞分布寬度(RDW)、血小板(Plt)、平均血小板容積(MPV)及血小板分布寬度(PDW)。生化檢測指標(biāo)為促血小板生成素(TPO)、葉酸及清蛋白(Alb)，其中Alb使用AU-400全自動(dòng)生化分析儀檢測，TPO和葉酸使用瑞士FAME全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)檢測，試劑購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.2.2血栓彈力圖(TEG) TEG使用重慶鼎潤公司生產(chǎn)的血栓彈力圖儀及其配套試劑檢測。取枸櫞酸鈉抗凝血1 mL與高嶺土混勻，室溫孵育4 min后，取340 μL血樣與20 μL CaCl2在檢測杯中混勻，上機(jī)檢測，記錄TEG圖像和參考值。主要分析凝血反應(yīng)時(shí)間(R)、K值、α角、最大振幅(MA)和綜合凝血指數(shù)(CI)等5個(gè)參數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1血常規(guī) 4次血小板采集后Hct、MPV及PDW指標(biāo)比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而4次檢測Hb、RBC、MCV、RDW和Plt指標(biāo)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表1。

2.2生化指標(biāo) 4次血小板采集后TPO指標(biāo)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中第3次和第4次顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而4次檢測葉酸和Alb指標(biāo)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表2。

表1 4次血小板捐獻(xiàn)后血常規(guī)指標(biāo)比較±s)

注：與第1次比較,*P<0.05

表2 4次血小板捐獻(xiàn)后生化指標(biāo)比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

表3 4次血小板捐獻(xiàn)后TEG指標(biāo)比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

2.3TEG指標(biāo) 4次血小板采集后K值、α角及MA指標(biāo)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，其中第3次K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；而4次檢測R和CI指標(biāo)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。見表3。

3 討 論

《獻(xiàn)血者健康檢查要求》定義：歷史獻(xiàn)血3次以上，且1年內(nèi)有獻(xiàn)血經(jīng)歷者為固定獻(xiàn)血者[2]。國內(nèi)外統(tǒng)計(jì)資料顯示[5-6]，固定獻(xiàn)血者是各血站血液資源的主要來源，占比可達(dá)90%以上。ACD在體內(nèi)代謝時(shí)間小于15 min，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于尿毒癥終末期患者血液透析，被證明是安全可靠的[7]。由于血液透析需處理全身血液，而每次單采血小板血液處理量僅400～1 000 mL[8]，且尿毒癥患者透析頻率遠(yuǎn)高于2周/次，故單采血小板ACD回輸量遠(yuǎn)小于血液透析。所以，筆者認(rèn)為長期血小板捐獻(xiàn)者主要危害不在于ACD回輸，而在于血小板及血漿蛋白的丟失，在于血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否持續(xù)再升并維持穩(wěn)定。

戴宇東等[9]報(bào)道長期固定血小板捐獻(xiàn)會(huì)造成骨髓巨核細(xì)胞顯著增加、血小板生成能力增強(qiáng)。自規(guī)定獻(xiàn)血頻率提高以來，雖未出現(xiàn)如高凝狀態(tài)腦血管栓塞等單采血小板相關(guān)的嚴(yán)重不良事件，但國內(nèi)在長期固定獻(xiàn)血者凝血及健康狀況變化研究仍不夠全面[10]。相關(guān)研究多從歷史血小板捐獻(xiàn)次數(shù)進(jìn)行分析，未考慮近期捐獻(xiàn)頻率[11-12]。本文所有研究對(duì)象均以2周/次的最高頻率捐獻(xiàn)血小板，血常規(guī)結(jié)果顯示，第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，提示高頻捐獻(xiàn)血小板對(duì)血小板形態(tài)影響較大，在堅(jiān)持半年左右的捐獻(xiàn)者中尤為顯著。第4次除MPV值外，其余指標(biāo)與第1次間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，提示血細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)在堅(jiān)持高頻血小板捐獻(xiàn)1年后基本耐受而恢復(fù)正常。這與AKAY等[13]的結(jié)論類似。

研究指出，長期單采血小板捐獻(xiàn)者血清鐵隨著血小板捐獻(xiàn)次數(shù)的增多而減少[14]。葉酸是合成血細(xì)胞的原料，Alb是血漿營養(yǎng)蛋白，TPO可促進(jìn)血小板生成，3種物質(zhì)均為消耗性原料，即隨著合成物質(zhì)增多而減少，故本研究將樣本采集時(shí)間定為血小板捐獻(xiàn)后24 h。結(jié)果顯示，4次檢測葉酸和Alb指標(biāo)間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，而第3次和第4次TPO指標(biāo)顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但均在正常范圍內(nèi)，與CABLE等[15]研究結(jié)果類似。提示，持續(xù)高頻血小板捐獻(xiàn)半年以上者，TPO可顯著降低。第4次TPO高于第3次，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。可能由于是1年以上捐獻(xiàn)者機(jī)體耐受，TPO逐漸恢復(fù)至初次捐獻(xiàn)水平；或長期捐獻(xiàn)者TPO將穩(wěn)定維持在更低水平，但這有待進(jìn)一步研究驗(yàn)證[16]。

K值延長提示纖維蛋白原缺乏，α角減小提示纖維蛋白原缺乏，MA值降低提示PLT聚集功能不足或數(shù)量降低[17]。TEG結(jié)果顯示，單采血小板12次后K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但仍在正常參考范圍內(nèi)。提示高頻血小板捐獻(xiàn)半年以上者凝血功能有所減弱，但尚無出血或血栓風(fēng)險(xiǎn)，是安全可控的。這與馮晴等[11]的研究結(jié)論一致。

綜上所述，1年內(nèi)未觀察到每兩周單采血小板2 U的捐獻(xiàn)者出血或血栓風(fēng)險(xiǎn)，健康狀況良好，但捐獻(xiàn)者TPO水平仍需進(jìn)一步研究。