血清胱抑素C與乳腺癌和宮頸癌及結(jié)腸直腸癌的關(guān)系探討

雷 鵬 侯 芳 陳開(kāi)揚(yáng) 向 尹（通訊作者）

（樂(lè)山市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科 四川 樂(lè)山 614000）

胱抑素C（Cystatin C,Cys C）是一種在所有有核組織以恒定速率產(chǎn)生的堿性非糖化蛋白質(zhì)，為半胱氨酸蛋白酶抑制劑家族中的一員。Cys C可以自由通過(guò)腎小球?yàn)V過(guò)膜,并在近曲小管被重吸收和降解，其血中濃度主要由腎小球?yàn)V過(guò)率決定，不受年齡、性別、肌肉量等因素的影響[1]。研究表明，半胱氨酸蛋白酶抑制劑（cystatin，Cys）能抑制細(xì)胞內(nèi)外的半胱氨酸蛋白酶，在腫瘤的生長(zhǎng)、血管生成、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移等方面起重要作用[2-3]。惡性腫瘤嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，患者死亡率高，研究Cys C與惡性腫瘤的關(guān)系，對(duì)惡性腫瘤的診斷、治療及預(yù)后判斷有重要的意義。本文測(cè)定乳腺癌、宮頸癌、結(jié)腸直腸癌患者及健康體檢人員血清中Cys C水平，通過(guò)分析比較，探討Cys C與惡性腫瘤的關(guān)系。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年3月-8月本院收治的63例乳腺癌，34例宮頸癌，46例結(jié)腸直腸癌患者作為癌癥組。同時(shí)在本院選取同時(shí)期健康體檢人員79例作為對(duì)照組。收集患者入院后確診惡性腫瘤后及治療前的血清Cys C檢測(cè)結(jié)果，實(shí)驗(yàn)組所有患者的Crea和Urea均處于正常參考區(qū)間以排除腎功能損害的患者。

1.2 檢測(cè)方法

所有對(duì)象均采集空腹靜脈血，4000r/min離心5分鐘分離血清。Cys C測(cè)定采用膠乳免疫比濁法，Crea和Urea采用酶法，檢測(cè)均按試劑盒說(shuō)明書(shū)要求，在日立LABOSPECT 008全自動(dòng)生化分析儀上進(jìn)行檢測(cè)。以上檢測(cè)試劑盒由四川邁克生物科技股份有限公司提供。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，進(jìn)行χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料采用（±s）表示，進(jìn)行t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

對(duì)照組體檢人員血清Cys C水平為（0.91±0.14）mg/L；乳腺癌患者血清Cys C水平為（0.79±0.14）mg/L；宮頸癌患者血清Cys C水平為（0.75±0.15）mg/L；結(jié)腸直腸癌患者血清Cys C水平為（0.86±0.22）mg/L。與對(duì)照組比較，乳腺癌組和宮頸癌組患者血清Cys C明顯低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。與對(duì)照組比較，結(jié)腸直腸癌患者血清Cys C差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）,結(jié)果見(jiàn)表。

表 各癌癥組和對(duì)照組Cys C水平比較（±s）

表 各癌癥組和對(duì)照組Cys C水平比較（±s）

注：與對(duì)照組相比,*P＜0.01；#與對(duì)照組相比，P＜0.05。

組別 n Cys C（mg/L） P乳腺癌組 63 0.79±0.14* ＜0.01宮頸癌組 34 0.75±0.15* ＜0.01結(jié)腸直腸癌組 46 0.86±0.22# ＞0.05對(duì)照組 79 0.91±0.14

3.討論

惡性腫瘤嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，大多數(shù)患者的惡性腫瘤被發(fā)現(xiàn)時(shí)已到中晚期，治療效果不理想，死亡率高。最新的統(tǒng)計(jì)資料顯示，2014年我國(guó)新發(fā)病例數(shù)380.4萬(wàn)人，因癌癥死亡人數(shù)229.6萬(wàn)人，癌癥總發(fā)病率和死亡率位居第一的是肺癌，其發(fā)病率和死亡率占總癌癥發(fā)病人口的11.6%和18.4%（全球）、20%和27.3%（中國(guó)），同時(shí)乳腺癌在女性發(fā)病率排名第一，占女性癌癥的24.2%（全球）、16.5%（中國(guó)）。此外，相對(duì)于全球癌癥數(shù)據(jù)，我國(guó)肝癌、食管癌、胃癌、結(jié)直腸癌等消化系統(tǒng)腫瘤仍占很大比例。

腫瘤的發(fā)病機(jī)制一直是人們研究的焦點(diǎn)，隨著相關(guān)研究的不斷深入，人們發(fā)現(xiàn)血清和組織內(nèi)蛋白酶抑制劑表達(dá)量的變化與某些腫瘤細(xì)胞向外浸潤(rùn)與轉(zhuǎn)移有非常密切的關(guān)系，而Cys作為一種蛋白酶抑制劑可以抑制包括半胱氨酸蛋白酶在內(nèi)的多種蛋白水解酶的活性[4]。Cys依據(jù)其分子結(jié)構(gòu)主要分為三大超家族：Ⅰ型stefis，也稱(chēng)胞內(nèi)Cystatin，大多分布于細(xì)胞內(nèi)，主要包括stefisA和stefis B等。Ⅱ型Cystatin，屬于分泌型蛋白，廣泛分布于生物體液中，由大約120個(gè)氨基酸組成，主要包括Cystatin C、D、E、F、S、M等。Ⅲ型激肽原家族，其大部分為血漿中的激肽原[5-6]。Cys C是由120個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈非糖基化的多肽鏈，在C端有2個(gè)二硫鍵，由位于22號(hào)染色體短臂1區(qū)1帶的CST3基因編碼。因此，人體幾乎所有組織的有核細(xì)胞都可以持續(xù)而恒定的產(chǎn)生Cys C，包括肝、腎、肺、胃、腸、肺和胎盤(pán)。浸潤(rùn)及轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤的特征性表現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞能產(chǎn)生多種水解酶（如半胱氨酸蛋白酶，無(wú)花果蛋白酶等）降解細(xì)胞外基質(zhì)，破壞宿主黏膜屏障，促使腫瘤細(xì)胞穿透基底膜向深層組織浸潤(rùn)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移[5]。許多研究表明，半胱氨酸蛋白酶B（Cathepsin B）在多種腫瘤組織及腫瘤患者血清中升高[7-9]。Cys C被認(rèn)為是Cathepsin B最主要的抑制劑，同時(shí)對(duì)Cathepsin K、L、H等也有抑制作用，它通過(guò)與半胱氨酸蛋白酶結(jié)合，形成酶-抑制劑復(fù)合物，抑制酶的水解活性，從而抑制半胱氨酸蛋白酶對(duì)間質(zhì)組織及基底膜的破壞作用，抑制腫瘤細(xì)胞的侵襲能力。正常時(shí)二者處于平衡狀態(tài)，當(dāng)腫瘤形成時(shí)，半胱氨酸等水解酶類(lèi)表達(dá)失控，過(guò)度破壞間質(zhì)組織及基底膜，使腫瘤細(xì)胞向外轉(zhuǎn)移[10]。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳腺癌患者血清Cys C水平為（0.79±0.14）mg/L；宮頸癌患者血清Cys C水平為（0.75±0.15）mg/L；結(jié)腸直腸癌患者血清Cys C水平為（0.86±0.22）mg/L。與對(duì)照組比較，乳腺癌組和宮頸癌組患者血清Cys C明顯低于對(duì)照組，而結(jié)腸直腸癌患者血清Cys C沒(méi)有變化。以上結(jié)果表明，Cys C在不同類(lèi)型的腫瘤中表達(dá)不同，其在腫瘤發(fā)生發(fā)展和轉(zhuǎn)移的過(guò)程中可能出現(xiàn)量和功能的異常，由于有核細(xì)胞都能產(chǎn)生Cys C，故對(duì)腫瘤定位和確診并不起決定作用，主要用于腫瘤的輔助診斷和療效隨訪。

綜上所述，已有的研究結(jié)果證實(shí)Cys C作為半胱氨酸蛋白酶的內(nèi)源性抑制物具有重要的調(diào)節(jié)與保護(hù)功能，其與半胱氨酸酶之間的表達(dá)失衡與腫瘤的向外浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有關(guān)。但Cys C在不同類(lèi)型的腫瘤表達(dá)情況各不相同，其表達(dá)的量與活性與腫瘤的侵襲、生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的關(guān)系也不是很清楚，這需要進(jìn)一步的深入研究。