張潔 宛柏杰 2, 尚鵬祥 丁新倫 杜振國(guó) 吳祖建*
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水稻矮縮病毒Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生質(zhì)體后的表達(dá)
張潔1,#宛柏杰1, 2,#尚鵬祥1丁新倫1杜振國(guó)1吳祖建1,*
(1福建農(nóng)林大學(xué) 植物病毒研究所/福建省植物病毒學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室/閩臺(tái)作物有害生物生態(tài)防控國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室, 福州 350002;2江蘇沿海地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所, 江蘇 鹽城 224000;#共同第一作者;*通訊聯(lián)系人, E-mail: wuzujian@126.com)
【目的】為明確水稻矮縮病毒, RDV) Pns6和P8蛋白在病毒侵染水稻原生質(zhì)體后的表達(dá)動(dòng)態(tài),【方法】利用PEG介導(dǎo)的病毒侵染原生質(zhì)體體系,通過免疫熒光和電鏡技術(shù)分析Pns6、P8蛋白以及病毒粒體在水稻原生質(zhì)體中的定位;同時(shí),通過Western blot和實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析Pns6和P8蛋白及其RNA在水稻原生質(zhì)體中的積累量。【結(jié)果】病毒接種水稻原生質(zhì)體48 h后,Pns6蛋白在細(xì)胞質(zhì)中可以形成類似于病毒原質(zhì)(viroplasm)的點(diǎn)狀內(nèi)含體,P8蛋白也大量的表達(dá)。同時(shí),病毒粒體在水稻原生質(zhì)體中也形成內(nèi)含體狀的結(jié)構(gòu)。病毒接種水稻原生質(zhì)體12 h后,均可檢測(cè)到Pns6和P8蛋白的表達(dá),并且在36 h后達(dá)到最高值。病毒接種水稻原生質(zhì)體后,RNA在24 h時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高,RNA在36 h時(shí)表達(dá)量達(dá)到最高。【結(jié)論】RDV侵染水稻原生質(zhì)體后,Pns6和P8蛋白均有表達(dá),并且病毒也可能通過形成病毒原質(zhì)來(lái)完成病毒在寄主細(xì)胞的復(fù)制和裝配。
水稻矮縮病毒;水稻原生質(zhì)體;Pns6蛋白;P8蛋白
水稻矮縮病毒(, RDV)屬于呼腸孤病毒科()植物呼腸孤病毒屬()。該病毒是水稻矮縮病的病原,廣泛分布于朝鮮、日本、菲律賓等水稻種植區(qū),在我國(guó)主要分布于福建、云南和海南等南方稻區(qū)。……