毛細管電泳在玉米品種真實性鑒定中的應用

高素偉 張連海 趙新宇

（北京市通州區種子管理站，北京101117）

目前，北京市各區縣種子管理站通過田間小區種植來鑒定品種的真實性和純度，時效性較差，也無法提前避免農民遭受損失。SSR分子標記技術能夠對抽檢的樣品進行快速而準確的檢測，保證品種的真實性[1]。毛細管電泳主要應用于肽類、蛋白、核酸、離子和藥物等的分離和測定，是以高壓電場為動力，以毛細管為通道，依據樣品中分子量或堿基逐一分開[2]，可以同時對多個樣品、多個標記進行檢測，大大提高了檢測效率。因此，在現有條件下，利用SSR標記并結合毛細管電泳檢測技術對抽檢樣品進行品種真實性鑒定是提高各區縣種子站業務工作能力，確保種子市場安全的有效方法。

本文利用毛細管電泳熒光標記法對本轄區不同門店內抽取的6個玉米樣品進行檢測，初步判斷品種的真實性，對有疑問的樣品提交有資質的檢驗機構做進一步檢測。

1 材料與方法

1.1試驗材料供試材料為2017年3月份從轄區門店抽取的6份玉米樣品，1：金博士鄭單958；2：金娃娃鄭單 958；3：中字牌鄭單 958；4：德農鄭單 958；5：紀元1號；6：紀元1號。

1.2 基因組DNA的提取將抽檢的6個玉米樣品進行田間種植，在3葉期進行取樣，每個樣品取10個單株葉片，利用TIANGEN的新型植物基因組DNA提取試劑盒，按照操作規程提取DNA，并用1.5%的瓊脂糖凝膠電泳檢測。

1.3引物設計參照NY/T 1432-2014《玉米品種鑒定技術規程 SSR標記法》推薦的普通玉米真實性檢測基本核心引物P01～P20，分別為bnlg439w1、umc1335y5、umc2007y4、bnlg1940k7、umc2105k3、phi053k2、phi072k4、bnlg2291k4、umc1705w1、bnlg2305k4、bnlg161k8、bnlg1702k1、umc1545y2、umc1125y3、bnlg240k1、phi080k15、phi065k9、umc1492y13、umc1432y6、umc1506k12，引物由北京睿博興科生物技術有限公司合成?！?br>