新生兒血液白細胞參考區間的建立與驗證

618000德陽市第二人民醫院，四川 德陽

通過血液白細胞檢測來輔助診斷臨床患者的疾病狀況，是臨床最常用的診治技術手段之一。在新生兒這個特殊年齡段，白細胞水平變化巨大，需建立詳細參考區間。我們按照國際化學委員會提出的實驗室生物參考區間的建立方法和要求[1]，組織實施了新生兒白細胞正常參考值的調查和驗證分析，通過2011年-2017年收集的大量正常新生兒靜脈血樣白細胞(WBC)數據，建立新生兒本地區-各日齡段的WBC參考區間，并驗證評價其診斷效率。

資料與方法

檢測硬件體系：檢測設備包含SYSMEX XN-B1、 SYSMEX XN-1000、SYSMEX XN-350、SYSMEX 1800全自動血細胞分析儀。

質量保證體系：采用設備生產商配套檢測試劑組成完整的檢測體系，Bio-Rad三水平質控物進行日常質量控制[2]，并用EP9-A2規范進行設備間的檢測一致性控制。

數據來源：①正常新生兒血樣本的選取：2011年10月-2017年10月收治出生時Apgar評分[3]的新生兒、28 d內自愿參調新生兒，均無感染、無過敏、無血液系統相關疾病等顯著影響血細胞成分與形態的其他疾病，動員其監護人同意并簽署血樣采集知情告知書；在其監護人的允許下采集其靜脈血樣或末梢血樣，立即免費送檢且60 min內完成檢測。②正常新生兒白細胞數據選取：對上述樣本的檢測結果，經數據質量審核符合后，向醫生和參與者發送檢測報告，并按靜脈血和末梢血分類匯總整理。

驗證數據：2017年10月-2018年1月收治就診的新生兒血液白細胞數據。參照WS/T405-2012行業標準完成參考區間的效能驗證。

結 果

將有效靜脈血樣數據4 106例繪制成直方圖，按正態分布數據的參考區間估計方案，得到新生兒白細胞參考值區間(4.57～17.8)×109/L。

整理后的數據導入SPSS 19.0軟件做Kolmogorov-Smirnov統計分析，其漸進顯著性sig.=0.00(P＜0.01)，提示該數據不符合正態分布，上述正態分布數據法評估的參考區間結果應被質疑，須采用百分位數法估計其參考區間[3]。利用SPSS 19.0的百分位數法分析功能，得到P5=6.28和P95=17.4，即0～28 d新生兒白細胞參考值區間為(6.28～17.4)×109/L，見表1。

診斷效率驗證：①參考區間確定方法的符合性：隨訪30位兒科醫生對百分位數法所得的白細胞參考區間的接受率為96.7%，初步確認百分位數法評估的新生兒WBC參考區間具有合理性。即上述分析結果(6.28～17.4)×109/L可作為0～28 d新生兒白細胞正常參考值。②參考區間的診斷效率：隨機選擇臨床病例，將其臨床診斷結論與依據該參考區間的判定結果進行統計分析，結果該新生兒WBC參考區間的診斷敏感度85.1%，診斷特異性85.4%，臨床診斷符合率可達到85.2%，滿足臨床檢驗輔助診斷指標工作效率要求。

數據價值的再利用：①數據的分組分析：將收集到的數據按照新生兒日齡做多層分組統計，以找到比0～28 d新生兒組更有診斷效率的WBC參考區間。其分組信息和統計分析結果匯總，見表2。

由表2可見：0～28 d新生兒WBC數據應細分為(0，3)d和(3，21)d等數據組進行進一步分析，分別計算其參考區間。同時加入性別因素對參考區間的影響，見表3。

分組參考區間的診斷效率驗證：隨機選擇新生兒WBC檢測值并參照臨床診斷結論，對上述WBC的參考區間進行驗證分析。結果顯示：相較0～28 d數據組，各分組參考區間的診斷效率均有一定程度的提高，見表4。

表2 0～28 d新生兒WBC數據分組統計分析匯總表

表3 新生兒0～28 d白細胞數據的分組參考區間統計

表4 分組新生兒白細胞參考值區間的診斷效能統計表

討 論

通過對正常新生兒白細胞數值的調查分析，和對分組正常參考區間的臨床診斷效率驗證，得到(0，28)d新生兒組白細胞正常參考值(6.28～17.4)×109/L。其中，(0，3)d新生兒組白細胞正常參考值(6.67～19.0)×109/L；(3，21)d男性新生兒組白細胞正常參考值(5.59～12.4)×109/L，(3，21)d女性新生兒組白細胞正常參考值(6.47，16.7)×109/L。各參考區間的臨床診斷效率均＞85%。

對新生兒這個特殊年齡段的白細胞參考值進行研究，以更多地為臨床醫生和患者提供有效的輔助診斷依據。本研究將0～28 d日齡的無感染疾病和無血液疾病的新生兒作為調查對象。并通過數據的分組分析，得到新生兒(0，3)、(3，21)和(21，28)d WBC數據差異有統計學意義。出生≤6 h組和出生≤24 h組的新生兒白細胞數據差異未檢出顯著性。(21，28)d新生兒白細胞數據較其他日齡組有顯著性降低，是否該年齡段的新生兒白細胞水平已接近幼兒年齡段，或是因為地域性差異所致，需進一步擴充數據探究。該調查所選擇的檢測體系和量值溯源體系，保證了異常血細胞能被正確識別和白細胞計數偏差能得到有效糾正[3]。